針對瓜類枯萎病篩選拮抗菌劑及菌肥

1、針對瓜類枯萎病篩選拮抗菌劑及菌肥針對瓜類枯萎病篩選拮抗菌劑及菌肥一、研究現(xiàn)狀一、研究現(xiàn)狀枯萎病是由尖孢鐮刀菌引起的一種土傳病害，由于尖孢鐮刀菌不斷進化出新的生理小種，并且其厚垣孢子能夠長期在土壤中存活，使得枯萎病的防治十分困難。近年來，利用有益微生物或枯抗微生物對瓜類枯萎病進行生物防治枯萎病成為研究熱點，根據(jù)生防菌誘導(dǎo)相關(guān)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性，使其分泌相關(guān)酶及抗生素，從而使病原菌繁殖受到抑制，控制瓜類枯萎病的發(fā)生。主要采用芽孢桿菌、非致病性

2、尖孢鐮刀菌等拮抗微生物降低病原菌的密度或削弱病原菌的致病力，從而達到控制病害的目的，是一種很有前景的生物防治方法。二、目的和意義二、目的和意義我國拮抗微生物研究及應(yīng)用的技術(shù)手段多樣性方面與國外相比，差距較大。拮抗微生物的種類單一、對農(nóng)藥的反應(yīng)敏感，抗菌譜較窄、生防效果不穩(wěn)定、生防菌在植株上定殖較難，對拮抗和促生的結(jié)合較難、微生物防治措施不夠完善、可利用的拮抗微生物資源太少，還需進一步挖掘與應(yīng)用。研究表明將廣譜的拮抗菌劑應(yīng)用到富含有機物質(zhì)

3、的土壤中，能提高防治效果，將廣譜拮抗菌和有機生物菌肥聯(lián)合施用，可以起到防病和促生雙重功效。本項目以多年瓜類連作的根際土壤中分離篩選對瓜類枯萎病具有拮抗活性的潔抗菌，對篩選到的高效拮抗菌株進行深入研究，以開發(fā)廣譜高效的拮抗微生物資源；并將篩選的微人畜無毒、對土壤中有益微生物沒有影響、對瓜類無副作用、尖孢鐮刀菌不易產(chǎn)生抗性、使用成本較低等優(yōu)點，如與優(yōu)質(zhì)有機肥配合使用，效果更佳。林緯釆用芽孢桿菌和哈慈木霉單一防治西瓜枯萎病效果達3550%，與

4、有機肥混合使用效果可提高到6085%。因此，從土壤中篩選出具有高效詰抗枯萎病菌的菌株，并對篩選出的捨抗菌株進行分類鑒定、括抗活性進行初步研究，為生物防治西瓜枯萎病提供了具有應(yīng)用價值的微生物菌株。四、技術(shù)方案和技術(shù)路線四、技術(shù)方案和技術(shù)路線1、技術(shù)方案通過系列稀釋涂布平板、對峙培養(yǎng)等方法，從長期連作的健康瓜類的根際土壤中分離篩選得到瓜類枯萎病枯抗菌株，通過形態(tài)特征、生理生化特征及rRNA基因序列相似性分析，鑒定菌系。研究分離得到的瓜類枯萎

5、病致病菌的拮抗菌生物學(xué)特性，包括菌株的生長情況，最適溫度、pH、接種量、裝液量，以及抗性譜、耐藥性等，對枯萎病的高效防治和田間應(yīng)用等都具有重要作用。將去除菌體的發(fā)酵液對瓜類枯萎病菌的抑制率作為判定發(fā)酵條件優(yōu)劣的主要指標(biāo)，篩選出最適合菌株產(chǎn)生抗生物質(zhì)的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件，為生產(chǎn)及應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。并進一步對菌株產(chǎn)生的抗生物質(zhì)進行分離純化，并對其理化性質(zhì)進行研究。將分離的拮抗菌株進行盆栽試驗，設(shè)置兩組，一組將拮抗菌株直接注入到土壤中，另一組將