2009cb941700-環(huán)境和遺傳因素導(dǎo)致男性不育與出生缺陷的分子機(jī)制

1、項(xiàng)目名稱：環(huán)境和遺傳因素導(dǎo)致男性不育與出生缺環(huán)境和遺傳因素導(dǎo)致男性不育與出生缺陷的分子機(jī)制陷的分子機(jī)制首席科學(xué)家：孫斐孫斐中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)起止年限：2009.12009.1至2013.82013.8依托部門：中國(guó)科學(xué)院中國(guó)科學(xué)院2酶反應(yīng)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和質(zhì)譜分析技術(shù)，鑒定代表性EDCs的關(guān)鍵代謝酶、代謝特征，初步確定候選代謝產(chǎn)物。利用受體報(bào)告基因系統(tǒng)，甄別候選代謝產(chǎn)物的雌激素抗雌激素、雄激素抗雄激素、甲狀腺激素抗甲狀腺激素

2、活性，初步明確代表性EDCs代謝產(chǎn)物的內(nèi)分泌干擾活性。運(yùn)用動(dòng)物模型研究代表性EDCs候選代謝產(chǎn)物與精子異常的關(guān)系，初步確認(rèn)相關(guān)EDCs特征性代謝產(chǎn)物；應(yīng)用高效液相色譜等方法，分析病例和對(duì)照人群生物樣本中EDCs的代謝產(chǎn)物水平及與男性精子異常的相關(guān)性，篩選出代表性EDCs的接觸性生物標(biāo)志物。運(yùn)用代謝組學(xué)的研究思路，應(yīng)用UPLCQTOF等方法針對(duì)精子異常不同表型和對(duì)照的生物樣本進(jìn)行代謝產(chǎn)物譜分析，結(jié)合主成分分析等數(shù)據(jù)分析平臺(tái)進(jìn)行分析，進(jìn)一步

3、驗(yàn)證和確定上述生物標(biāo)志物。1.2代表性代表性EDCs致精子致精子發(fā)生異常的分子靶生異常的分子靶標(biāo)通過系統(tǒng)研究代表性EDCs對(duì)下丘腦垂體睪丸軸以及精子發(fā)生、成熟過程不同環(huán)節(jié)的影響，初步闡明代表性EDCs對(duì)雄性生殖損害的靶點(diǎn)和分子途徑。采用針對(duì)不同發(fā)育階段小鼠下丘腦垂體睪丸軸定點(diǎn)染毒的方法，觀察染毒位點(diǎn)下游靶細(xì)胞的變化，分析相應(yīng)激素的分泌和相關(guān)基因的表達(dá)，確定EDCs損傷下丘腦垂體睪丸軸的作用位點(diǎn)。重點(diǎn)關(guān)注代表性EDCs通過下丘腦垂體睪丸軸

4、影響精子發(fā)生的微環(huán)境激素調(diào)控作用及方式，特別是支持細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞對(duì)精子細(xì)胞的影響及它們的相互作用。運(yùn)用基因組學(xué)、蛋白組學(xué)、miRNA基因芯片技術(shù)構(gòu)建正常小鼠和染毒小鼠精子發(fā)生不同階段睪丸基因、蛋白質(zhì)和miRNA表達(dá)譜，通過比對(duì)獲得差異表達(dá)基因、蛋白質(zhì)和miRNA，作為EDCs導(dǎo)致精子發(fā)生障礙的侯選作用靶分子，對(duì)部分差異基因、蛋白質(zhì)和miRNA進(jìn)行功能研究，闡明EDCs的作用機(jī)制。同時(shí)，采用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)所獲得差異表達(dá)基因及其編碼蛋白進(jìn)