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1、目的:通過(guò)觀(guān)察參芪抑瘤方聯(lián)合順鉑對(duì)MFC荷瘤小鼠腫瘤的干預(yù)作用,探討本方對(duì)腫瘤的抑制作用,并從腫瘤細(xì)胞增殖凋亡和侵襲轉(zhuǎn)移方面探討其作用機(jī)制。
方法:50只BALB/c-nu小鼠適應(yīng)飼養(yǎng)7天后造模,右前腋下接種MFC胃癌細(xì)胞懸液造模。在接種第7天,隨機(jī)挑選接種部位帶結(jié)節(jié)的小鼠雌雄各1只,取結(jié)節(jié),經(jīng)病理診斷均為腫瘤組織時(shí),提示造模成功。模型小鼠按體重隨機(jī)分為6組即模型組、順鉑組、參芪抑瘤方低劑量組(中藥低組)、參芪抑瘤方高劑量組(
2、中藥高組)、參芪抑瘤方低劑量聯(lián)合順鉑組(聯(lián)合低組)、參芪抑瘤方高劑量聯(lián)合順鉑組(聯(lián)合高組),每組8只,雌雄各半,另設(shè)空白組。參芪抑瘤方高、低劑量組分別給予56.92g/kg、28.46g/kg,連續(xù)治療15d。順鉑組及聯(lián)合組,腹腔注射順鉑,給藥量為:2.5mg/kg,于第1、8d給藥。完整剝?nèi)∑⑴K、腫瘤組織。
觀(guān)察指標(biāo):
?。?)一般情況和瘤體情況;
(2)脾指數(shù)、抑瘤率及q值;
?。?)病理學(xué)觀(guān)察;
3、
?。?)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)檢測(cè)瘤體XIAP、PTEN、TGF-β、MMP13mRNA及蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
?。?)造模后瘤體逐漸增大,腫瘤表面由圓形、橢圓形逐漸變?yōu)椴灰?guī)則形,活動(dòng)度較差;中藥組與聯(lián)合組小鼠一般情況優(yōu)于模型組和順鉑組。
?。?)脾指數(shù):與模型組相比,中藥低組、中高高組分別升高了31.86%、36.27%(P<0.01),與順鉑組相比,聯(lián)合低組、聯(lián)合高組分別升高了19%、3
4、9%(P<0.01)。
(3)抑瘤率:順鉑組為55.25%,中藥低組為27.7%,中藥高組為30.58%,聯(lián)合低組為66.3%,聯(lián)合高組67.78%;聯(lián)合用藥組優(yōu)于單純用藥組;差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。q值:聯(lián)合低組、中藥低組及順鉑組三組計(jì)算q≈0.942,聯(lián)合高組、中藥高組及順鉑組三組計(jì)算q≈0.983。
?。?)病理組織顯示,模型組細(xì)胞數(shù)量多,其腫瘤細(xì)胞異型性明顯;各治療組腫瘤細(xì)胞數(shù)量減少,壞死增加。
5、r> ?。?)與模型組相比,順鉑組、中藥組、聯(lián)合組中XIAP、TGF-β、MMP13 mRNA及蛋白的表達(dá)均降低,PTEN mRNA及蛋白的表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
?。?)與順鉑組、中藥低組和中藥高組相比,聯(lián)合低組和聯(lián)合高組中XIAP、TGF-β、MMP13 mRNA及蛋白的表達(dá)均降低,PTEN mRNA及蛋白的表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
結(jié)論:參芪抑瘤方具有一定的抗MFC胃癌移
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