維生素E聯(lián)合順鉑對(duì)Lewis小鼠移植瘤治療作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：肺癌是當(dāng)前發(fā)病率和死亡率增長最快，對(duì)人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。針對(duì)阻斷肺癌血供的研究是目前公認(rèn)的肺癌治療重要的研究突破口。目前國內(nèi)外有眾多關(guān)于肺癌血管生成機(jī)制以及維生素E抗微血管生成機(jī)制的研究，同時(shí)認(rèn)為抗血管藥物與化療藥物聯(lián)合使用具有協(xié)同抗腫瘤作用。本實(shí)驗(yàn)通過觀察維生素E聯(lián)合順鉑對(duì)Lewis小鼠腫瘤控制及血管生成和VEGF表達(dá)的影響,旨在為臨床防治肺癌的研究提供借鑒。
　　方法：本研究采用Lewis肺癌小鼠模型。

2、實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為四組，每組7只裸鼠，對(duì)照組（NS組）每日給予生理鹽水90mg/kg腹腔注入；單藥順鉑組（DDP組）每日給予DDP2mg/kg溶解在與對(duì)照組等量的生理鹽水腹腔注入；單藥維生素E組（VE組）每日給予維生素E100mg/kg混入飼料中喂養(yǎng)，維生素E聯(lián)合順鉑組（VE+DDP組）每日給予維生素E100mg/kg+順鉑2mg/kg，總計(jì)給藥順鉑3天，維生素E7天，給藥方式均采用口服+腹腔注入。治療后第21日處死小鼠，剝離出腫瘤組織，

3、稱量腫瘤重量，計(jì)算瘤重抑瘤率。腫瘤切片的蘇木精-伊紅染色（Hematoxylin-eosin staining，HE）觀察腫瘤血管新生的情況，免疫組化染色用于確定腫瘤新生毛細(xì)血管的數(shù)量以及細(xì)胞因子包括血管內(nèi)皮生長因子、血管生成素等細(xì)胞因子的表達(dá)，與此同時(shí)，我們還提取腫瘤組織總RNA，并用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(reverse transcription-polymerise chain reaction， RT-PCR)檢測VEGFm

4、RNA及VEGFRmRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1.各組腫瘤瘤重和瘤重抑瘤率的比較： NS組和VE組腫瘤生長速度最快，DDP組腫瘤生長速度較NS組和VE組相對(duì)緩慢， NS組和VE組的瘤重明顯大于其他兩組（P＜0.05)，其中VE組的瘤重略小于NS組，但兩組間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)， DDP組的瘤重與 VE+DDP組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　2.HE染色腫瘤組織新生血管變化：NS組腫瘤細(xì)胞生長旺盛，腫

5、瘤組織內(nèi)大量新生血管可見；VE組腫瘤細(xì)胞生長旺盛，腫瘤組織內(nèi)新生血管密度較低；DDP組壞死灶呈條片索狀分布，組織內(nèi)新生血管密度相對(duì)稍低，VE+DDP組腫瘤細(xì)胞散在分布，細(xì)胞體積明顯縮小，可見大片壞死區(qū)域，新生血管密度低下。
　　3、免疫組化方法檢測VEGF及VEGFR的陽性表達(dá)。NS組與DDP組VEGF及VEGFR的表達(dá)明顯高于其他2組( P＜0.05)，但兩組間的VEGF及VEGFR表達(dá)變化不大，無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)

6、。VE組的VEGF及VEGFR表達(dá)明顯低于DDP組( P＜0.05)，VE組的VEGF及VEGFR的表達(dá)與VE+DDP組無明顯差異(P＞0.05)
　　4、RT-PCR顯示VEGFmRNA及VEGFRmRNA條帶深于其它組別為陽性。統(tǒng)計(jì)分析顯示NS組、PPD組VEGFmRNA及VEGFRmRNA的表達(dá)明顯高于其他兩組( P＜0.05)，但NS和PPD兩組之間比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。VE組表達(dá)明顯低于DDP組( P＜0