胡蘿卜daucuscarota.l.細(xì)胞外周糖蛋白結(jié)構(gòu)及翻譯后修飾的研究

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文胡蘿卜（Daucus carota.L.）細(xì)胞外周糖蛋白結(jié)構(gòu)及翻譯后修飾的研究姓名：商承偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)指導(dǎo)教師：談建中;平野久2002.5.1胡蘿b ( D a u c l l s 州，o l a ．L ．) 細(xì)胞外周糖蛋白結(jié)構(gòu)及翻譯后修飾的研究 A b s t r a c lT h e c h a r a c t e r i z a t i o na n d p o s t —t r a

2、 n s l a t i ‘o n a lm o d i f i c a t i o no f E D G P f r o mc a r r o t ( D a u c u s c a r o t aL ．)A b s t r a c tE x t r a c e l l u l a l d e l ‘r e a l g l y c o p r o t e i n r E D G P ) ．1 V i t ha p p a r e n

3、t m o l e c u l a r n i e i g h t o f5 7 0 0 0o nS D S —I ’A G I | 1 ．i s e o n s t i t u l e d o ft w o p lv a l u e so f88 a n d9 5 w i t h s i m i l a ra m i n o a c i d c o m p o s i t i o n E D G I ’Ⅵa s p u r i f i

4、 e d b 3 7 c h r o l l l a t o g r a p h y a n dt i n o l l l a l o f ~ 0 吼l s s m g f i ' o m t h ea m n l o n i u ms u l f i d e —p r e c i p i t a t i o n o fc a r l o t e e l l ( D t l u t 。I I VC H I 帆，L ) S t l

5、 S p C l l s i o n c t f l t u r e m e d i u mw i t h 2 , 4 - d i c l l l o r o p l l e n o x y a c e t i c a c i d 1 ’1 1 cp t u i f l e d p r o t c i l l 、、a s i d e n t i f l e d a s E 1 ) G 1 ’b 3 7 m a t r i x —a s

6、s i s t e d l a s e l ’d e s o r p t i o n ／i o n i z a t i o n t i m e o ff l i g h ! m a s s s p e c t r o m e t r 3 ’( M A ID I - T O F ．M S ) a n d M S —F i t ．a(chǎn)p e p t i d e m a s s f i n g e r p r i n t i n g t o o

7、 l o n t h e I i l t e r n c [ B j ’e l e c t r o s p r a 3 m a s ss p e c t l 0 1 1 1 e l l ‘州j s l —M S ) ．t h e a c c t l r a l e i n o l e c u l a r 、、’e i g h t o t ’E D G l ’、、a sd e t m m i n e da st i l e f o l l

8、 o w i n g ：4 8 1 1 9D a ．4 8 2 8 2I ) a ．4 8 4 7 9 1 ) a ．a(chǎn) n d 4 8 7 0 5 D a T h e a m i n oa c i ds e q u e n c eo f E r ) ( i Pd e d u c e df r o mt h e1 1 U C l e o t i d c ss e q u e n c ew a sn 1 1 _ ／h e r c o n

9、f i r m e db 3M A I 。I ) 1 - ' I 、0 F —M S I n M A I ．D 1 一T O F M a s s s p e c h a o fE D G Pt r y ，p l i c d i g e s t s ．t i l el b l l o ＼、i n g p e p t i d c ss e q u e n c eW e r eo b s e l 、，e d ：T 1 ．I ’2 ．T

10、 3 ．7 1 “ 4 ．1 1 5 ．’F 8 ．丁9 ．1 、1 0 ．’’1 I 1 ．I 1 2 ．J 】5 ．，1 19 ．1 2 t ) ．1 “ 2 1 ．T 2 3 ．1 “ 2 5a n d 1 “ 2 6 1 1 1 t h ea n l i n oa c i d s e q k l e l l C e o l 、} ? 1 ) G P ．t h e f i l ‘s t 2 0 1 ．c s i d u e s b

11、 e l o n g t O s i g n a l p e p t i d e ．a(chǎn) n d t h e N —t e r m i n a l g l u t a m i n e 、、a sm o d i t i e db y ’P 3 ～1 0 9 l u t a m i c a c i d l h e t l 2 a l c 1 1 p o l e n t i a l p h o s p h o r y ，l a t i o n

12、s i t e s i n E I ) G I ’．S C ＼’e l l o ft h e m ．I1 ．T 5 ．11 1 ，1 、15 ．1j 9 ．T 2 3 ．a(chǎn) n d 1 2 5 ．1 l a s b e e n f o u n d U O I t o , b ep h o s p h o r 5 ’l a t c dI l v c a s c o n f i l i l l e d t h a t t h e r e i

13、 S n ( ’1 1 e e c 、，s l e i n e i I I F D G P b x ，f l u o l C S C e l l C e p r o b em e t h o d D e t m r u i n a t i o n o ，。p e p t i d em a p p i n gn i i t ha n du ’i t h o u tr e d u c i n ga g e n tf o l l o w e

14、db y ’M A I ，1 ) 1 - T ( ) 1 ．M Si n d i c a t e dt h a t t i l ec y ，s t e i n e7 0i S l i n k e d 、v i t ht h ec 3 ，s t e i n e 1 5 8b 、d i S H l f i d eb o n dK e ) ’、’o r a l s ：( 1 a 1 1 ．O t ．E x t r a c e l l u l

15、md e r m a l9 1 5 7 c o p r o t e i n ( E I ) G I ’1( 1 h m a c t e l ’i z a t i o n ．P o s t ．t l + a n s l a t i o n a lm o d i f i c a t i o nA u t h o r ：S h a n g C h e n g w e iD i r e c t e db 、，：’l ' a n , l