昆侖雪菊多酚提取物對D-GalN-LPS誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護作用研究.pdf

1、昆侖雪菊（Coreopsis tinctoria）是一種生長在昆侖山海拔3000 m以上高寒地區(qū)的菊科類植物，是目前新疆地區(qū)唯一能與天山雪蓮齊名的稀有高寒野生植物。研究發(fā)現(xiàn)，雪菊富含蛋白質(zhì)、多糖、皂苷、酚類等多種營養(yǎng)物質(zhì)，具有抗氧化、降血壓、降血糖、降血脂、抗炎、抗菌、抗凝血等生理活性，但目前關(guān)于雪菊保肝作用還未見報道。因此，本論文以昆侖雪菊（朵菊、胎菊）為原料，通過80％冷凍丙酮溶劑提取其多酚化合物，采用 HPLC法對多酚組成進行定性

2、定量分析，再通過 DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、鐵還原力、氧自由基吸收能力（ ORAC）等方法進行抗氧化活性評價；以 D-氨基半乳糖/脂多糖（ D-GalN/LPS）誘導(dǎo)的急性肝損傷 KM小鼠為模型，研究昆侖雪菊（朵菊、胎菊）多酚提取物對急性肝損傷的保護作用及分子機制。主要研究結(jié)果如下：
　?。?）朵菊游離酚、結(jié)合酚、總酚含量分別為125.427、3.896、129.323 mg GAE/g DW；胎菊游離酚、結(jié)合酚

3、、總酚含量分別為99.197、6.483、105.700 mg GAE/g DW；游離酚是朵菊和胎菊酚類化合物的主要存在形式，胎菊中結(jié)合酚的貢獻率是朵菊結(jié)合酚的2倍。朵菊和胎菊多酚中共鑒定出9種單體酚，包括4種酚酸、4種黃酮、1種芪類化合物，游離酚主要由綠原酸、咖啡酸、香草醛、葒草素、蘆丁、金絲桃苷、白藜蘆醇、山奈酚組成，其中金絲桃苷、蘆丁、葒草素含量較高；結(jié)合酚主要由原兒茶酸、咖啡酸、香草醛、葒草素、蘆丁、金絲桃苷組成，其中金絲桃苷、

4、咖啡酸含量較高。
　?。?）昆侖雪菊多酚提取物具有一定的抗氧化活性。朵菊游離酚和結(jié)合酚清除DPPH自由基EC50值分別為20.308、25.520μg/mL，胎菊游離酚和結(jié)合酚清除DPPH自由基 EC50值分別為23.207、24.194μg/mL。朵菊游離酚和結(jié)合酚清除ABTS+自由基 EC50值分別為0.375、0.257μg/mL；胎菊游離酚和結(jié)合酚清除ABTS+自由基 EC50值分別為0.359、0.270μg/mL。朵菊

5、游離酚和結(jié)合酚鐵還原力EC50值分別為62.689、41.214μg/mL；胎菊游離酚和結(jié)合酚鐵還原力EC50值分別為67.544、48.447μg/mL。朵菊游離酚和結(jié)合酚 ORAC值分別為1534.867、110.994μmol TE/g DW；胎菊游離酚和結(jié)合酚ORAC值分別為1394.666、268.896μmol TE/g DW。
　?。?）昆侖雪菊多酚提取物對 D-GalN/LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清指標有一定的影

6、響。與模型組相比，朵菊高低劑量組（150、600 mg/kg·d）和胎菊高低劑量組（150、600 mg/kg·d）中血清 AST、MDA水平顯著降低（P＜0.05），血清SOD、CAT、GSH水平顯著升高（ P＜0.05）；朵菊多酚高低劑量組（150、600 mg/kg·d）和胎菊多酚高劑量組（600 mg/kg·d）中血清 ALT水平顯著降低（P＜0.05）。
　　（4）昆侖雪菊多酚提取物對 D-GalN/LPS誘導(dǎo)的急性肝損

7、傷小鼠肝臟指標有一定的影響。與模型組相比，朵菊高低劑量組（150、600 mg/kg·d）和胎菊高低劑量組（150、600 mg/kg·d）中肝臟 ALT、AST、MDA水平顯著降低（P＜0.05）、肝臟 GSH水平顯著升高（P＜0.05）；胎菊高劑量組中（600 mg/kg·d）肝臟 SOD水平顯著升高（ P＜0.05）；朵菊高劑量組（600 mg/kg·d）和胎菊高劑量組中（600 mg/kg·d）肝臟CAT水平顯著升高（P＜0.0

8、5）。
　?。?）昆侖雪菊多酚提取物對D-GalN/LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠肝臟中Nrf2、PPARα、PPARγ mRNA水平和蛋白表達的影響。與模型組相比，朵菊低劑量組（150 mg/kg·d）能顯著促進Nrf2、PPARγmRNA的水平，上調(diào)PPARγ蛋白的表達（P＜0.05）；胎菊低劑量組（150 mg/kg·d）能顯著促進PPARα、PPARγmRNA的水平，上調(diào) Nrf2、PPARα、PPARγ蛋白的表達（ P＜0.

9、05）；朵菊高劑量組（600 mg/kg·d）和胎菊高劑量組（600 mg/kg·d）都能顯著促進 Nrf2、PPARα、PPARγmRNA的水平，上調(diào)Nrf2、PPARα、PPARγ蛋白的表達（P＜0.05）。
　　綜上所述，昆侖雪菊富含酚類化合物，并具有較強的抗氧化活性；昆侖雪菊多酚提取物對 D-GalN/LPS誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷有一定的保護作用，其作用機制可能是通過激活 Nrf2/ARE信號通路抑制機體氧化應(yīng)激反應(yīng)和通過激