第十三章 四體網(wǎng)(1)

1、支原體 (mycoplasma),病原生物學(xué)教研室,概述,,,◆對人致病的主要有：,肺炎支原體 -----肺炎、支氣管炎,溶脲脲原體生殖支原體 -----泌尿生殖道感染 人型支原體,支原體屬于原核細胞型微生物，種類很多. 是原核細胞生物中最小的，也是目前已知能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的最小微生物。,,一. 生物學(xué)性狀,形態(tài)與結(jié)構(gòu) 0.2—0.3μm, 無細胞壁，形態(tài)呈高度多形性， 如球形

2、、棒狀、分枝狀、絲狀等。 細胞膜富含膽固醇, 由三層結(jié)構(gòu)組成：內(nèi)外層由蛋白質(zhì)和糖類組成，中層為脂質(zhì)，主要是磷脂和膽固醇。,2. 培養(yǎng)特性,(1) 支原體的營養(yǎng)要求高:需要在培養(yǎng)基中加入 10%~20%的人或動物血清。,(2) 生長緩慢，二分裂繁殖為主，菌落細小,菌落——呈荷包蛋樣,3. 抵抗力,◆對理化因素的抵抗力比細菌差,◆對干擾細胞壁合成的抗生素耐藥,◆對干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素、對作 用

3、于固醇類（皂素、二性霉素）的藥物敏感,二．致病性,1.肺炎支原體,致病性：非典型肺炎通過呼吸道飛沫傳播，引起人類原發(fā)性非典型肺炎（間質(zhì)性肺炎），常發(fā)生于夏末秋初，患者以兒童及青少年多見。癥狀輕重不一。,2.溶脲脲原體、人型支原體、生殖器支原體 致病性 : --- 泌尿生殖道感染，最常見的疾病是非淋菌性尿道炎。 --- 先天性感染 --- 不育、不孕,,分離培養(yǎng)冷凝集試驗

4、 40C過夜 病人血清+O型紅細胞 紅細胞凝集， 放370C后其凝集現(xiàn)象可消失，此反應(yīng)是非特異性---輔助診斷3其他：ELISA、分子生物學(xué)檢查,三. 微生物學(xué)檢查,,立克次體,（rickettsia）,◆立克次體是一類以節(jié)肢動物傳播媒介嚴格細胞 內(nèi)寄生的原核細胞型微生物,一. 概述,共同特點

5、 *專性細胞內(nèi)寄生，二分裂繁殖 *以節(jié)肢動物為寄生宿主、儲存宿主和傳播媒介 *大多是人畜共患病的病原體,一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)結(jié)構(gòu),形態(tài)多為球桿狀，類似革蘭陰性短桿菌，大小介于細菌和病毒之間，光鏡下可見。,（二）培養(yǎng) 1、嚴格活細胞內(nèi)寄生 2、培養(yǎng)方法(1) 動物接種：豚鼠或小鼠(2) 雞胚接種：在雞胚卵黃囊中能大量繁殖(3) 細胞培養(yǎng)：多種單層細胞可用于立克次體的

6、 分離鑒定、傳代.,（三）外斐氏反應(yīng)（Weil-Felix reaction）,普氏立克次體與斑疹傷寒立克次體 變形桿菌OX19、OX2菌株 共同抗原恙蟲病立克次體 變形桿菌OXK株存在共同抗原

7、 共同抗原,,,用易于制備的變形桿菌O抗原代替立克次體抗原，加上病人血清進行凝集反應(yīng)，以檢測患者體內(nèi)是否有抗立克次體抗體，這種交叉凝集試驗稱為外斐反應(yīng)（Well-Felix reaction），以輔助診斷斑疹傷寒、斑點熱和恙蟲病.,3. 抵抗力,立克次體對理化因素的抵抗力和細菌繁殖體相似特殊：耐干燥——在干虱糞中可保持傳染性達6個月,耐磺胺類藥物——這類藥物不僅不能殺滅立克次體，反而可促進其生長,,,三. 致病性與

8、免疫性,,,1、流行性斑疹傷寒 病原體——普氏立克次體傳染源和儲存宿主 ——病人傳播媒介——人虱傳播途徑傳播方式主要癥狀為高熱、頭痛、全身疼痛以及皮疹，嚴重者導(dǎo)致神經(jīng)癥狀并出現(xiàn)其他器官損害的表現(xiàn)。,,2、地方性斑疹傷寒,病原體——斑疹傷寒立克次體,傳染源——鼠，鼠是天然儲存宿主,傳播媒介——鼠蚤和鼠虱在鼠間傳播 ，人群間傳播的媒介—— 與人虱有關(guān),病情較輕，出現(xiàn)頭痛、發(fā)熱皮疹等，很少累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)和其他臟器 .,免疫

9、性——強,◆以細胞免疫為主，體液免疫為輔,◆病后可獲得較強的免疫力 -普氏和斑疹傷寒立克次體感染有交叉免疫。,四、微生物學(xué)檢查與防治 1、 微生物學(xué)檢查 (1) 分離培養(yǎng): 取外周血，采用雄性豚鼠腹腔接種 分離病原體 (2) 血清學(xué)診斷:外斐反應(yīng)

10、 ( 取患者血清與變形桿菌OX19抗原作凝集試驗) 2、 防治： (1) 控制消滅中間宿主、傳播媒介、儲存宿主 滅鼠、滅蚤、滅虱 (2) 疫苗接種:滅活疫苗 (3) 抗生素治療:氯霉素、四環(huán)素,衣原體,(Chlamydia),一. 概述,衣原體(Chlamydia)是一類能通過濾菌器,嚴格細胞內(nèi)寄生，有獨特發(fā)育周期的原

11、核細胞型微生物。,能引起人類疾病的衣原體,沙眼衣原體,肺炎衣原體,鸚鵡熱衣原體,,,,,一. 生物學(xué)性狀,(一) 形態(tài)結(jié)構(gòu),1、原體（elementary body, EB） 直徑0.2~0.4?m，球形或橢圓形，有致密的類核結(jié)構(gòu)，有胞壁， 高度感染性，無繁殖能力。 是發(fā)育成熟的 衣原體。 姬姆薩 (Giemsa)染色呈紫紅色,2、始體（initial body），又稱網(wǎng)狀體（retic

12、uate body, RB） 直徑0.5~1?m，圓形或橢圓形，無胞壁，核質(zhì)疏松呈網(wǎng)狀， 無感染性，有繁殖能力。 姬姆薩染色呈深藍色或暗紫色,,(二) 發(fā)育周期,,,,原體吸附于易感上皮細胞 進入細胞內(nèi) 始體,,二分裂繁殖 子代原體 釋出細胞外 感染新的易感細胞,,,,,,,,發(fā)育周期約48~72 h，從EB RB

13、子代EB。 包涵體 即指在易感細胞內(nèi)含增殖的網(wǎng)狀體和子代原體的空泡。 位于細胞漿中，體積大小不等有的如帽狀， 有的呈桑椹狀，有的散在。,,,,（三）培養(yǎng)特性：專性活細胞內(nèi)寄生　　　動物接種（小鼠）　　　雞胚接種（卵黃囊）　　　細胞培養(yǎng)（McCoy、Hela-299等細胞株） （四）抗原構(gòu)造與分類：　衣原體有屬特異性、種特異性和型特異性三種抗原。衣原體屬可分為沙眼衣原體

14、、肺炎衣原體等四種，每種衣原體又可分為若干個血清型。主要外膜蛋白抗原易發(fā)生變異，而形成不同亞種。 （五）抵抗力 ： 耐冷不耐熱，對化學(xué)消毒劑敏感，對某些抗生素如紅霉素、強力霉素等敏感。,致病性與免疫性(沙眼衣原體 ) 沙眼衣原體（沙眼亞種）是1956年，我國學(xué)者湯飛凡采用雞胚卵黃囊接種法首次分離出的 . 沙眼衣原體可分為三個亞種（變種）： 沙眼生物亞種 性病淋巴肉芽腫亞種

15、 鼠亞種,,,人感染,鼠感染,1 . 所致疾病 (1) 沙眼病原體 ——沙眼生物亞種 A、B、Ba、C型 傳播途徑 ——眼分泌物接觸傳播 （眼—眼，眼—手—眼） 沙眼衣原體侵犯眼結(jié)膜上皮細胞引起炎癥 早期: 流淚, 分泌物,結(jié)膜充血,濾泡增生后期: 眼瞼內(nèi)翻，倒睫沙眼是后天致盲的第一位原因,(2) 包涵體結(jié)膜炎 病原體 — 除沙眼生物亞種A、C兩

16、型以外的所有型別 兒童：急性化膿性結(jié)膜炎。經(jīng)產(chǎn)道感染。 成人：濾泡性結(jié)膜炎。性接觸，經(jīng)手致眼。 癥狀類似早期沙眼，無后遺癥 ．(3) 泌尿生殖道感染 病原體 ——D-K型沙眼生物亞種傳播途徑 ——性接觸傳播，非淋菌性尿道炎,,,(4) 性病淋巴肉芽腫,病原體-----沙眼衣原體性病淋巴肉芽腫亞種的 L1、L2、L2a、L3四個血清型,傳播途徑 --

17、---性接觸傳播 所致疾病 -----性病淋巴肉芽腫 侵襲力強，引起的感染可累計更深層 的淋巴組織，致淋巴管炎及淋巴管周圍炎。,,,,（5）呼吸道感染,病原體 —— 肺炎衣原體（C.pneumoniae） 鸚鵡熱衣原體（C.psittaci）傳播途徑 ——飛沫傳播 所致疾病 -----

18、- 肺炎衣原體：非典型肺炎 鸚鵡熱衣原體：鸚鵡熱,2. 免疫性——不牢固,衣原體感染后雖有特異性細胞免疫和體液免疫出現(xiàn)，但保護性不強,?？沙霈F(xiàn)持續(xù)感染或反復(fù)感染,,,三、微生物學(xué)檢查和防治1、直接涂片鏡檢找包涵體　 眼結(jié)膜刮片，眼分泌物涂片，Giemsa染色，檢查上皮 細胞內(nèi)包涵體，其他部位的感染取相應(yīng)標本染色

19、后鏡檢， 如膿液、分泌液等。2、分離培養(yǎng) McCoy細胞或HeLa-229細胞35℃培養(yǎng) 48-72h， 用免疫熒光、ELISA 測培養(yǎng)物中衣原體3、核酸檢測*防治：注意個人衛(wèi)生，避免接觸傳播 藥物治療,螺旋體,(spirochetes ),概述,◆螺旋體——是一類介于細菌和原蟲之間的，細長、柔軟、螺旋狀、運動活潑的原核細胞型微生物。,◆引起人類疾病的

20、螺旋體有：,密螺旋體屬——螺旋較為細密規(guī)則，兩端尖，如梅毒螺旋體,疏螺旋體屬——有3-10個稀疏不規(guī)則的螺旋，如回歸熱螺旋體　　　　　　　奮森疏螺旋體,鉤端螺旋體屬——螺旋細密規(guī)則，一端或兩端彎曲成鉤狀，　　　　　　　　如鉤端螺旋體,,一. 鉤端螺旋體屬(Leptospira),,(一) 生物學(xué)性狀,1. 形態(tài)結(jié)構(gòu),鉤體細長，彎曲，螺旋細密、規(guī)則，一端或兩端呈鉤狀，常使菌體呈C、S形。觀察鉤體常用的方法有 1、暗視野

21、顯微鏡檢查　 2、 鍍銀染色法　 3、 電鏡觀察,,,鉤體的基本結(jié)構(gòu)由外膜、軸絲（內(nèi)鞭毛）和菌體組成,,2. 培養(yǎng)特性,,,(1) 柯氏培養(yǎng)基 (Korthof培養(yǎng)基)　營養(yǎng)要求較高，常用含10%兔血清的柯氏液體培養(yǎng)。適宜溫度為28~300C，Ph7.2~7.4．,(2) 二分裂繁殖，速度慢。,培養(yǎng)1-2W才見其在液體基中呈云霧狀生長,3、抗原構(gòu)造和分類 1）型特異性抗原－表面抗原 　　菌體表面的多糖與蛋白復(fù)合物

22、, 具有型特異性，可用于鉤體分型。 ?。玻┤禾禺愋钥乖瓋?nèi)部抗原 　　菌體類脂多糖復(fù)合物, 具有群特異性，可用于鉤體分群。 　　25個血清群，237個血清型,4. 抵抗力,◆ 弱 ，對干燥、熱、一般的化學(xué)消毒劑 及青霉素敏感,◆ 鉤體在濕土或水中可存活數(shù)月,(二) 致病性和免疫性,1. 流行環(huán)節(jié),◆ 傳染源——感染鉤體的鼠（黑線姬鼠）和豬,◆ 傳播途徑 ——接觸傳播 （接觸污染水

23、、土壤）,◆ 易感人群 ——無特異免疫力的人,職業(yè)特點,季節(jié)性,,,2. 所致疾病,——鉤體病,動物，隱性感染 污染土壤、水源 感染人體 高熱、乏力、全身酸痛、眼結(jié)膜充血 腓腸肌壓痛、表淺淋巴結(jié)腫大， 重者可有肝、腎等功能損傷、肺大出血,,,,3. 免疫性,抗鉤

24、體免疫以體液免疫為主,對同一血清型的鉤體有牢固免疫力,三、微生物學(xué)檢查,（一）鉤體檢測 標本采集：一周內(nèi)采血，兩周后采尿，有中樞神經(jīng) 癥狀者可采集腦脊液。 標本經(jīng)離心集菌后，取沉渣做—— 1、直接鏡檢：暗視野顯微鏡觀察/ 鍍銀染色后觀察。 2、分離培養(yǎng)：標本接種于柯氏培養(yǎng)基中，觀察生長

25、 現(xiàn)象；取培養(yǎng)物做暗視野顯微鏡檢查。 3、動物試驗: 豚鼠或地鼠腹腔接種,（二） 血清學(xué)診斷 取早、晚期雙份血清 1. 顯微鏡凝集試驗 用當?shù)亓餍芯?我國標準株的鉤體作為抗原， 檢測患者有無相應(yīng)抗體。 2. 間接凝集試驗,(三) 防治原則,1．消滅傳染源,防鼠、滅鼠、加強對帶菌家畜的管理,2．切除傳播途徑,保護水

26、源，避免與疫水接觸,3．抗生素治療,首選青霉素,4. 增強易感機體免疫力 疫苗接種，多價混合鉤體死疫苗，鉤體外膜亞單位疫苗,二. 梅毒螺旋體(Treponema pallidum,TP),(一) 生物學(xué)性狀,1. 形態(tài)與染色,TP柔軟、細長，螺旋細密而規(guī)則，兩端尖直，在暗視野顯微鏡下運動活潑,觀察梅毒螺旋體可用：鍍銀染色法：暗視野顯微鏡觀察：電子顯微鏡：,鍍銀染色,2. 抵抗力,非常弱,對熱、寒冷、干燥及一般

27、化學(xué)消毒劑敏感離體后干燥1~2h或500C 5min即死亡TP對青霉素、四環(huán)素、紅霉素或砷劑敏感,,,(二) 致病性與免疫性,1. 所致疾病——梅毒,梅毒只感染人類，人是梅毒的唯一傳染源,根據(jù)梅毒的傳播方式不同：可分為獲得性梅毒和先天性梅毒兩種,(1) 獲得性梅毒,——性接觸傳播 I期梅毒：無痛性硬下疳，傳染性極強，早期梅毒 自限性

28、 II期梅毒：2~8周后，全身皮膚黏膜梅毒疹， 并伴有全身淋巴結(jié)腫大 。 自限性 從硬性下疳至梅毒疹消失后一年的一、二期梅毒， 稱為早期梅毒，傳染性強，但破壞性較小。 晚期梅毒 III期梅毒：此期梅毒傳染

29、性小但破壞性大 基本損害為慢性肉芽腫，侵犯 心血管、脊髓等，有生命危險。,,,(2) 先天性梅素,——通過胎盤傳播。 梅毒孕婦的梅毒螺旋體通過胎盤進入胎兒血流，并擴散至肝、脾、腎上腺等臟器中大量繁殖，引起胎兒全身性感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎；或出生梅毒

30、兒，表現(xiàn)為馬鞍鼻、鋸齒形牙、先天性耳聾等。,2. 免疫性,◆以細胞免疫為主,,◆屬于傳染性免疫,——體內(nèi)有TP時才有免疫力，TP被殺滅，免疫力即消失,(三) 微生物學(xué)檢查,1. 檢測梅毒螺旋體,適用于Ⅰ期和Ⅱ期梅毒 ，取標本在暗視野顯微鏡下檢查，觀察有無運動活潑的TP存在,2. 血清學(xué)診斷,①查反應(yīng)素——用正常牛心肌的心脂質(zhì)作為抗原，測定患者血清中的反應(yīng)素（抗脂質(zhì)抗體），是一種非特異抗體,包括USR試驗和RPR試驗 ，通常只適用于初