2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)是原癌基因c-erbB1的表達(dá)產(chǎn)物,是表皮生長因子受體(Human EGF receptor,HER)家族成員之一,屬于I型跨膜酪氨酸激酶受體。廣泛分布于哺乳動物上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞表面。EGFR在生理?xiàng)l件下,其通過調(diào)節(jié)細(xì)胞分化及細(xì)胞形態(tài)在組織生長及發(fā)育過程中起重要作用。然而,在許多實(shí)體腫瘤中存在EGFR的高表達(dá)或異常

2、表達(dá),如膠質(zhì)瘤、皮膚癌、腎癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌。此外,EGFR過度表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及細(xì)胞凋亡的抑制有關(guān)。EGFR高表達(dá)還與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放療耐受性有關(guān),抑制EGFR可以增加膠質(zhì)母細(xì)胞瘤放療敏感性。因此,EGFR已成為研究重要的靶點(diǎn)之一。目前抗EGFR的藥物包括 EGFR單克隆抗體西妥昔單抗(Cetuximab)及蛋白激酶抑制劑吉非替尼(Gefitinib)。由于兩者均屬于蛋白類,其化學(xué)修飾困難及強(qiáng)

3、免疫原性,限制其使用及效果。核酸適體是經(jīng)配體指數(shù)富集系統(tǒng)進(jìn)化(Systematic Evolution of Ligands by Exponential enrichment,SELEX)技術(shù)篩選出的能特異結(jié)合蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)的寡聚核苷酸片段,具有比抗體更好的化學(xué)性質(zhì),與各種大小分子具有高選擇性和高親和力,此外,還具有無毒性、無免疫原性等優(yōu)點(diǎn),這使得在蛋白質(zhì)研究中顯示出很好的作用,特別是在檢測腫瘤生物標(biāo)志物研究中。通過SELEX技術(shù)可

4、以簡便且快速獲得高特異性及高親和力的核酸適體,在生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床診斷與治療方面顯示出巨大的應(yīng)用前景。目前血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)核酸適體作為藥物已經(jīng)過FDA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床,治療年齡相關(guān)性黃斑變性。EGFR RNA核酸適體已篩選出,但由于RNA核酸適體很容易被核酸酶降解,及篩選過程復(fù)雜及費(fèi)用昂貴,限制其使用。而DNA核酸適體具體穩(wěn)定、不易被核酸酶降解、易于合成、費(fèi)用低廉、易儲存的特點(diǎn),更具有更廣闊的應(yīng)用空間。本實(shí)驗(yàn)組選擇單鏈D

5、NA核苷酸作為初始庫進(jìn)行EGFR核酸適體的篩選。
  本文用重組EGFR(胞外區(qū))為靶蛋白,Ni磁珠作為反篩蛋白,以76個堿基隨機(jī)單鏈DNA寡核苷酸庫作為初始庫,經(jīng)過11輪篩選,獲得22條與靶蛋白EGFR-磁珠高特異性和高親和力的DNA核酸適體。對第11輪庫進(jìn)行解離常數(shù)(Kd)的測定,測得Kd=107±26 nM,而對照初始庫與靶蛋白基本不結(jié)合。其中,選擇其中一條核酸適體命名為TuTu22,并將篩選出的核酸適體TuTu22與EGF

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