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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文不同濃度維生素C對(duì)光損傷后角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)游離Ca濃度的影響姓名:趙娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師:李艷佳20080301中文摘要不同濃度維生素C 對(duì)光損傷后角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)游離C a 2 + 濃度的影響摘 要目的:C a 2 + 是人體內(nèi)最普遍使用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子,在細(xì)胞生命活動(dòng)中起著重要的作用,所有類型細(xì)胞的各種功能均不同程度的被C a 2 + 調(diào)控。陽(yáng)光中的紫外線輻射是一種非常顯著的環(huán)境誘變因子
2、,對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的損傷作用已經(jīng)明確,而維生素C 的抗氧化作用也有很多研究,其重要的抗氧化作用越來(lái)越受到重視。但目前在細(xì)胞水平上,關(guān)于維生素C 對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞光損傷的干預(yù)作用機(jī)制尚不完全清楚,是否與其鈣調(diào)控有關(guān)尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)首先用窄譜中波紫外線( N B .U V B ) 對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞進(jìn)行輻射,然后給予不同濃度的維生素C ,著重通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活性及細(xì)胞內(nèi)C a 2 +濃度變化來(lái)探討維生素C 的抗氧化作用與細(xì)胞內(nèi)C a 2 +
3、 濃度變化的相關(guān)性。.方法:角質(zhì)形成細(xì)胞的分離與培養(yǎng):收集我院泌尿外科青少年包皮環(huán)切術(shù)后的包皮組織,利用中性分離酶和胰蛋白酶聯(lián)合消化法分離細(xì)胞,加入D M E M 培養(yǎng)基制成細(xì)胞混懸液,轉(zhuǎn)入2 5 c m 2 培養(yǎng)瓶中,于3 7 ℃、5 %C 0 2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),隔天換液。原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)至1 5 天左右細(xì)胞接近融合狀態(tài)時(shí)胰蛋白酶消化,按l :3 的比例傳代,3 7 ℃、5 %C 0 2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)基。以后視細(xì)胞生長(zhǎng)
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