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1、:www.paper.高壓對小球藻生長及其酶活性的影響高壓對小球藻生長及其酶活性的影響1.暨南大學(xué)化學(xué)系,廣東廣州(510632)2.中國科學(xué)院廣州地球化學(xué)研究所,廣東廣州(510640)1陳巖1,蔣潔1,鄭文杰1,徐世平2,楊芳1Email:tzhwj@jnu.摘要:要:試圖通過高壓的特殊生物影響誘變產(chǎn)生大個體或其它性狀優(yōu)良的小球藻變異體,考察了不同的壓力劑量處理后小球藻的形態(tài)變化、生長情況及藻體內(nèi)的抗氧化酶體系的酶力處理1h能夠?qū)е?/p>
2、小球藻的大量死亡,少量存活的藻細(xì)胞經(jīng)過5d的“停滯期”后開始正常生長,存活的小球藻的個體大小變化10%。80MPa的壓力下處理2h、6h、12h后小球12h實驗組最大,而單位蛋白含量隨著干質(zhì)量的增加而下降,幾種抗氧化酶活性為6h實驗組具有最大活性。經(jīng)過300MPa壓力預(yù)處理1h后的小球藻再在活性變化情況。實驗結(jié)果表明,80MPa壓力對小球藻的沒有顯著的致死效應(yīng),300MPa壓藻的初期的生長速度明顯加快,而到生長末期小球藻生長開始趨于平緩
3、。小球藻干質(zhì)量為80MPa壓力下進行處理,大,蛋白含量為6h再處理實驗組最高,抗氧化酶的活性隨著壓力處理時間的增加而下降。氧化酶;生長曲線中圖分類號中圖分類號:Q945.78文獻標(biāo)識碼:文獻標(biāo)識碼:A學(xué)研究已經(jīng)引起越來越多的生物學(xué)和生物工程研究者的興趣[12]。關(guān)于壓力是否會對活體生物產(chǎn)生影響的報道迄今尚究發(fā)現(xiàn),隨著深度的增加,魚中蛋白酶的活力降低,耗氧減少,脂質(zhì)的流動性增加。近年究,發(fā)現(xiàn)高壓不僅使水稻的生長周期、成穗與產(chǎn)量、葉綠素含量
4、和抗性有所改變,還使水稻產(chǎn)生變異,其中一種變異水稻表現(xiàn)為1.1試驗材料試驗材料小球藻(ChlellaVulgaris,C.Vulgaris)由暨南大學(xué)水生研究所提供,本實驗室保種。1.2.1培養(yǎng)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)小球藻干質(zhì)量為2h再處理實驗組最關(guān)鍵詞:關(guān)鍵詞:高壓;小球藻;形態(tài);抗引言引言壓力作為一個重要的物理學(xué)參數(shù),和溫度一樣都是物理學(xué)的研究范疇。由于壓力能夠改變生物體系的體積,并由此產(chǎn)生生物學(xué)影響,因此高壓生物少。最具代表性的是關(guān)于高靜水壓的
5、狀態(tài)下的魚的研究,如Philippe[3]通過對深海中魚的研來徐世平等[46]發(fā)表了關(guān)于高壓對水稻生長發(fā)育的研植株較高,谷粒長寬較大,DNA分析結(jié)果表明高靜水壓處理可以產(chǎn)生DNA變異。小球藻作為一種單細(xì)胞真核微生物,其直徑一般為5~10m,含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、亞麻酸、亞油酸、胡蘿卜素以及抗氧化酶,具有極其豐富均衡的營養(yǎng)成分和醫(yī)療保健價值[7]。目前主要作為一種營養(yǎng)豐富的保健食品來進行工業(yè)化生產(chǎn)。由于小球藻的個體體積太小,目前的工業(yè)
6、生產(chǎn)中只能采用離心法進行采收。如果能夠通過對小球藻進行高壓誘變,產(chǎn)生大尺寸或其它性狀優(yōu)良的小球藻變異體,獲取變異株系,這將對微藻產(chǎn)業(yè)具有重大意義。1.材料與方法材料與方法1.2實驗實驗039213)的資1本課題得到廣東省自然科學(xué)基金重點項目(05103295)和廣東省自然科學(xué)基金團隊項目(助。1:www.paper.2.1形態(tài)的觀形態(tài)的觀察小球藻經(jīng)過80MPa、300Ma的壓力處理1h,調(diào)節(jié)OD540為0.1~0后在光照培養(yǎng)箱中后,30
7、0MPa壓力處理組小球藻大部分死亡,藻體顏色消失。然而,經(jīng)過5SEM)進行形態(tài)觀察,結(jié)果見圖1。對照組的小球藻直直徑。說明300MPa壓力處理后小球藻個體體積未產(chǎn)生顯著的80MPa壓力再處理的小球藻,其外觀形多次高壓處理的當(dāng)代或其子代小球藻其外觀形態(tài)及其體積是P.2培養(yǎng),經(jīng)過24hd的“停滯期”后,在三角瓶底部觀察到有存活的小球藻出現(xiàn)。80MPa壓力處理組沒有觀察到藻體大量死亡現(xiàn)象,并且不會出現(xiàn)“停滯期”而保持繼續(xù)生長。對300MPa壓
8、力處理存活的小球藻繼續(xù)培養(yǎng)9d后用掃描電鏡(徑最大的僅為2.82m,小的為2.17m。經(jīng)過300MPa壓力處理過的小球藻有個別藻體達到了3.07m,最小的為2.07m變化。(變化范圍10%)。經(jīng)300MPa壓力預(yù)處理,態(tài)也沒有發(fā)生明顯變化。經(jīng)過否將產(chǎn)生顯著的變化還有待繼續(xù)研究。(a)(b)300MPa壓力處理組(b)圖1.小球藻細(xì)胞的SEM圖(a)對照組Fig.1SEMofC.Vulgaris(a)control(b)300MPapre
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