豬活體頸部采血技術(shù)

1、豬活體頸部采血技 術(shù),豬頸部采血技術(shù)簡介,豬疫病監(jiān)測與免疫抗體監(jiān)測是掌握豬病發(fā)生、流行、凈化的重要工作，豬血的采樣是進(jìn)行疫病監(jiān)測與免疫抗體監(jiān)測的前提，血清質(zhì)量的好壞直接關(guān)系著實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此，如何獲得符合衛(wèi)生要求、高質(zhì)量的血清，是擺在我們基層獸醫(yī)工作者面前的實(shí)際問題，現(xiàn)根據(jù)自己從事豬血采樣工作經(jīng)驗(yàn)，將豬血采樣技術(shù)及要點(diǎn)總結(jié)如下。,采血化驗(yàn)和送檢是畜牧獸醫(yī)工作者的一項(xiàng)重要工作。目前，在對(duì)豬的采血過程中國內(nèi)很多都是使用從豬耳靜脈抽血的

2、方法采血。這種方法實(shí)際上存在很多缺點(diǎn)：,1、采血前的準(zhǔn)備,器械準(zhǔn)備：采樣箱，一次性使用5～10ml注射器和注射針頭，75%的酒精棉球，干棉球，10ml離心管，止血鉗，豬保定器或保定繩，記號(hào)筆，登記表，乳膠手套、防護(hù)服、防護(hù)帽、一次性手套、一次性鞋套等物品。,采血前物資準(zhǔn)備（一）,,止血鉗,刀片,采血長針頭（15~18cm）,簡易的鐵線，用于清洗長針頭里凝固的血液,耳靜脈采血技術(shù),耳靜脈采血（圖一）。適用于40Kg以上的中大豬或種豬。采用

3、站立保定，由1名助手用豬保定器套住豬的上頜骨、收緊，用力向前方牽引，另一助手在豬耳根處用力壓住耳靜脈近心端，采血員左手拉伸豬耳，右手用酒精棉球反復(fù)涂擦耳靜脈使血管怒張后，右手持連接9號(hào)針頭的注射器，沿血管走向刺入，針頭與豬耳水平面呈10～15度角進(jìn)針，回血后，緩慢抽取所需血液量后，用干棉球或棉簽按壓止血。,豬耳靜脈采血的缺點(diǎn),1　豬耳靜脈采血，應(yīng)緩慢回抽注射器活塞，若回抽活塞過快過猛，會(huì)使血管壁緊貼針尖，而抽不出血液。,2　豬耳靜脈采血

4、速度慢，容易被污染，采血量少，血清少，中小豬盡量不用此方法采血。,3 費(fèi)時(shí)： 從耳靜脈抽血，每采一頭豬需要 10分鐘以上，一個(gè)大型的豬場，如果送檢 40頭份豬血，采血起碼要 8個(gè)小時(shí)。,4 易失敗： 由于豬的耳靜脈細(xì)（特別是小豬），采血過程中豬只又經(jīng)?；蝿?dòng)，使本來已經(jīng)扎準(zhǔn)的針頭經(jīng)常抽不出血來。,5 血樣不衛(wèi)生。 很多時(shí)候，特別是豬小的情況下，用一次性針筒抽血，很難抽得出來。

5、為此，很多獸醫(yī)都是用針頭刺穿耳靜脈后，直接用西林瓶在耳沿接血，這樣接到的血樣是不符合衛(wèi)生要求的。更可怕的是，由于耳靜脈采血費(fèi)時(shí)費(fèi)力，很多基層獸醫(yī)技術(shù)人員為了貪圖方便，應(yīng)付工作任務(wù)，往往只采一頭或幾頭豬的血液，然后稀釋成幾份送檢，造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)而誤診，貽誤了豬病治療時(shí)機(jī)，不但給我們的工作造成了不良的影響，也可能給養(yǎng)殖戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。,前腔靜脈采血技術(shù),前腔靜脈采血是一些獸醫(yī)常用的采血方法，但是，真正能熟練運(yùn)用這種方法的人員不多。由

6、于有關(guān)資料缺少對(duì)這項(xiàng)技術(shù)的詳細(xì)介紹，很多基層畜牧工作者往往以為這是一項(xiàng)復(fù)雜的技術(shù)，需要高超的操作技能。其實(shí)，只要掌握操作要領(lǐng)，經(jīng)過一段短時(shí)間的摸索，每個(gè)獸醫(yī)都可掌握這項(xiàng)技術(shù)。應(yīng)用前腔靜脈采血方法，可比從耳靜脈抽血節(jié)約2/3半以上的時(shí)間，而且采出的血樣衛(wèi)生干凈。每次采血 20頭母豬和 40頭肉豬，不足 2個(gè)小時(shí)就可以完成任務(wù)。,豬頸部采血操作技術(shù),豬頸部靜脈采血，因有一定的技術(shù)難度，采血員必須具備準(zhǔn)確而熟練的操作技術(shù)。豬前腔靜脈采血技術(shù)要

7、點(diǎn)：一是根據(jù)豬的大小選用不同型號(hào)的針頭；二是做好保定，注意人畜安全。根據(jù)豬體大小，采用不同保定方式。豬保定后應(yīng)相對(duì)穩(wěn)定，不能騷動(dòng)、后縮及左右搖擺；三是進(jìn)針部位準(zhǔn)。由于左側(cè)靠近膈神經(jīng)，故多在右側(cè)進(jìn)行采血。,1.選取合適的針筒和針頭,通常都是用一次性5毫升注射用針筒。由于豬的大小不同，前腔靜脈的深淺不一樣，要求使用的針頭也是不一樣的。若針頭太短，刺不到前腔靜脈；針頭太長，可能刺穿整條前腔靜脈，也是采不到血的。根據(jù)我場長期操作的經(jīng)驗(yàn)，種公母豬

8、選用 16#×100毫米針頭；30千克以上的中豬，應(yīng)選擇 12#×72毫米針頭；10～30千克小豬，應(yīng)選擇 9#×50毫米針頭；10千克以下乳豬，應(yīng)選擇9#× 30毫米針頭。,2.豬只的保定,2.1 種公母豬需要用保定繩固定，并且要求盡可能吊得高一點(diǎn)，使豬的頭頸與水平面呈 30度以上（如圖 1）。這樣，既方便采血人員察看采血部位，又使前腔靜脈向外突出，靜脈血充脹。30千克以上的中大豬，由 1

9、～2名飼養(yǎng)員用捉豬器(或保定繩)拉住，頭昂起，偏向右側(cè)(如圖 2)；,,,2.2 20--30Kg的小豬。一般用仰臥保定法，由一名助手抓握兩后肢，盡量向后牽引，另一助手用手將下頜骨下壓，使頭部貼地，并使兩前肢與體中線基本垂直。此時(shí)，兩側(cè)第一對(duì)肋骨與胸骨結(jié)合處的前側(cè)方呈兩個(gè)明顯的凹窩。采血員用酒精棉球消毒皮膚后，手持連接7～9號(hào)針頭的一次性注射器（10～40Kg小豬，選擇 9×25毫米針頭；10Kg以下乳豬，選擇7×

10、;20毫米針頭），向右側(cè)凹窩處，由上而下，稍偏向中央及胸腔方向刺入，見有回血，即可采血，采血完畢，左手拿酒精棉球緊壓針孔處，右手迅速拔出采血針管，稍壓片刻止血后，解除保定。40Kg以上的中大豬，采用站立式保定，由一名助手用豬保定器套住豬的上頜骨、收緊，用力向前上方牽引，使豬的上頜骨稍稍吊起，兩前肢剛剛著地，讓豬的胸前凹窩充分暴露，采血員用酒精棉球消毒皮膚后，手持連接12×38毫米針頭的一次性注射器，朝右側(cè)胸前凹窩最低處，由下而

11、上，且垂直凹窩方向進(jìn)針，見回血后，標(biāo)志已刺入血管，輕輕抽動(dòng)注射器活塞，采取血液。采血完畢，拔出針頭，術(shù)部用酒精棉球壓迫片刻止血后，解除保定。,,20千克以下的小豬，可由 1～2名飼養(yǎng)員抓起、倒立，后背緊靠在欄架上（如圖 3）。3.找準(zhǔn)下針部位 豬的前腔靜脈越往頭部越淺，但也越細(xì)；越靠胸部越粗，但也越深，所以，采血應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)牟课?。若小豬采血的部位太靠頭部，血管太細(xì)，很難扎中，即使扎中了也很難抽出血，所以，小豬的采血部位應(yīng)稍靠后。中大豬和

12、種母豬血管比較粗，靠胸部較深，針頭夠不到血管，所以，應(yīng)略靠前。,根據(jù)我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，20千克以下的小豬應(yīng)采兩前肢與氣管交匯處，種公母豬和 20千克以上的中大豬可選頸部最低凹處。4.下針和抽血 小豬：對(duì)準(zhǔn)以上描述的部位，用針垂直刺入，拉緊針筒活塞，若針頭扎中前腔靜脈，可見血液自血管源源流出，一直抽取到所需的血量即可。如果抽不到血液，說明針頭沒有扎中血管，此時(shí)可上下移動(dòng)針頭，直到針筒中見血液流出為止 。,種公母豬和中大豬：對(duì)準(zhǔn)下針部位，使針頭

13、偏向氣管約 15度方向下針，拉緊針筒活塞，若針頭扎中前腔靜脈，可見血液流出。如果不見血液流出，說明針頭沒有扎中，有可能是前腔靜脈較深，可用手頂緊針筒，使針頭扎深一點(diǎn)。若仍采不到血，可以把針頭往后稍退，或左右搖擺針頭，直到有血流出為止。實(shí)際上，操作熟練后，針頭有沒有扎中是可以感覺到的，當(dāng)針頭扎破靜脈壁時(shí)，可以感覺到輕微的“撲”的一聲。,采血注意事項(xiàng),1　豬耳靜脈采血，應(yīng)緩慢回抽注射器活塞，若回抽活塞過快過猛，會(huì)使血管壁緊貼針尖，而抽不出血

14、液。　　2　豬耳靜脈采血速度慢，容易被污染，采血量少，血清少，中小豬盡量不用此方法采血。 　　3　豬前腔靜脈采血，難度較大，采血員必須具備準(zhǔn)確而熟練的操作技術(shù)。豬前腔靜脈采血技術(shù)要點(diǎn)：一是根據(jù)豬的大小選用不同型號(hào)的針頭；二是做好保定，注意人畜安全。根據(jù)豬體大小，采用不同保定方式。豬保定后應(yīng)相對(duì)穩(wěn)定，不能騷動(dòng)、后縮及左右搖擺；三是進(jìn)針部位準(zhǔn)。由于左側(cè)靠近膈神經(jīng)，故多在右側(cè)進(jìn)行采血。,血液樣品的處理,1血漿的制備：在采血器內(nèi)加入適量的抗

15、凝劑，采血后，反復(fù)顛倒采血器，使抗凝劑與血液充分混勻，靜置或經(jīng)過離心使血細(xì)胞下沉后，上清液即為血漿。,2.2血清的制備：首先將采集的血液樣品置室溫半小時(shí)，待血液凝固后2000-3000轉(zhuǎn)/分離心5-10分鐘，上清夜即為血清；如離心后有輕微的溶血，用牙簽將血凝塊挑出，將混有紅細(xì)胞碎片的血清再次離心，用干凈吸管收集血清于干燥的指型管中，貼上標(biāo)簽備用。如血清溶血嚴(yán)重，應(yīng)剔出樣品,3.血液樣品的保存與運(yùn)送,采集的血液樣品如不能及時(shí)進(jìn)行檢驗(yàn)，必須

16、做適當(dāng)?shù)奶幚?，防止其成分發(fā)生大的變化。通常分離到的血清與血漿樣品保存于密閉試管中，存放于4℃冰箱內(nèi)或冷凍。全血樣品應(yīng)保存于4℃冰箱內(nèi)，檢驗(yàn)時(shí)，樣品必須達(dá)到室溫，達(dá)到室溫之后顛倒數(shù)次，使血液充分混勻后，方可檢驗(yàn)。如果樣品能在24小時(shí)內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室，可保存于4℃環(huán)境的保溫箱內(nèi)，如果24小時(shí)內(nèi)不能抵達(dá)或有些樣品送往外地實(shí)驗(yàn)室時(shí)，樣品必須冷凍處理后，并在低溫下運(yùn)送。運(yùn)送途中防止樣品泄漏，密閉封裝并加冰袋運(yùn)送。同時(shí)要填寫詳細(xì)的樣品記錄。,血液

17、樣品變異因素的控制,嚴(yán)格控制血液樣品的 變異因素，是使檢測結(jié)果盡可能符合客觀情況的重要環(huán)節(jié)。因此，在采血過程中應(yīng)注意下列問題：,1.規(guī)定動(dòng)物的采血時(shí)間：有些血液化學(xué)成分有明顯的晝夜波動(dòng)，對(duì)采血?jiǎng)游?，?yīng)在禁食12小時(shí)后采血，這樣可以將食物對(duì)血液各種成分的濃度的影響減少到最低程度。在剛進(jìn)完食動(dòng)物身上采取的血液樣品，往往出現(xiàn)血糖、甘油三酯增高，無機(jī)磷降低，麝香草酚濁度增加。進(jìn)食富含脂肪的飼料，常導(dǎo)致血清混濁而干擾很多項(xiàng)目的生化檢測。,2.

18、血液樣品來源一致：動(dòng)脈血和經(jīng)脈學(xué)的化學(xué)成分略有差異，整個(gè)試驗(yàn)期間，采取的血液樣品必須一致。,3. 防止分解：血液內(nèi)某些化學(xué)成分，離體后由于氧化酶或細(xì)菌的作用，容易分解，致其含量有所改變。所以，為了防止血液內(nèi)某些化學(xué)成分的分解，血液樣品被采集后應(yīng)立即按規(guī)定處理，及時(shí)檢測或加入適當(dāng)?shù)谋４鎰┌匆?guī)定保存。,4. 防止氣體逸散：血液暴露于空氣中后，二氧化碳迅速逸出，并吸收氧氣提高血氧飽和度，進(jìn)而引起血漿成分的改變，因此，在采血過程中要根據(jù)

19、檢測項(xiàng)目的需要來采取適當(dāng)?shù)牟裳绞?5.防止污染：采血器及樣品容器都必須用化學(xué)處理并用重蒸餾水沖洗，防止銅、鐵等金屬離子和污染物對(duì)影響檢測結(jié)果。并且在做作蛋白結(jié)合碘測定時(shí)，禁用碘酊消毒采血部。,6.防止溶血：溶血可以影響許多生化檢測項(xiàng)目的結(jié)果。紅細(xì)胞破裂后釋放出的物質(zhì)與血漿中許多成分的濃度不一樣，如鈉、氯化物、鈣等在血漿中的濃度要高于紅細(xì)胞內(nèi)的濃度，應(yīng)予以防止。,7引起溶血原因是強(qiáng)力震蕩、離心速度過快、溫度過低或者過高、加入與血液環(huán)境不

20、等滲液體、放置時(shí)間過長等等引起紅細(xì)胞破裂的因素。,保存及運(yùn)輸需要注意的事項(xiàng),1.懷疑曾有疫情發(fā)生的畜群，錯(cuò)過組織樣品采集時(shí)機(jī)時(shí)，可無菌操作采集動(dòng)物血液，每頭不少于5mL。無菌分離血清裝入滅菌小瓶中，加蓋密封后冷藏保存，通過檢測抗體，做出追溯性診斷。,2.采集樣品時(shí)要填寫樣品采集登記表。,3.裝樣容器必須密封，即防水又不透氣。樣品容器需加貼防水標(biāo)簽，并寫明樣品編號(hào)、采集地點(diǎn)、動(dòng)物種類、時(shí)間等。,4.樣品運(yùn)輸前將樣品容器裝入套筒中，套筒應(yīng)填