活性艷紅X—3B染料廢水對黃孢原毛平革菌產(chǎn)生損傷效應初探.pdf

1、本論文以黃孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium，PC)為研究對象，探討該菌在降解染料過程中，染料和鹽對其產(chǎn)生的生物毒性作用。論文從菌絲細胞超微結構觀察、過氧化物同工酶譜帶分析、基因多態(tài)性分析以及自由基捕獲四個方面進行分析，結果可為實現(xiàn)白腐真菌處理染料廢水系統(tǒng)的優(yōu)化調(diào)控提供一定的理論依據(jù)。 全文研究內(nèi)容如下： (1)染料對黃孢原毛平革菌細胞具有明顯的毒性作用。加入100 mg/L的染料活

2、性艷紅X-3B后，黃孢原毛平革菌菌絲細胞出現(xiàn)質(zhì)壁分離現(xiàn)象；當染料濃度增大到200 mg/L時，線粒體受到損傷；染料濃度進一步加大，菌絲細胞超微結構受到損傷逐漸嚴重，細胞質(zhì)基質(zhì)分布不均且大多降解。NaCI濃度為3g/L時，菌絲細胞發(fā)生質(zhì)壁分離，當NaCl加入量高于8g/L時，細胞膜受損，線粒體、細胞核呈現(xiàn)空泡化，表現(xiàn)為受到不可逆的損傷。研究染料和鹽雙因子對黃孢原毛平革菌細胞的損傷，其損傷程度與單因子作用一致，且受兩個因子的共同影響對細胞的

3、損傷作用加重。 (2)過氧化物同工酶的變化類似于白腐真菌對不良環(huán)境條件表現(xiàn)出的應激反應，經(jīng)歷了誘導、抑制直至衰竭的過程。當活性艷紅X-3B的濃度為100 mg/L～200mg/L、NaCI濃度為3g/L～8g/L時，酶帶顯著增強，即染料、NaCI濃度較低時可以誘導過氧化物酶的大量產(chǎn)生。但染料、NaCI濃度超過誘導限值后產(chǎn)酶量將逐漸降低。在雙因子作用下，染料濃度為100mg/L時，NaCI濃度的變化對其誘導產(chǎn)酶幾乎沒有影響；染料

4、濃度為300mg/L時，NaCI濃度的變化進一步加重抑制產(chǎn)酶。說明染料活性艷紅X-3B和NaCI是黃孢原毛平革菌的環(huán)境脅迫因子，對過氧化物同工酶產(chǎn)生損傷效應。 (3)采用AFLP分析染料和鹽脅迫對黃孢原毛平革菌基因產(chǎn)生的損傷效應，初步得出結論；①染料濃度在=400mg/L時，DNA損傷效應表現(xiàn)在堿基發(fā)生突變，導致酶切后擴增樣品圖譜出現(xiàn)新的DNA條帶；染料濃度達到500mg/L，DNA鏈受損較嚴重，出現(xiàn)DNA鏈斷裂；②NaCI的

5、損傷作用表現(xiàn)為隨NaCI濃度增大DNA損傷也增大，但NaCl的損傷作用與染料相比較??；③染料和NaCl進行雙因子研究，結果表明二者在同一體系共同作用對DNA的損傷與染料引起的損傷作用更趨于一致。 (4) 利用AFLP技術對黃孢原毛平革菌基因產(chǎn)生的損傷效應進行分析，能夠得到穩(wěn)定、清晰、分辨率較高的指紋譜帶，證明AFLP方法在研究基因損傷方面是有效的。 (5) 利用PBN捕獲黃孢原毛平革菌所產(chǎn)生的活性氧，在EPR圖譜上未檢測到明顯