一個(gè)遺傳性凝血因子?缺陷癥家系基因分析

1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文一個(gè)遺傳性凝血因子Ⅺ缺陷癥家系基因分析姓名：戴利亞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：王明山2012-12-02溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文——————————————————————————————一——————————————————————————————————————————————一用c h r o m a s 軟件和D N A M A N 軟件：將測(cè)序結(jié)果與美國(guó)N C B I 基因庫所公布的F

2、X I 基N序列( G e n B a n k A Y l 9 1 8 3 7 ) 進(jìn)行比對(duì)( B l a s t e r ) ，尋找突變基因。結(jié)果l 、遺傳性F X I 缺陷癥家系凝血功能檢測(cè)結(jié)果先證者A P T T 延長(zhǎng)，為5 0 ．O s ／3 5 s ；先證者弟弟與兒子A P T T 同樣延長(zhǎng)，分別為5 3 ．7 s ／3 5 s 和5 1 ．8 s ／3 5 s ；家系其他成員A P T T 無明顯延長(zhǎng)。先證者及其弟弟、兒子和

3、父親的F X I ：C 明顯減低，分別為2 2 ．5 ％、2 2 ．3 ％、3 5 ．5 ％矛t 1 4 2 ．0 ％，F(xiàn) X l ：A g 水平分別為2 9 ％、1 8 ％、2 9 ％矛1 4 0 ％，表現(xiàn)為交叉反應(yīng)物質(zhì)( C R M ) 陰性。先證者母親的凝血指標(biāo)均在參考范圍。2 、遺傳性F Ⅺ缺陷癥家系基因分析對(duì)該F Ⅺ缺陷癥家系成員所有1 5 個(gè)外顯子及側(cè)翼序列進(jìn)行P C R 擴(kuò)增，純化擴(kuò)增產(chǎn)物后進(jìn)行測(cè)序。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，先證者及其父

4、親、弟弟、兒子外顯子8 區(qū)( E 8 ) 存在C 1 6 6 4 2 T 雜合無義突變，使得編碼第2 6 3 位氨基酸的堿基發(fā)生突變c 從一T A A( G l n 2 6 3 s t o p ) ，對(duì)1 0 6 名健康對(duì)照者進(jìn)行篩查，排除了基因多態(tài)性的可能。該無義突變使得編碼2 6 3 位的氨基酸提前出現(xiàn)終止密碼，形成截短型蛋白，此蛋白因缺失部分結(jié)構(gòu)域，高度不穩(wěn)定，并伴細(xì)胞內(nèi)迅速降解，而導(dǎo)致F Ⅺ水平降低。此外，先證者外顯子1 5 區(qū)

5、( E 1 5 ) 存在G 2 5 0 9 3 T 和G 2 5 1 2 0 A 突變，經(jīng)D N A M A N 軟件處理后發(fā)現(xiàn)均為同義突變，查詢相關(guān)網(wǎng)站( h t t p ：／／w w w ．n c b i ．n l m ．n i } 1 ．g o v ／S N P ) 發(fā)現(xiàn)二者均為多態(tài)性位點(diǎn)。結(jié)論1 、該家系中先證者及其父親、弟弟、兒子可診斷為遺傳性F X I 缺陷癥交叉反應(yīng)物質(zhì)( C R M ) 陰性型。2 、F X l 8 號(hào)外