植株生理生長指標(biāo)的測定

1、植株生理生長指標(biāo)的測定根系活力的測定（根系活力的測定（TTC法）法）植株根系是活躍的吸收器官和合成器官，根的生長情況和活力水平直接影響地上部分的生長、營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。一、原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是標(biāo)準(zhǔn)氧化電位為80mV的氧化還原色素，溶于水中成為無色溶液，但還原后即生成紅色而不溶于水的三苯甲腙，生成的三苯甲腙比較穩(wěn)定，不會被空氣中的氧自動氧化，所以TTC被廣泛地用作酶試驗(yàn)的氫受體，植物根系中脫氫酶所引起的TTC還原，可因加入琥

2、珀酸，延胡索酸，蘋果酸得到增強(qiáng)，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC還原量能表示脫氫酶活性并作為根系活力的指標(biāo)。二、材料、設(shè)備儀器及試劑（一）材料水培或砂培小麥、玉米等植物根系。（二）儀器設(shè)備1.分光光度計(jì)；2.分析天平（感量0.1mg）；3.電子頂載天平（感量0.1g）；4.溫箱；5.研缽；6.三角瓶50ml；7.漏斗；8.量筒100ml；9.吸量管10ml；10.刻度試管10ml；11.試管架；12.容量瓶10ml；13.藥勺；14

3、.石英砂適量；15.燒杯10ml、1000ml。（三）試劑1、乙酸乙酯（分析純）。2、次硫酸鈉（Na2S2O4），分析純，粉末。3、1％TTC溶液：準(zhǔn)確稱取TTC1.0g，溶于少量水中。定容到100ml。4、0.4％TTC溶液：準(zhǔn)確稱取TTC0.4g，溶于少量水中。定容到100ml。5、磷酸緩沖液（115molL，pH7）：6、1molL硫酸：用量筒取比重1.84的濃硫酸55ml，邊攪拌邊加入盛有500ml蒸餾水的燒杯中，冷卻后稀釋至1

4、000ml。7、0.4molL琥珀酸：稱取琥珀酸4.72g，溶于水中，定容至100ml即成。三、實(shí)驗(yàn)步驟1、定性測定植株生理生長指標(biāo)的測定植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定硝酸還原酶（nitratereductaseNR），是植物氮素同化的關(guān)鍵酶，它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽（NO3ˉNADHH＋→NO2ˉNAD＋H2O）。產(chǎn)生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸（或?qū)ΘC氨基苯磺酰胺）及α萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性

5、條件下定量生成紅色偶氮化合物。生成的紅色偶氮化合物在540nm有最大吸收峰，可用分光光度法測定。硝酸還原酶活性可由產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮的量表示。一般單位鮮重以μg氮（gh）為單位。NR的測定可分為活體法和離體法?；铙w法步驟簡單，適合快速、多組測定；離體法復(fù)雜，但重復(fù)性較好。Ⅰ離體法Ⅰ離體法一、實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備（一）實(shí)驗(yàn)材料水稻、小麥或其他植物葉片、幼穗等。（二）試劑1、亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取分析純NaNO20.9857g溶于無離子

6、水后定容至1000mL，然后再吸取5mL定容至1000mL，即為含亞硝態(tài)氮的1μgmL的標(biāo)準(zhǔn)液。2、0.1molLpH7.5的磷酸緩沖液：Na2HPO412H2O30.0905g與NaH2PO42H2O2.4965g加無離子水溶解后定容至1000mL。3、1％磺胺溶液：1.0g磺胺溶于100mL濃度為3molL的HCl中（25mL濃鹽酸加水定容至100mL即為3molLHCl）。4、0.02％萘基乙烯胺溶液：0.0200g萘基乙烯胺溶于

7、100mL無離子水中，貯于棕色瓶中。5、0.1molLKNO3溶液：2.5275gKNO3溶于250mL0.1molLpH7.5的磷酸緩沖液。6、0.025molLpH8.7的磷酸緩沖液：8.8640gNa2HPO412H2O，0.0570gK2HPO43H2O溶于1000mL無離子水中。7、提取緩沖液：0.1211g半胱氨酸、0.0372gEDTA溶于100mL0.025molLpH8.7的磷酸緩沖液中。8、2mgmLNADH溶液：2