sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進(jìn)畢業(yè)論文

1、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進(jìn)目錄目錄摘要..................................................................................................................................................1關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞..........................................

2、......................................................................................................1ABSTRACT.............................................................................................................

3、...........................1KEYWDSKEYWDS............................................................................................................................................1引言引言...................................

4、.................................................................................................................11.1.材料與方法材料與方法............................................................................................

5、......................................21.11.1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料................................................................................................................................21.1.11.1.1試劑試劑........................

6、........................................................................................................21.1.21.1.2主要儀器、設(shè)備主要儀器、設(shè)備...........................................................................................

7、.................21.21.2實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法................................................................................................................................21.2.11.2.1溶液的配制溶液的配制.......................................

8、.............................................................................21.2.21.2.2制膠制膠................................................................................................................................

9、31.2.31.2.3電泳電泳................................................................................................................................41.2.41.2.4染色染色..............................................................

10、..................................................................51.2.4.11.2.4.1傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)染色法傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)染色法........................................................................................51.2.4.21.2.4.2水浴加熱法水浴加熱法......

11、......................................................................................................51.2.4.31.2.4.3微波爐加熱法微波爐加熱法...........................................................................................

12、.............51.2.51.2.5染色結(jié)果觀察染色結(jié)果觀察................................................................................................................62.2.結(jié)果與分析結(jié)果與分析.........................................................

13、.........................................................................62.12.1染色效果與操作的染色效果與操作的簡便性簡便性....................................................................................................62.22.2不同染色方法凝膠成像結(jié)

14、果不同染色方法凝膠成像結(jié)果................................................................................................71SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進(jìn)聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法的改進(jìn)摘要：針對(duì)傳統(tǒng)的SDSPAGE染色法耗時(shí)長，脫色所用甲醇有毒，乙醇會(huì)同時(shí)把考馬斯亮藍(lán)顏色脫去，使蛋白質(zhì)條帶不清晰等問題，對(duì)常染法進(jìn)行了改進(jìn)。本

15、文用水浴或微波加熱處理，同時(shí)改變?nèi)旧汉兔撋撼煞?，用乙醇、蒸餾水代替甲醇，大大縮短了染脫時(shí)間，經(jīng)過比較，認(rèn)為改進(jìn)后的水浴法所耗時(shí)間大大縮短，染色效果也較好。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：SDSPAGE；考馬斯亮藍(lán)；水浴法；染色；脫色AModifiedMethodfSDSPAGEStainingAbstract:FthetraditionalSDSPAGEtimeconsumingstainingCoomassiebrilliantbluecolcan

16、betakenoffbytheethanolusedfbleachingmethanolistoxictheproteinbsisnotclearotherissuesanimprovedmethodfthecommondyeingiscoming.Byusingawaterbathmicrowaveheattreatmentatthesametimechangingthecompositionofdyeingbleachingliqu

17、idethanoldistilledwaterinsteadofmethanolreducingthetimeofdyeingoffgreatly.Bycomparisionthatthebathingmethodimprovedreducesthetimesignificantlydyeingbetter.Keywds：SDSPAGE；coomassiebrilliantblue；waterbathing；staining；decol

18、ization引言繼人類基因組計(jì)劃之后，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為21世紀(jì)生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)，對(duì)蛋白質(zhì)高分辨率的分離和準(zhǔn)確鑒定變得至關(guān)重要。目前分離蛋白質(zhì)的主要方法之一就是采用十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDSPolyacrylaeGelElectrophesisSDSPAGE），它的支持介質(zhì)是三維網(wǎng)狀的聚丙烯酰胺凝膠。在催化劑的作用下，單體丙烯酰胺（acrylae，Acr）與N，N甲叉雙丙烯酰胺（NNmethylenebisacryl

19、se，交聯(lián)劑，Bis）發(fā)生聚合反應(yīng)，生成凝膠介質(zhì)。由于不同蛋白質(zhì)分子大小和所帶電荷的不同，從而對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，而分離后的電泳凝膠檢測(cè)的染色方法也有多種，其中考馬斯亮藍(lán)染色法由于具有很強(qiáng)的特異性、較少的干擾因素、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)，而成為蛋白質(zhì)電泳檢測(cè)和定量分析的一種常用方法。常用的考馬斯亮藍(lán)有G250，R–350，和R250三種，在游離狀態(tài)下，考馬斯亮藍(lán)G250為紅色，其最大吸收值為488nm；而它與蛋白質(zhì)結(jié)合后顏色由紅色變?yōu)榍嗌?9