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1、熒光偏振分析方法特別適用于研究分子之間的相互作用,比如核酸結(jié)構(gòu)變化與蛋白酶活性研究、藥物動(dòng)力學(xué)分析,同時(shí)由于其分析過程具有均相性、安全性的優(yōu)點(diǎn),又廣泛用于免疫分析、高通量篩選、活細(xì)胞成像等研究。熒光偏振分析所需的樣品量少,重復(fù)性好,靈敏度高,操作簡(jiǎn)單,受到研究人員的高度重視。國外在該技術(shù)領(lǐng)域研究起步早,已有商業(yè)化產(chǎn)品,而國內(nèi)對(duì)熒光偏振分析儀的研究較為匱乏。
本文面向細(xì)菌、毒素等的快速檢測(cè)需要,對(duì)熒光偏振分析儀的基本原理、光路設(shè)
2、計(jì)、信號(hào)采集與處理以及實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,為高性能熒光偏振分析儀的研制奠定基礎(chǔ)。
論文主要研究工作為:
①調(diào)研了熒光偏振分析儀的研究背景和國內(nèi)外研究現(xiàn)狀。詳細(xì)分析了熒光偏振的基本原理及其量化關(guān)系,以及熒光偏振分析方法在免疫分析中的廣泛應(yīng)用,設(shè)計(jì)了儀器整體方案。
?、谘芯苛藷晒馄穹治鰞x光學(xué)系統(tǒng),設(shè)計(jì)了旋轉(zhuǎn)偏振片方案。使用中心波長(zhǎng)為475nm的藍(lán)光LED作為激發(fā)光源,激發(fā)光經(jīng)過準(zhǔn)直、濾波、偏振后,聚焦于待
3、測(cè)異硫氰酸熒光素標(biāo)記試劑。熒光素受激發(fā)后產(chǎn)生的熒光出射光通過探測(cè)光路最終聚焦于光電倍增管陰極,產(chǎn)生正比于熒光強(qiáng)度的電流信號(hào)輸出。
③設(shè)計(jì)了系統(tǒng)硬件電路,研究了光電倍增管外圍電路、系統(tǒng)測(cè)量控制電路以及步進(jìn)電機(jī)模塊。FPGA完成系統(tǒng)控制功能,USB負(fù)責(zé)上位機(jī)和下位機(jī)之間的雙向通信。
?、芨鶕?jù)系統(tǒng)需求,完成了FPGA硬件邏輯和USB固件的編程,使用C#編寫了上位機(jī)軟件,實(shí)現(xiàn)信號(hào)的讀取顯示、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)與處理等。
?、荽罱?/p>
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