響應(yīng)曲面法優(yōu)化石榴皮多糖提取條件的研究

1、響應(yīng)曲面法優(yōu)化桔梗多糖提取條件研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂允衿閷?shí)驗(yàn)材料，基于單因素(提取時(shí)間、提取溫度、物料比、pH值和NaC1濃度)試驗(yàn)結(jié)果，確定石榴皮多糖提取主要因素，分別為物料比、提取時(shí)間和提取溫度。利用響應(yīng)曲面法對(duì)石榴皮多糖的提取條件就行優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)原理：石榴皮為石榴科植物石榴的果皮。秋季石榴果實(shí)成熟，頂端開裂時(shí)采摘，除去種子及隔瓤，切瓣曬干，或微火烘干。干燥的果皮呈不規(guī)則形或半圓形的碎片狀，厚2～3毫米。石榴皮含生物堿等多種生物活性物質(zhì)

2、，其多糖是有一系列單糖聚合而成的大分子物質(zhì)，研究表明多糖類物質(zhì)具有增強(qiáng)人體免疫力及改善糖尿病癥狀的作用。響應(yīng)曲面法(Responsesurfacemethodology，RSM)是一種優(yōu)化生物過程的統(tǒng)計(jì)學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用該法以建立連續(xù)變量曲面模型，對(duì)影響生物過程的因子及其交互作用進(jìn)行評(píng)價(jià)，確定最佳水平范圍，而且所需要的試驗(yàn)組數(shù)相對(duì)較少，可節(jié)省人力物力，因此該方法已經(jīng)成功應(yīng)用于各種各樣的生物過程優(yōu)化中。響應(yīng)曲面法，也稱為回歸設(shè)計(jì)，這類試驗(yàn)設(shè)

3、計(jì)問題需要尋找試驗(yàn)指標(biāo)與各因子間的定量規(guī)律（而不是判斷因子的顯著性，找出各因子水平的最佳組合）?；貧w設(shè)計(jì)是在多元線性回歸的基礎(chǔ)上主動(dòng)收集數(shù)據(jù)的方法獲得具有較好性質(zhì)的回歸方程的一種試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。響應(yīng)曲面回歸模型的出現(xiàn)就是集統(tǒng)計(jì)、數(shù)學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)緊密聯(lián)系的結(jié)果。由于它考慮的因素很多運(yùn)算非常繁雜是人工運(yùn)算所不及的。通過計(jì)算機(jī)運(yùn)算可以達(dá)到建立模型的目的。由于它建立的是復(fù)雜的多維空間曲面較接近實(shí)際情況因此響應(yīng)曲面回歸模型逐漸開始應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)材料與方

4、法：石榴皮（經(jīng)篩選除雜干燥粉碎后做實(shí)驗(yàn)原料），D葡萄糖，苯酚，濃硫酸，無水乙醇，石油醚，氯仿，正丁醇，丙酮（均為分析純）。分光光度計(jì)，離心機(jī)，電子天平，電熱恒溫水浴鍋1，多糖的提取稱取干燥的石榴皮粉末5.0g，置于250ml燒瓶中，加80%乙醇100ml，于80℃提一浸次，提取90min，趁熱抽慮，濾渣用80%乙醇洗滌。石榴皮洗滌液于預(yù)定的工藝條件下提取石榴皮多糖，提取液離心分離（4000rmin，10min），上清液置于200ml容量

5、瓶中，以蒸餾水定容至刻度并搖勻，準(zhǔn)確移取10ml置于50ml容量瓶中，以蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。2，多糖含量的測(cè)定：標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：采用苯酚濃硫酸法。準(zhǔn)確移取葡萄糖標(biāo)液粗多糖含量計(jì)算：多糖得率（%）=【粗多糖質(zhì)量（g）原料質(zhì)量（g）】100%（50ugml）0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，依次置于9個(gè)試管中，再分別加入去離子水補(bǔ)至0.8ml，搖勻后分別加入5%苯酚溶液0.3ml和濃硫酸2.0m