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1、1臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)血液常規(guī)檢驗(yàn)一、微量吸管的使用、毛細(xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定與使用【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹浚赫莆瘴⒘课艿氖褂?、毛?xì)血管采血、計(jì)數(shù)板的鑒定、構(gòu)造與使用?!緦?shí)驗(yàn)試劑】:紅細(xì)胞稀釋液、75%乙醇、消毒藥棉?!緦?shí)驗(yàn)器材】:一次性采血針、計(jì)數(shù)板、蓋玻片、微量吸管、2ml吸管、中號(hào)試管、顯微鏡、小玻璃棒。【實(shí)驗(yàn)原理】:一次性采血針刺破毛細(xì)血管后,用微量吸管吸取一定量的血液,稀釋一定的倍數(shù),沖入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的
2、細(xì)胞的數(shù)量。【實(shí)驗(yàn)方法】:一、微量吸管的使用:一、微量吸管的使用:用抗凝血訓(xùn)練微量吸管的使用。二、毛細(xì)血管采血(以紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為例):二、毛細(xì)血管采血(以紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為例):準(zhǔn)備:取清潔干燥試管一支,加2ml紅細(xì)胞稀釋液。采血部位選擇、按摩→75%乙醇棉球進(jìn)行刺針部位皮膚消毒→待酒精揮發(fā)干(否則血流不成滴)→自指尖腹內(nèi)側(cè)迅速刺針→擦去第一滴血→準(zhǔn)確吸取10ul血液→用無(wú)菌干棉球壓住傷口止血→用無(wú)菌干棉球擦去管尖外圍余血后→將血液釋放到稀釋液
3、底部→回吸上清液23次→輕輕混勻。三、計(jì)數(shù)板構(gòu)造與應(yīng)用三、計(jì)數(shù)板構(gòu)造與應(yīng)用1計(jì)數(shù)板構(gòu)造外觀構(gòu)造:每塊計(jì)數(shù)板由“H”型凹槽分上下兩個(gè)計(jì)數(shù)室,在計(jì)數(shù)室兩側(cè)各有一條支柱,比計(jì)數(shù)室高出0.1mm,將一塊平整光滑的血細(xì)胞計(jì)數(shù)專(zhuān)用蓋玻片(24.0mm20.0mm0.6mm)覆蓋其上時(shí),蓋玻片與計(jì)數(shù)室間形成0.1mm的縫隙。3【實(shí)驗(yàn)原理】:細(xì)胞的著色既有化學(xué)的親和作用,又有物理的吸附作用,不同的細(xì)胞由于其所含化學(xué)成分不一樣,化學(xué)性質(zhì)各不相同,所以對(duì)染
4、料的親和力也不一樣,因此將細(xì)胞染成不同的顏色?!緦?shí)驗(yàn)方法】:一、瑞一吉氏復(fù)合染液配制Ⅰ液:取瑞特染粉1g,吉姆薩染粉0.3g,置潔凈研缽中,加少量甲醇(分析純),研磨片刻,吸出上層染液,再加少量甲醇,繼續(xù)研磨,再吸出上層染液。如此連續(xù)幾次,共用甲醇500ml。收集于棕色瓶中,每天早晚各振搖3′共5天,再存放一周,將染液過(guò)濾后即可使用。Ⅱ液:磷酸鹽緩沖液(PH6.5—6.8),取磷酸二氧鉀(無(wú)水)6.64g,磷酸氟二鈉(無(wú)水)2.56g,
5、加少量蒸餾水溶解,調(diào)整PH后,加水至1000ml。二、血片制作、瑞氏染色方法準(zhǔn)備:取清潔干燥載玻片,邊緣光滑清潔推玻片各一張。1、制備血涂片:取載玻片→取血1滴于載玻片右端(邊緣留1.5cm空隙)→左手持載玻片,右手持推玻片→將推玻片放至血滴前沿逐漸后移至血滴沿推片散開(kāi)后,推玻片與載玻片成30~35的夾角以平穩(wěn)的速度將血液向前推進(jìn)→干燥(手持載玻片末端迅速在空氣中揮動(dòng)干燥)。2、染色:將干透的血涂片放在水平位置→加瑞吉氏復(fù)合染液Ⅰ液數(shù)滴
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