不同濃度維生素C對(duì)N-2a細(xì)胞及其移植瘤增殖的影響.pdf

1、目的：通過(guò)細(xì)胞系和荷瘤鼠觀察不同濃度維生素C對(duì)N-2a細(xì)胞及其移植瘤增殖的影響。
　　方法：
　　檢測(cè)不同濃度維生素C干預(yù)N-2a細(xì)胞0、24、48、72、96h時(shí)的吸光度值（OD），計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率；用流式細(xì)胞儀觀察維生素C干預(yù)N-2a細(xì)胞48h時(shí)細(xì)胞的周期分布和凋亡情況；彗星實(shí)驗(yàn)分析干預(yù)48h時(shí)N-2a細(xì)胞的DNA損傷情況。
　　用BALB/c乳鼠建立N-2a細(xì)胞移植瘤模型，每天稱重并腹腔注射不同劑量的維生素C，

2、瀕死時(shí)剖取瘤體，稱重并測(cè)量體積。統(tǒng)計(jì)荷瘤生存期，繪制生長(zhǎng)曲線，計(jì)算瘤體系數(shù)，對(duì)瘤體進(jìn)行病理觀察以及檢測(cè)凋亡蛋白Caspase-3的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，1）與對(duì)照組相比，50μM組增殖差異不顯著，100、250、500μM維生素C組表現(xiàn)為促細(xì)胞增殖，1000、2500μM組抑制瘤細(xì)胞增殖，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2）維生素C作用后主要表現(xiàn)為晚期凋亡，并且呈一定的量效關(guān)系；實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，G1期細(xì)

3、胞減少，S期細(xì)胞增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。3）50、500、1000μM組的DNA遷移長(zhǎng)度和遷移率明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2500μM組的DNA遷移長(zhǎng)度和遷移率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，1）荷瘤生存期分別為：200mM維生素C組51.39±0.95d，400mM組63.72±1.48d，800mM組58.63±0.82d；均高于對(duì)照組的37.25±

4、0.46d，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2）從新生到2w各組間生長(zhǎng)曲線基本一致。從第3w開始，與空白組相比，對(duì)照組的生長(zhǎng)曲線短而低；400mM組基本呈“S”形，但位置較低；200mM組和800mM組與之較為相近。3）對(duì)照組的瘤體體積和瘤體重量均顯著低于實(shí)驗(yàn)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；實(shí)驗(yàn)組間，400mM組的瘤體系數(shù)最小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。4）對(duì)照組的惡性化程度最高，幾乎都是未分化型瘤細(xì)胞，而實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞間的

5、神經(jīng)纖維絲豐富，明顯可見處于分化狀態(tài)的瘤細(xì)胞，并且除纖維絲外基本都是細(xì)胞間質(zhì)。5）Caspase-3蛋白的陽(yáng)性染色主要定位于胞漿和/或胞核，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，低濃度維生素C主要表現(xiàn)為保護(hù)N-2a細(xì)胞免受外來(lái)因素?fù)p害，并有促進(jìn)其增殖的作用；高濃度維生素C對(duì)N-2a細(xì)胞則有一定的損害和抑制增殖作用。從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)看，維生素C可以明顯延長(zhǎng)荷瘤鼠的生存期，但未見瘤體縮小或消失；高劑量