焦化廢水中降酚菌的分離分析及降酚基因初步研究.pdf

1、本文對(duì)24株降酚菌運(yùn)用16S rRNA基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的限制性酶切分析、ERIC-PCR指紋圖譜分析、多組分苯酚羥化酶大亞基基因的PCR擴(kuò)增及16S rRNA基因測序的方法對(duì)這些降酚菌株進(jìn)行基因型分析。通過ARDRA分型，將24株降酚菌分為8個(gè)類型；利用ERIC-PCR可以將這24株降酚菌分為17種類型，說明同一ARDRA類型的菌株具有多樣性。對(duì)17個(gè)ERIC類型代表菌株的16S rRNA基因擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行克隆并測序。在24株降酚菌中，

2、19株在苯酚含量為200mg/l的MP培養(yǎng)基中培養(yǎng)五天，苯酚降解率為20％左右；其余5株Rhodococcus屬菌株苯酚降解率達(dá)到100％。 由于另一株降酚菌株用苯酚羥化酶基因特異引物擴(kuò)增不出目的條帶，因此本研究對(duì)該菌株的苯酚降解相關(guān)基因進(jìn)行了突變分析。通過mini-Tn5轉(zhuǎn)座突變，得到29株突變菌株。碳源生長實(shí)驗(yàn)表明，所有的突變菌株都失去了在以苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長的能力，部分突變菌株也失去了在以甘露醇、麥芽糖、苯甲酸為唯一碳