凝血因子?c46t基因多態(tài)性和冠心病關(guān)系的初步研究

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文凝血因子ⅫC46T基因多態(tài)性和冠心病關(guān)系的初步研究姓名：吳康松申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（心血管?。┲笇?dǎo)教師：徐耕20040501吳康松2 0 0 4 年浙江大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 W u K a n g s o n gd i s s e r t a t i o nf o rM M了一些研究，但其與冠心病的關(guān)系仍在爭(zhēng)論中。在亞洲人群中C 4 6 T 突變發(fā)生率高，因此猜測(cè)，其冠心病發(fā)病率低可能與此突變有關(guān)。我們利

2、用～I(xiàn) S P C R 技術(shù)研究F X I IC 4 6 T 基因多態(tài)性在中國(guó)漢族人群中的發(fā)生率，探討其與冠心病的關(guān)系。材料與方法一、研究對(duì)象冠心病組1 5 0 例( 男1 1 8 名，女3 2 名) ，平均年齡6 3 ．9 + - - 9 ．4 歲，來(lái)自本院心內(nèi)科病房，均符合1 9 7 9 年W H 0 關(guān)于缺血性心臟病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并全部經(jīng)選擇性冠狀動(dòng)脈造影證實(shí)，以左前降支、左回旋支、右冠狀動(dòng)脈及主要分支中任何一支血管狹窄程度≥5 0

3、 ％為陽(yáng)性。同時(shí)分為A C S ( a c u t e c o r o n a r ys y n d r o m e ，急性冠脈綜合征)亞組和非A c s 亞組，A C S 亞組包括不穩(wěn)定性心絞痛患者6 4 例、急性心梗患者4 4 例，非A c s 亞組包括穩(wěn)定性心絞痛患者4 2 例。對(duì)照組1 8 5 f f 4 ( 男1 2 1 名，女6 4 名) ，平均年齡6 2 ．3 ±9 ．4 歲，冠狀動(dòng)脈造影示為陰性。所有研究對(duì)象均

4、來(lái)自浙江地區(qū)漢族人群，無(wú)血緣關(guān)系。二、方法1 ．一般臨床資料的收集：所有受試者均詳細(xì)詢問(wèn)有無(wú)高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙史，并測(cè)定身高、體重及部分生化指標(biāo)。2 ．D N A 抽提外周血經(jīng)離心去上清后，置于一7 0 。C 冷凍保存。采用鹽析法抽提外周血基因組D N A 。T E 溶解，一2 0 。C 保存。3 ．P C R 擴(kuò)增應(yīng)用M S P C R 技術(shù)，擴(kuò)增F X U 基因中含有C 4 6 7 r 的位點(diǎn)。M S P C R 是為檢

5、測(cè)點(diǎn)突變而設(shè)計(jì)的P C R 技術(shù)，它分別在一端設(shè)計(jì)兩條引物，一條為野生型，另一條為突變型引物，另一端設(shè)計(jì)一條共同引物，突變型引物的突變堿基設(shè)計(jì)在引物的3 ’端。兩上游引物長(zhǎng)度相差8 - 1 0 個(gè)堿基。經(jīng)P C R 擴(kuò)增后可產(chǎn)生兩種長(zhǎng)度不一的產(chǎn)物，不需限制性內(nèi)切酶技術(shù)，即可將兩等位基因分離。P C R 反應(yīng)體系，總體積為2 5 u1 ．包含約1 0 0 n g D N A 模板，2 0 0 u m o l ／Ld N T P s ，1