擬南芥CDR6基因在調控鉛脅迫響應中的功能研究.pdf

1、土壤重金屬污染已成為一個嚴重的環(huán)境問題，其中重金屬鉛通過生物鏈累積到人類的組織和器官中，對人類健康構成嚴重威脅。植物修復技術與基因工程技術結合，被應用于解決土壤重金屬污染問題，而該研究的關鍵就在于植物耐受重金屬毒害的關鍵基因的克隆及其分子機制的認識。在前期工作中通過擬南芥基因表達譜分析，發(fā)現CDR6基因可被鉛脅迫誘導表達。在此基礎上，獲得了一個功能缺失的突變體cdr6-1，并構建了CDR6過表達載體及轉基因植株，對CDR6基因在植物應對

2、重金屬脅迫過程中的生物學功能進行了研究，主要結果如下:
　　1.利用組織活性染色和qRT-PCR方法對CDR6基因的組織特異性表達進行了分析，發(fā)現該基因在擬南芥各個組織中均有表達，其中在花、莖與果莢中表達量較高，而在根、蓮座葉與苞葉中表達量相對較低。
　　2.利用激光共聚焦顯微鏡，對CDR6基因所編碼蛋白的亞細胞定位進行了觀察，發(fā)現該蛋白定位于細胞質。
　　3.通過分子鑒定和遺傳分析，獲得了CDR6功能缺失的突變體cd

3、r6-1;同時，構建CDR6過量表達載體并轉化野生型植株，篩選鑒定獲得CDR6過表達植株。
　　4.對cdr6-1突變體與CDR6過表達株系進行了鉛脅迫耐受的表型分析發(fā)現，與野生型相比，cdr6-1純合突變體表現對鉛脅迫耐受，而CDR6過表達植株表現對鉛脅迫敏感。表明CDR6基因負調控鉛脅迫響應。
　　5.進一步分析了鉛脅迫應答相關基因的表達，發(fā)現cdr6-1突變體經重金屬鉛脅迫處理后AtPDR12、GSH1基因的轉錄水平與