家族性胃癌及胃癌家族遺傳性與E-cadherin基因的研究.pdf

1、基因突變和其啟動子甲基化是使基因轉錄靜止甚至整個基因失活的主要原因之一，在癌癥的發(fā)生和發(fā)展過程中起重要作用。10％的胃癌表現(xiàn)為家族聚集性胃癌，家族聚集性胃癌可由強遺傳易感性基因(例如E-cadherin基因)引起；胃癌的家族聚集性也可是弱遺傳易感性基因共同作用并在某些環(huán)境因素作用下經過漫長過程所產生的一個總效應。E-cadherin基因作為轉移抑制因子在胃癌的發(fā)展過程中起著重要的作用，其基因一旦突變遺傳給后代，就會大大增加后代患腫瘤的危

2、險性。家族性胃癌遺傳易感基因的研究被認為是未來十年胃癌最有潛力的研究項目。NCCN2008胃癌治療指南明確指出：25％的常染色體顯性遺傳性彌漫型胃癌易感家族存在上皮鈣粘素(E-cadherin)突變，對具有遺傳性彌漫型胃癌家族史并攜帶胚系E-cadherin的截斷突變的無癥狀年輕患者提供遺傳咨詢和實施預防性胃切除術，可以有所裨益。E-cadherin基因胚源性突變在世界很多地方都有的報道，但即使是在符合標準的HDGC家族中E-cadhe

3、rin突變檢出率僅為25％-36％，仍然有60％以上家系遺傳易感基因未被發(fā)現(xiàn)，家族性腸性胃癌的遺傳易感基因尚未發(fā)現(xiàn)。在我國，尚無明確資料證實胃癌和家族性胃癌的分子遺傳學基礎：與E-cadherin基因的表達、甲基化及突變的關系也尚無系統(tǒng)研究；是否存在其他相關基因及與HNGC和FIGC多效易感基因需進一步探討；故進一步發(fā)現(xiàn)和篩選家族性胃癌易感基因任重道遠。胃癌是我國頭號腫瘤殺手，我圖人口眾多，是胃癌的高發(fā)地區(qū)，胃癌是早期發(fā)現(xiàn)后能夠治愈的疾

4、病，所以確定與胃癌易感性相關的基因，將在確定易感人群，早期診斷，早期治療上具有非常重要的作用。
　　 第一部分我國家族性胃癌家系的臨床病理特點及相關腫瘤分析
　　 目的：研究我國南方家族性胃癌的家系發(fā)病特點和預后，及其家系中發(fā)生相關腫瘤的特點，探討我國家族性胃癌的診斷和篩選方法。
　　 方法：該院胃腸胰外科單病種胃癌資料庫中自1994年6月至2007年10月共有完整隨訪資料的胃癌患者1225例(均有病理學診斷)。

5、對這些胃癌患者進行詳細的家系調查和家系隨訪，詳細記錄家族史，患腫瘤人數，腫瘤部位和腫瘤類型，患病年齡。收集8個符合國際遺傳性胃癌協(xié)作組制定的(ICG-HGC)遺傳性胃癌家系和可疑ICG-HGC家系，繪制其家系圖譜，分析其發(fā)病病理特點及預后，同時了解其家族成員發(fā)生相關腫瘤特點。
　　 結果：中國南方胃癌家族史的站3.1％，符合ICG-HGC篩選標準的占0.98％。ICG-HGC家系和可疑ICG-HGC家系中，發(fā)病年齡29-65歲，

6、共有腫瘤病灶58個包括一例多源癌，其中胃腫瘤病灶41個，以胃竇、體部為主，病理類型為中低分化腺癌；胃外腫瘤17個，其中結直腸腫瘤6個；十一例先證者中根治術后四例生存時間大于3年，最長超過十年。
　　 結論：
　　 1.我國南方家族性胃癌表現(xiàn)為發(fā)病年齡輕，病理分化差，進展期胃癌，遠端胃發(fā)生為主。
　　 2.常伴發(fā)腸道腫瘤；遴選ICG-HGC家系應注意與遺傳性非息肉病性結直腸癌(HNPCC)家系區(qū)
　　 3.

7、中國南方胃癌家族史的站3.1％，符合國際家族性胃癌篩選標準的占0.98％。
　　 第二部分上皮型鈣黏素基因表達及啟動子甲基化與胃癌家族遺傳性
　　 目的：檢測家族遺傳性胃癌和伴胃癌家族史和腫瘤家族史胃癌及散發(fā)性胃癌的上皮性鈣黏附素基因(E-cadherin)啟動子區(qū)甲基化和蛋白表達情況，探討家族性遺傳性胃癌與E-cadherin基因甲基化和蛋白表達的關系。
　　 方法：采用免疫組織化學方法檢測符合ICG-HGC診

8、斷標準的8例家族性遺傳性胃癌和伴胃癌家族史胃癌的有30例，伴腫瘤家族史胃癌患者30例，散發(fā)性胃癌20例的上皮性鈣黏附素蛋白表達情況及上述標本的E-cadherin基因啟動子甲基化情況，進行分析，探討家族性胃癌發(fā)生的分子遺傳學基礎。
　　 結果：E-cadherin在各組胃癌中表達均下調，與正常組織差異具有統(tǒng)計學意義。家族性遺傳性胃癌中E-cadherin表達下調與其他胃癌組相比差異具有統(tǒng)計學意義。在各組中均不同程度發(fā)生E-cad

9、herin基因啟動子甲基化，在家族遺傳性胃癌、伴胃癌家族史胃癌與腫瘤家族史和散發(fā)性胃癌相比差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 結論：
　　 1.上皮性鈣黏附素蛋白表達抑制在胃癌中并不少見，E-cadherin基因啟動子區(qū)甲基化可能是導致E-cadherin基因表達下調的重要原因。
　　 2.E-cadherin蛋白表達在家族遺傳性胃癌組明顯降低，E-cadherin基因可能是家族遺傳性胃癌的分子遺傳學基礎。
　　

10、 第三部分 E型鈣依賴粘附蛋白基因與家族遺傳性胃癌的關系
　　 目的：檢測家族遺傳性胃癌家系患者的E型鈣依賴粘附蛋白基因(E-cadherin)和蛋白表達和啟動子區(qū)甲基化及胚系和體細胞突變情況，探討E-cadherin基因在中國家族遺傳性胃癌中的作用。
　　 方法：8個符合家族遺傳性胃癌(ICG-HGC)的患者的腫瘤和血液或正常組織標本，采用免疫組化、甲基化特異PCR、聚合酶鏈反應(PCR)、變性高效液相色譜分析(DHP

11、LC)和直接測序法對E-cadherin基因進行蛋白、啟動子甲基化和體細胞和胚系突變的全基因篩查。
　　 結果：免疫組化檢測7個患者E-cadherin基因蛋白表達陰性，1個表達明顯下調；6個患者腫瘤組織標本表現(xiàn)為啟動子甲基化，5個患者在腫瘤組織標本中發(fā)現(xiàn)了6個突變，包括兩個同義突變和4個錯義突變，而在正常組織未發(fā)現(xiàn)同樣的種系突變：4個患者表現(xiàn)為既有體細胞突變又有啟動子甲基化現(xiàn)象，2個患者僅表現(xiàn)為啟動子甲基化，1個患者僅發(fā)現(xiàn)體細

12、胞突變，1個患者既沒有體細胞突變也沒有啟動子甲基化現(xiàn)象。
　　 結論：
　　 1.E-cadherin種系突變在我國家族遺傳性胃癌中可能并不常見，。
　　 2.E-cadherin基因的體細胞突變和啟動子甲基化可能是導致家族性胃癌患者E-cadherin基因的下調的主要原因：可能還有其他的分子途徑參于E-cadherin基因的下調機制。
　　 第四部分胃癌家族遺傳性的研究
　　 目的：檢測30例伴

13、家族史胃癌和8例遺傳性胃癌家系患者的E-鈣粘附素基因(E-cadherin)的蛋白表達和啟動子甲基化及胚系突變情況，探討E-cadherin基因在我國家族性遺傳性胃癌中的意義。
　　 方法：采用免疫組織化學、甲基化特異性PCR(MS-PCR)、變性高效液相色譜技術(DHPLC)和直接測序法對30例伴家族史胃癌和8例符合家族遺傳性胃癌篩選標準(ICG-HGC)的患者的血液或正常組織標本的E-cadherin基因進行檢測。
　

14、　 結果：16例伴胃癌家族史胃癌腫瘤組織標本E-cadherin陰性表達，遺傳性胃癌腫瘤標本E-cadherin基因7個表達陰性，1個表達明顯下調；伴胃癌家族史胃癌19例和遺傳性胃癌6例標本表現(xiàn)為啟動子甲基化。在30例伴家族史胃癌中2例患者發(fā)現(xiàn)了3個同義突變，而在遺傳性胃癌的中未發(fā)現(xiàn)E-cadherin種系突變。
　　 結論：
　　 1.我國家族遺傳性胃癌中E-cadherin種系突變可能并不常見，或有其它遺傳易感基因