胃癌下調基因的克隆及染色體2p13.3又一胃癌相關brichos家族全長新基因gddr的相關研究

1、Y 8 1 1 ) 7 6 8分類號U D C帶級編號浙江大學博士后研究：【= 作報告胃痛下調基因的克隆及染色體2p 1 3 ．3 又一胃癌相關B R I C H O S家族全長新基因G D D R 的相關研究杜建軍工作完成日期：一j 幽￡提交報告日期：一2 立世：Q §：浙江大學( 浙江j2 0 0 4 年0 6 月浙波大學博斗^ 后研究工作報告 摘要N o t h e m b l o t 證實新基因G D D R 在胃癌中

2、表達缺失或明顯下調，N B T ／B C I P 鼴色表鞠，G D D R 位子歪鬻霉粘驥上皮緇脆艟雨，G D D R 敘在臀組織中表達：G D D R 的蒸因組D N A 從4 7 9 9 6 0 3 4 開始，4 7 9 8 8 2 9 6 結束，共由6 個外戥予，5 個內含子緞成，總長7 7 3 9 b p ，房動予調控區(qū)域長約6 1 8 b p ，位于4 7 9 9 6 4 5 3 至4 7 9 9 5 8 3 6 ，在轉錄起始

3、位點的+ 9 6 b p ，和* 4 1 9 b p ；N K x ．2 ，S R Y , A M L —l a 轉錄因子的結合饅點分別在啟動子的2 5 6 - 2 6 2 位T C A A G T G ，5 4 8 。5 5 4 位T T T G T T T , 3 5 2 —3 5 7 位T G T G G T ，羰測概率1 0 0 ％；G D D R 與籬緩織姆舅、臀瘺候選摻瘞基因C A l l 在染色傣蕊匿縫D N A 相藏僅僅

4、2 1 7 0 1 b p ，即均位于2 p 1 3 ．3 ，其基因組D N A 結構與c D N A 結構極為鞠釹，調羥區(qū)大，l 、與蓬菠氌綴接近，毽荬調控區(qū)凈雍不溺，轉錄因予及萁繚舍部位也不盡相同或區(qū)別較大，其中C A l l 預測概率9 9 ％的G A T A ．1 ，T B X 5 ，d e l t a E F l轉錄因子結合髓點分剮在癌動子4 3 8 - 4 4 1 G A T A ，4 4 7 - 4 5 2A G G T

5、G T ,4 3 l - 4 3 5 A G G T G 。編碼蛋白前有一跨膜肽區(qū)結構的G D D R , 與分泌蛋白C A I 1 為簡源蛋自，均為新的B R I C H O S 家族成員。G D D R 穩(wěn)定轉染胃癌7 9 0 1 細胞累表達G D D R m R N A ，生長監(jiān)線及M T T 撿測均寢暖，G D D R 曼溪翔制囂癌7 9 0 1 細腿的生長( 7 2 h ，O ．3 4 1 士0 ．0 1 4 bV SO ．4

6、 8 8 - t - 0 ．0 1 5A ，P < 0 ．0 1 ) ，較對照組窀載轉染7 9 0 1綱胞，G D D R 穩(wěn)定轉染胃癌7 9 0 1 細胞系綱胞表塑發(fā)生了變化。結論篩選到1 2 個低豐度裘達胃煽下調熬因，它們很可能參與胃癌的發(fā)生發(fā)展過私。G D D Re D N AO R F 第8 8 能G 變A ( G G C ／A G C ，G —S ) ，第4 7 6 位G 交A ( A G T ／A A T , S -

7、N ) ；G D D Re D N A 念長延{ 棗至8 2 6 b p , G D D R 基園鰓D N A 位予4 7 9 9 6 0 3 4 ，4 7 9 8 8 2 9 6 ，全長7 7 3 9 b p ，與C A l l 相距2 1 7 0 1 b p ，均在染色體2 p 1 3 ' 3 。G D D R 瘸凌子調控區(qū)域長約6 1 8 b p ，在轉蒙起始鉸患f F ' J + 9 6 b p ，露- 4 1

8、9 b p ；G D D R 頸測概率1 0 0 ％的N K x ．2 ，S R Y , A M L ，l a 轉澩因子結合位點分別在啟動子2 5 6 ．2 6 2( T C A A G T G ) ，5 4 8 w 5 5 4 ( r a g r 喲，3 5 2 —3 5 7 ( T G T G G T ) 。編碼蛋密游有一跨貘歇醫(yī)結構的G D D R ，與分泌騷白C A l l 為同源蛋白。具有胃緞織特異性的、胃癌下調全長新蒸因G