檢驗科標本采集手冊

1、1,檢驗標本采集指南,檢驗科 江訓英 5-25,檢驗結果是臨床醫(yī)師在診療過程中所需要的重要信息，臨床醫(yī)師可以根據(jù)這些檢驗結果及病人的臨床情況來區(qū)分疾病的不同階段，觀察疾病的變化，判斷預后或觀察療效。所以分析前階段樣本的質量保證是直接關系到檢驗結果能否真實客觀地反應患者當前病情的一個重要環(huán)節(jié)。,3,患者采血前的準備,1. 一般要求：病人在采血前24h內應避免運動和飲酒，不宜改變飲食習慣和睡眠習慣。靜脈

2、血標本采集最好在起床后1h內進行。采血時間以上午7～9時較為適宜。門診病人提倡靜坐15分鐘后再采血。2. 采血時間：有些血液成份日間生理變化較大，因此應相對固定采血時間，一般以清晨空腹抽血為宜〈急癥項目除外〉。3. 患者體位：有些血液成份存在立位與臥位之間的差異，為減少這種影響，取血病人的體位應相對固定。一般采用坐位取血，而且取血前應讓病人有10分鐘的時間穩(wěn)定自己的體位。4. 劇烈的運動：激動的情緒都會影響到一

3、些血液成份濃度的變化，取血的當晨病人不宜做劇烈的運動，避免情緒激動，取血前應有10分鐘的休息。,4,,5. 輸液的影響：由于邊輸液邊采血影響血液成份的測定！規(guī)定輸液時應在輸液的另一側手臂取血。6. 生活方式的影響：煙、酒、咖啡及高脂、高糖飲食，可使血液中某些成份高于正常，需與一般病理情況相區(qū)別，取血前幾日應注意避免。7. 生理差別的影響：不同年齡組的個體及婦女的妊娠期、月經期，血液成份有一定的生理差異，應注意與病理情況區(qū)

4、別。8. 葡萄糖耐量測定：試驗前三天正常飲食，試驗當日清晨空腹抽血2ml，并同時留尿。將100克葡萄糖溶于300ml溫水中囑病人一次服下，立即記錄時間；然后分別在服糖后60、120、180分鐘，各抽血2ml，并每次同時留取尿液，注名管號和杯號，立即送檢，分別測定血糖及尿糖。,5,臨床檢驗結果是否可靠，除了檢驗儀器和設備，以及檢驗人員的業(yè)務素質外，主要取決于臨床檢驗的質量控制。臨床檢驗的質量控制包括病人的準備、標本收集、運送、分析

5、前處理、分析中實驗過程、結果計算、報告書寫等全過程。這中間，除了過失誤差外，影響檢驗結果的主要是生理學變異及分析變異（即誤差）。而正確的收集標本就是為了排除引起生理學變異的種種因素。,6,Ａ、影響機體生理指標的主要因素。,１、運動：強烈的肌肉運動明顯影響體內代謝。一般在做血液檢查時，應該采取晨血，住院病人可在起床前采血。而在院外，匆忙起床趕到醫(yī)院門診采血的病人應至少休息１５分鐘后再抽血。,7,,２、緊張與情緒激動：可影響神經內分泌功能和

6、呼吸。在患者相對安靜和情緒穩(wěn)定時采取。３、飲食的影響：早晨空腹采血可以相對避免飲食對某些臨床檢驗結果的影響。血液化學成分可因飲食量及性質而異。大量進食后取血檢測，可使葡萄糖、鉀、堿性磷酸酶及甘油三酯升高。食譜對某些生化指標有一定影響。如高蛋白的飲食可使血中尿素氮、氨、尿酸偏高，患者喝大量含咖啡的飲料，可使體內兒茶酚胺釋放，引起血中脂肪酸上升,8,４、酒對生理指標的影響：飲酒可造成血中乳酸、尿酸增加；長期有飲酒習慣者，大多可有高甘油三酯

7、血癥，γＧＴ也會長期不正常。５、取血的體位對結果的影響：體位改變可引起某些生理指標的顯著變化。所以住院病人與門診病人檢查的結果會有所差別。甚至同一個病人在病房檢查的結果與到門診檢查的結果有一定差異。,9,Ｂ、藥物對臨床檢驗結果的干擾與影響主要表現(xiàn)在以下二方面。,１、藥物對臨床檢驗分析方法的干擾：某些藥物本身或其代謝產物可對臨床檢測的任何步驟進行干擾。其干擾原因可由藥物本身的物理性質如藥物的顏色與藥物本身所發(fā)出的熒光，或藥物的化學性質如

8、強還原性，或藥物與血漿蛋白形成復合物或藥物本身對血清酶的抑制等來決定。而造成臨床檢測結果與機體實際情況的差別,10,２、藥物通過其生理作用、藥理作用及毒理作用改變機體生理參數(shù)。這類影響有的是臨床治療所需要的，有的則是不需要的，即平時所說的藥物的副作用。故在采取檢驗標本前，應事先了解患者是否服用了某些藥物。另外，臨床上經常用血液學方面的檢查來評價某些藥物的療效，及其副作用對人體的反應。由于某些藥物中的成份可以改變機體某些生化參數(shù)，故在做此

9、類臨床藥物監(jiān)測時應排除此類藥物對檢測的干擾與影響。例如：長期服用避孕藥的患者可使轉氨酶及轉肽酶升高。,11,Ｃ、臨床血液標本的分類與區(qū)別：,１、血液標本的基本分類：血液標本分為全血、血漿、血清三種。簡單表示即：血細胞＋血漿＝全血全血加抗凝劑后離心分離出來的淡黃色液體＝血漿全血不加抗凝劑而自然凝固后分離出來的，不含纖維蛋白原的淡黃色液體＝血清血漿中含有血細胞及其有形成分及多種生理物質和代謝產物。２、血漿與血清的區(qū)別：采取血漿的優(yōu)

10、點是可以立即分離血細胞而無須待血標本自然收縮，這樣可以避免凝血及標本運輸過程中產生溶血。,12,３、全血與血漿的區(qū)別。全血與血漿含水量不同，全血中水占８１％，而血漿中水占９３％。血中某些可溶于水的物質如葡萄糖、尿素氮等，用血漿測定比用全血測定高，尤以紅細胞壓積顯著升高。目前臨床檢驗用血標本，除血細胞檢查、血培養(yǎng)等少數(shù)項目用全血外，其它生化、免疫、腫瘤標記物等檢測多采用血清或血漿測定。這是由于血清或血漿中的生理成分與機體組織間液比較接近，

11、更能真實地反應機體的生理情況，反映其病理改變也更靈敏,13,４、靜脈血與毛細管血的區(qū)別：從理論上講，除了毛細血管中葡萄糖高于靜脈血，乳酸及丙酮酸則低于靜脈血外，其它生理物質如Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃｌ－、Ｃａ２＋、Ｐ２＋、ＢＵＮ、Ｃｈ、總蛋白（ＴＰ）、白蛋白（Ａｌｂ）等二者間無顯著差異。二者間的區(qū)別主要是指在臨床檢測中，因采集方法的不同而引起被測物質含量的改變。最近，我院臨床血細胞檢測由原來手指采血改為靜脈采血，這一改變在前一段時間引起了醫(yī)院臨

12、床上小小的波動。,14,靜脈血液采集作業(yè)指導書,15,1. 目的抽取靜脈血標本以做各項檢驗。2. 適用范圍適用于本科做生化、免疫、血常規(guī)等項目所需血液標本的采集。3. 物品準備：止血帶、一次性墊巾、無菌棉簽、復合碘消毒液、一次性采血針、負壓真空管（數(shù)量和種類根據(jù)要求選取后檢查滅菌日期、有效期及有無漏氣）、試管架、編號筆、口罩。,16,4. 檢驗申請單填寫要求：4.1 檢驗申請單用鋼筆填寫，使用正楷字，字跡清楚，填寫完整。4.

13、2 填寫內容包括：受檢者姓名、性別、年齡、臨床診斷、送檢標本、檢驗項目、標本采集年月日時、申請醫(yī)生及采樣者簽名。5. 操作步驟：5.1 查對檢驗申請單、受檢者姓名及是否已按醫(yī)囑準備，向受檢者解釋操作目的，以取得合作。在采血管上貼好與檢驗申請單相對應的標簽。5.2 采血完畢后，產生的醫(yī)療垃圾按規(guī)定分類處理,17,6. 注意事項6.1抗凝管收集血標本后，立即將試管輕輕顛倒5～6次，使血液與抗凝劑充分混勻。6.2 一般生化、免疫檢驗

14、用干燥非抗凝管收集標本，采樣量3-5ml。若檢驗項目較多，應適當增加采樣量。6.3 血常規(guī)檢驗用EDTAK2抗凝管收集標本，采樣量0.5-1毫升。6.4 凝血用枸櫞酸鈉（0.2ml）抗凝管收集標本，采樣量必須準確，為1.8ml。6.5 糖化血紅蛋白測定需用EDTAK2抗凝管。6.6 餐后，血糖、血脂可增加而影響測定結果，故一般應空腹抽血。6.7 激素，腫瘤相關檢測用干燥非抗凝管3-5mL。,18,7. 標本運輸及實驗前存放：

15、低溫條件2-8℃或室溫運輸，1小時內送檢。1小時內分離出血清，室溫放置不超過4小時，4℃保存不超過8小時，長時間保存需在冰凍條件下，且只能凍融1次。8. 附加檢驗項目申請：8.1 標本采集送出后需附加檢驗項目的，其申請應在標本采集當天上午10點30分以前電話通知實驗室。8.2 附加檢驗項目申請為本檢驗科目錄外項目的需提前一天與檢驗科聯(lián)系，以便聯(lián)系其它實驗室進行檢測。,19,尿液標本采集作業(yè)指導書,20,1. 目的采集尿液標本以

16、做尿液常規(guī)、生化檢驗。2. 適用范圍適用于本科做尿液常規(guī)、生化項目所需尿液標本的采集。3. 物品準備：專用一次性尿杯、編號筆。,21,5. 操作步驟：5.1 查對檢驗申請單、姓名，向受檢者解釋操作目的，以取得合作。5.2 發(fā)一次性尿杯一個給受檢者，囑受檢者留取新鮮尿立即送檢，以清晨第一次中間段尿為宜。5.3 受檢者按要求自己用一次性尿杯留取半杯尿標本交待檢。6. 注意事項,22,6. 注意事項6.1 根據(jù)采集時間，可分為

17、晨尿、隨機尿、空腹尿、餐后尿、計時尿（2h、3h、12h、24h）等。一般定性分析測定，可在任意時間留取標本。常規(guī)定性分析，多采用晨尿。一般尿液檢查應留取新鮮尿液置清凈、干燥容器中立即送檢。（靜脈滴注大劑量青霉素、VitC時可影響尿蛋白、尿糖及尿隱血結果，應盡量避免）。 6.2 標本應避免污染。一般定性分析標本，應在留取后馬上檢測。若需保存、或收集24小時尿液，原則上應首選0～4℃冷藏，必要時可添加化學防腐劑。常用的化學防腐劑

18、有：a. 甲苯（或二甲苯）：較常用，如24h尿糖定量、尿蛋白定量測定。100ml尿液中加1ml。不能制止尿液中已有細菌的繁殖。b. 氯仿：防腐效果較甲苯好?？赡芨蓴_尿沉渣鏡檢。,23,c. 鹽酸：分析測定甾體激素及其衍生物或兒茶酚胺以及含氮物質時常選用。100ml尿液中加1ml，或24小時尿液中10-15ml。d. 甲醛：100ml尿液中加0.5ml。用于24h尿無機離子定量及艾迪氏計數(shù)測定可干擾尿糖測定和干化學法的白細胞測定。

19、7. 其它：如分析失敗，將對同一原始樣本進行檢驗。如仍不能發(fā)出報告者，分析原因并告知受檢者重新采樣檢驗,24,臨床微生物標本的采集與運送,25,微生物讓人類步步為營,我們應該追求：“準確的病原學診斷”“針對性病原學治療”正確的微生物標本采集和運送，是準確的病原學診斷的前提！,26,基本原則,1.及時采集微生物標本作病原學檢查2.在抗菌藥物使用前采集標本3.采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢5.棉拭子標本宜

20、用運送培養(yǎng)基6.混有正常菌群污染標本，不可置肉湯培養(yǎng)7.標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。8.送檢標本應注明來源和檢驗目的,27,如何提高細菌陽性檢出率？,標本采集時機標本采集方法標本的質與量標本的運送與保存鏡檢篩選合格標本（退檢制度）高質量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境合理的收費制度,28,血培養(yǎng)標本,采集與運送,29,血培養(yǎng)的采集時間,對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應立即采集血培養(yǎng)標本。必

21、須同時或間隔短時間內采集２套以上血培養(yǎng)標本。,30,血培養(yǎng)的采集次數(shù),患者：推薦同時采集２－３套（不同部位）血培養(yǎng)標本。（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標本。）嬰幼兒患者：推薦同時采集２次（不同部位）血培養(yǎng)標本。,31,血培養(yǎng)的采血量,成年患者：推薦采血量為每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）,32,皮膚消毒,推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min

22、碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時間與碘町一樣（但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒）,33,采集部位,推薦從外周靜脈采集血液標本。不推薦動脈血，因其診斷價值沒有比靜脈血更大。不推薦靜脈留置導管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導管內采血，也應同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標本以幫助陽性結果的判讀提供解釋。,34,采集方法,在采血之前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再進行穿刺部位的皮膚消毒。嚴格按照“酒精、含

23、碘消毒劑、酒精”的消毒步驟操作，并等待足夠的消毒時間。嚴格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈，除非帶有無菌手套。不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭。,35,血培養(yǎng)標本的運送,采集后的血培養(yǎng)瓶應在1小時之內送往實驗室。血培養(yǎng)瓶在采血接種后在室溫不超過數(shù)2時。血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。,36,血培養(yǎng)標本的拒收,瓶子上帖的標簽錯誤或未帖標簽。血培養(yǎng)瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。,37,感染性細菌性心內

24、膜炎,急性：在經驗性抗生素用藥前30min之內采集血培養(yǎng)。亞急性：在30分鐘至1小時之內連續(xù)抽取數(shù)套血培養(yǎng)。最初采集3套血培養(yǎng)。假如這些血培養(yǎng)在24小時之內結果是陰性的，再采集2套血培養(yǎng)，總共5套。,38,痰培養(yǎng)標本,采集與運送,39,病原體種類繁多而復雜,使下呼吸道感染病原診斷成為難題,細菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲,40,咳痰途經口咽部,不可避免

25、地受到污染,唾液中口咽部定植菌的濃度可達108-109/ml。研究顯示，國內常規(guī)痰標本中約半數(shù)存在唾液嚴重污染現(xiàn)象,41,我國痰細菌培養(yǎng)現(xiàn)狀,標本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結果重復性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結果與治療反應存在差距,42,咳痰標本的采集,標本采集方法醫(yī)師或護士直視下采集標本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標本不合格！,43,關于咳痰標本,在抗

26、生素應用前采集痰標本;標本采集后1～2h內必須立即進行實驗室處理；咳痰標本應用最早且廣泛，但也是最受爭議的標本 ;取標本前應摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口;深咳，采集標本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務人員指導;無痰可用3％～5％NaCl 5ml霧吸約5min導痰；也可用物理療法、體位引流、鼻導管抽吸等法取痰；,44,咳痰標本不合格，退檢嗎？,如果低倍視野下鱗狀上皮細胞大于25個，白細胞小于10個，應不做或僅在特殊要求時做培養(yǎng)。如做培

27、養(yǎng)，報告中注明“鏡檢結果表明標本口咽分泌物污染明顯”。,45,痰培養(yǎng)的送檢次數(shù),對于普通細菌性肺炎，痰標本送檢每天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變；懷疑分枝桿菌感染者，應連續(xù)收集3天清晨痰液送檢；懷疑軍團菌或深部真菌感染，痰標本理想的送檢次數(shù)尚無定論。,46,痰培養(yǎng)的運送和保存,盡快（<2h）送至實驗室。如不能及時送達，應將標本暫存于4℃，但放置時間不可超過24h。厭氧培養(yǎng)標本的最佳運送

28、時間取決于標本量。被口咽部菌群污染的標本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。,47,痰培養(yǎng)的拒收,光學顯微鏡細胞學檢查發(fā)現(xiàn)口咽分泌物污染明顯。沒有標簽或貼錯標簽。運送容器選擇不當或有滲漏。標本采集不符合要求。同一天同一試驗重復送檢2次。延時送至實驗室的標本。,48,尿培養(yǎng)標本,采集與運送,49,尿培養(yǎng)標本,清潔中段尿導尿導管尿經恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內尿液送檢標本以晨起第一次尿液為佳不能立即送檢者，可暫存4℃冰箱，但保存不超

29、過8h,50,糞便培養(yǎng)標本,采集與運送,51,糞便標本的采集方法,自然排便采集標本時，取有膿血、粘液、組織碎片部份的糞便1～3g。液體糞便則取絮狀物，一般取1～3ml，直接裝入糞便容器或運送培養(yǎng)基中送檢。直腸拭子采集糞便標本：先以肥皂、水和70%酒精，將肛門周圍洗凈，然后用經無菌鹽水濕潤的棉拭子插入肛門超越肛門括約肌約2-4cm，與直腸粘膜表面接觸，輕輕旋轉，必須將棉拭子置于運送培養(yǎng)基中送檢。對于弧菌的培養(yǎng)需要提出特別申請。,52