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文檔簡介
1、量子點(diǎn)(QuantumDots, QDs)是一種新型的納米材料,具備優(yōu)良的性能。但QDs由于尺寸小、比表面積大等特點(diǎn),進(jìn)入機(jī)體之后,會擁有產(chǎn)生活性氧分子的能力,引起機(jī)體的損傷。抗氧化系統(tǒng)是機(jī)體的防御系統(tǒng),擁有消除活性氧分子的能力,使機(jī)體免遭損害。酶系抗氧化系統(tǒng)是抗氧化系統(tǒng)重要組成部分,研究QDs與抗氧化酶的相互作用對于我們了解和評價(jià)QDs的生物毒性具有積極的意義。
因此,本研究以應(yīng)用較多的CdTe QDs為研究對象,以過氧化氫
2、酶(Catalyse, CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)為抗氧化系統(tǒng)的代表性酶,利用CdTe QDs自身的熒光性能和分子間相互作用所產(chǎn)生的微量熱泳動(dòng)特征,通過熒光光譜法和微量熱泳動(dòng)法研究了其與兩種抗氧化酶的相互作用以及對酶活性的影響,所獲結(jié)果對于QDs生物毒性的評價(jià)和機(jī)理研究具有一定的參考意義和價(jià)值,研究的具體內(nèi)容如下:
1巰基乙酸(TGA)修飾的CdTe QDs(TGA-CdTe
3、QDs)與CAT的相互作用及其對酶活的影響研究
利用水相回流法合成了TGA-CdTe QDs,通過控制回流時(shí)間(4 h,5 h和6 h)制得了不同粒徑的TGA-CdTe QDs(粒徑范圍1~4 nm)。利用TGA-CdTe QDs自身的熒光特性和相互作用過程的熱泳特性,分別采用熒光光譜法和微量熱泳動(dòng)法研究了 TGA-CdTe QDs與 CAT的相互作用。探討了粒徑大小和介質(zhì)環(huán)境(pH6.4,7.4,8.4)對二者相互作用的影響
4、,計(jì)算了二者相互作用的結(jié)合常數(shù),解離常數(shù)以及相互作用的熱力學(xué)參數(shù)。研究表明,在pH7.4下,二者以氫鍵和范德華力相結(jié)合,相互作用的大小隨粒徑的增大而增大;相互作用強(qiáng)弱隨pH的增大而減小。利用CAT對過氧化氫的催化作用,構(gòu)建了CAT活性測定的方法體系,研究了TGA-CdTe QDs對CAT酶活的影響。研究表明,TGA-CdTe QDs對CAT酶活的抑制效應(yīng)隨粒徑的增大而增大,對酶活的抑制程度在pH6.4時(shí)最大。
2 TGA-Cd
5、Te QDs與SOD的相互作用及其對酶活的影響研究
利用上述合成的TGA-CdTe QDs,分別采用熒光光譜法和微量熱泳動(dòng)法研究了TGA-CdTe QDs與SOD的相互作用。探討了粒徑大小和介質(zhì)環(huán)境(pH=6.4,7.4,8.0)對二者相互作用的影響,計(jì)算了二者相互作用的結(jié)合常數(shù),解離常數(shù)以及相互作用的熱力學(xué)參數(shù)。研究表明,在pH7.4下,二者以氫鍵和范德華力相結(jié)合。在研究的粒徑范圍內(nèi),相互作用的大小隨粒徑的增大而增大;相互作
6、用強(qiáng)弱隨pH的增大而減小。利用氮藍(lán)四唑(NBT)對 SOD的還原作用,構(gòu)建了SOD活性測定的方法體系,探討了TGA-CdTe QDs對SOD酶活的影響,合成時(shí)間為5 h的TGA-CdTe QDs對SOD酶活的抑制效應(yīng)最大,pH對酶活的抑制程度較大影響,在pH為8.0時(shí),對CAT酶活的抑制程度最大。
3半胱胺(CA)修飾的CdTe QDs(CA-CdTe QDs)與CAT的相互作用及其對酶活的影響
利用水相回流法合成了
7、CA-CdTe QDs,通過控制回流時(shí)間(4 h,5 h和6 h)制得了不同粒徑的CA-CdTe QDs(粒徑范圍1~4 nm)。分別采用熒光光譜法和微量熱泳動(dòng)法研究了CA-CdTe QDs與CAT的相互作用。探討了粒徑大小和介質(zhì)環(huán)境(pH6.4,7.4,8.0)對二者相互作用的影響,計(jì)算了二者相互作用的結(jié)合常數(shù),解離常數(shù)以及相互作用的熱力學(xué)參數(shù)。研究表明,在pH7.4下二者以疏水作用相結(jié)合,相互作用的大小隨粒徑的增大而增大;相互作用的
8、介質(zhì)環(huán)境對相互作用具有較大影響,pH為8.0時(shí),二者相互作用最強(qiáng)。利用CAT對過氧化氫的催化作用,構(gòu)建了CAT活性測定的方法體系,研究了CA-CdTe QDs對CAT酶活的影響。研究表明,合成時(shí)間為5 h的CA-CdTe QDs對CAT酶活的抑制最大,pH對酶活抑制程度也有較大影響,在pH為8.0時(shí),CA-CdTe QDs對CAT活性抑制作用最大。CA-CdTe QDs對CAT酶活的抑制程度與二者相互作用的強(qiáng)弱相一致。4 CA-CdTe
9、 QDs與SOD的相互作用及其對酶活影響研究
利用上述合成的 CA-CdTe QDs,分別采用熒光光譜法和微量熱泳動(dòng)法研究了CA-CdTe QDs與SOD的相互作用。探討了粒徑大小和介質(zhì)環(huán)境(pH=6.4,7.4,8.0)對二者相互作用的影響,計(jì)算了二者相互作用的結(jié)合常數(shù),解離常數(shù)以及相互作用的熱力學(xué)參數(shù)。研究表明,在模擬人體pH環(huán)境條件下,二者以氫鍵和范德華力相結(jié)合。在研究的粒徑范圍內(nèi),相互作用的大小隨粒徑的增大而增大,相互
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