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1、1基因工程原理復(fù)習(xí)題思考題基因工程原理復(fù)習(xí)題思考題1、基因工程的定義與特征。2、試述基因工程的主要研究?jī)?nèi)容。3、基因工程在食品工業(yè)上有何應(yīng)用發(fā)展?4、轉(zhuǎn)基因是一把雙刃劍,請(qǐng)客觀談?wù)剬?duì)轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品安全性的認(rèn)識(shí)。1、原核生物和真核生物的基因表達(dá)調(diào)控有何差別?2、什么是基因?根據(jù)基因的產(chǎn)物,基因可分為哪三類?3、引起核酸變性的因素主要有哪些?核酸變性后性質(zhì)有何變化?4、DNA復(fù)性及其影響因素。1,DNA凝膠電泳中核酸分子分離的機(jī)理。2,
2、DNA凝膠電泳中影響電泳遷移率的因素主要有哪些?3,PCR的原理和主要反應(yīng)過(guò)程,并分析影響PCR擴(kuò)增的影響因素。4,PCR引物設(shè)計(jì)的原則,若給一指定DNA序列并需要通過(guò)PCR擴(kuò)增此序列,如何設(shè)計(jì)擴(kuò)增引物?5,定量PCR的原理?Ct值的含義。6,分子雜交的類型主要有哪些?探針的標(biāo)記方法與標(biāo)記類型?常用的雙鏈DNA的標(biāo)記方法是哪兩種?7,Southern雜交一般過(guò)程及影響雜交因素。8,基因組文庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程?如何確定文庫(kù)的大小?9,基因文庫(kù)的
3、類型包括哪兩種?各有什么特點(diǎn)?10,一般質(zhì)粒DNA的構(gòu)型有哪幾種?在瓊脂糖凝膠電泳中的有何特點(diǎn)?11,堿裂解法提取質(zhì)粒DNA的原理,分析影響試驗(yàn)結(jié)果的各種可能因素。12,電泳緩沖液使用一定時(shí)間后出現(xiàn)DNA在凝膠中跑不動(dòng)現(xiàn)象的原因,有何解決辦法?13,電泳的指示劑和染色劑有何區(qū)別,各自的作用是什么?1限制性核酸內(nèi)切酶的類型,基因工程常用的是哪種限制性核酸內(nèi)切酶?2什么是星活性,產(chǎn)生星活性的因素可能有哪些?3結(jié)合已做的實(shí)驗(yàn),分析影響酶切的因
4、素。4限制性核酸內(nèi)切酶命名規(guī)則及各字母代表的含義。5簡(jiǎn)單敘述同尾酶和同裂酶的差別。6連接酶主要有哪些類型?有何異同點(diǎn)?影響連接酶連接效果的因素主要有哪些?7試分析提高平端DNA連接效率的可能方法。8基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些?1、作為基因工程載體,其應(yīng)具備哪些條件?2、質(zhì)粒的不相容性及其分子機(jī)理。3、載體的類型主要有哪些?在基因工程操作中如何選擇載體?4、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化原理,影響轉(zhuǎn)化率的因素有哪些?5重組體分子的選擇方法主要有哪些
5、?并簡(jiǎn)單闡述其原理1、基因的克隆方法主要有哪些?并闡述其克隆原理(至少3種,都是書上找的,自選哈,建議必選DDRTPCR和SSH,原因請(qǐng)看下題)2、簡(jiǎn)單闡述差異顯示PCR克隆基因的原理及其優(yōu)缺點(diǎn),有何應(yīng)用?3抑制性差減雜交的原理與應(yīng)用。3基因工程緒論基因工程緒論1、基因工程的定義與特征。、基因工程的定義與特征。定義:在體外把核酸分子(DNA的分離、合成)插入載體分子,構(gòu)成遺傳物質(zhì)的新組合(重組DNA),引入原先沒有這類分子的受體細(xì)胞內(nèi),
6、穩(wěn)定地復(fù)制表達(dá)繁殖,培育符合人們需要的新品種(品系),生產(chǎn)人類急需的藥品、食品、工業(yè)品等。特征:1、具跨越天然物種屏障的能力。2、強(qiáng)調(diào)了確定的DNA片段在新寄主細(xì)胞中的擴(kuò)增。2、試述基因工程的主要研究?jī)?nèi)容。、試述基因工程的主要研究?jī)?nèi)容。1)、目的基因的分離2)、DNA的體外重組(載體、受體系統(tǒng)等)3)、重組DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞及其篩選4)、基因在受體細(xì)胞內(nèi)的擴(kuò)增、表達(dá)、檢測(cè)及其分析。3、基因工程在食品工業(yè)上有何應(yīng)用發(fā)展?、基因工程在
7、食品工業(yè)上有何應(yīng)用發(fā)展?主要是通過(guò)基因重組,使各種轉(zhuǎn)基因生物提高生產(chǎn)谷氨酸、調(diào)味劑、酒類和油類等有機(jī)物的產(chǎn)率;或者改良這些有機(jī)物組成成分,提高利用價(jià)值。4、轉(zhuǎn)基因是一把雙刃劍,請(qǐng)客觀談?wù)剬?duì)轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品安全性的認(rèn)識(shí)。、轉(zhuǎn)基因是一把雙刃劍,請(qǐng)客觀談?wù)剬?duì)轉(zhuǎn)基因及轉(zhuǎn)基因食品安全性的認(rèn)識(shí)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)所帶來(lái)的好處是顯而易見的,在人類歷史進(jìn)步和發(fā)展中起到了積極作用。首先,通過(guò)該項(xiàng)技術(shù)可以提供人們所需要的特性,改良培育新品種;第二,延長(zhǎng)食品保存時(shí)
8、間或增加營(yíng)養(yǎng)成分;第三,將抗蟲防菌基因轉(zhuǎn)入到作物中,使作物本身產(chǎn)生抵抗病蟲害侵襲的能力,減少了農(nóng)藥的使用量,有利于環(huán)境保護(hù);第四,轉(zhuǎn)基因技術(shù)及基因食物在醫(yī)學(xué)方面得到廣泛研究和應(yīng)用。人們對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的主要擔(dān)憂在于環(huán)境方面。外源基因的導(dǎo)入可能會(huì)造就某種強(qiáng)勢(shì)生物,產(chǎn)生新物種或超級(jí)雜草、損害非目標(biāo)生物、破壞原有生物種群的動(dòng)態(tài)平衡和生物多樣性,也即轉(zhuǎn)基因生物存在潛在的環(huán)境安全問(wèn)題。轉(zhuǎn)基因作物的大面積種植已有數(shù)年,食用轉(zhuǎn)基因食品的人群至少有10億之
9、多,但至今仍未有轉(zhuǎn)基因食品對(duì)生命造成危害的實(shí)例;更何況目前每一種基因工程食品在上市前,都要經(jīng)過(guò)國(guó)家法律認(rèn)可,食品衛(wèi)生部門和環(huán)境部門的嚴(yán)格檢測(cè)。只有測(cè)試合格了,才能投放市場(chǎng)。因此公眾完全可以安全地消費(fèi)、大膽地食用轉(zhuǎn)基因食品。第一章第一章DNA的分子特性與利用的分子特性與利用5、原核生物和真核生物的基因表達(dá)調(diào)控有何差別?原核生物和真核生物的基因表達(dá)調(diào)控有何差別?1)原核基因表達(dá)調(diào)控的三個(gè)水平:轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控、翻譯水平調(diào)控、蛋白質(zhì)加工水平的調(diào)控
10、原核基因表達(dá)調(diào)控主要是在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控。2)真核生物基因表達(dá)的特點(diǎn):?1基因組DNA存在的形式與原核生物不同;?2真核生物中轉(zhuǎn)錄和翻譯分開進(jìn)行;?3基因表達(dá)具有細(xì)胞特異性或組織特異性;?4真核基因表達(dá)的調(diào)控在多個(gè)水平上進(jìn)行:DNA水平的調(diào)控、轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控、翻譯水平調(diào)控、蛋白質(zhì)加工水平的調(diào)控;6、什么是基因?根據(jù)基因的產(chǎn)物,基因可分為哪三類?什么是基因?根據(jù)基因的產(chǎn)物,基因可分為哪三類?基因是具有生物學(xué)功能的、在染色體上
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