裂壺藻MYA-1381培養(yǎng)條件優(yōu)化及藻油DHA抗肥胖的初步研究.pdf

1、DHA，二十二碳六烯酸，是至今為止發(fā)現(xiàn)的碳鏈最長的一種長鏈多不飽和脂肪酸，是一種人體自身不能合成且必須額外補(bǔ)充的必需脂肪酸。DHA在人體中主要分布在大腦皮層、視網(wǎng)膜、心肌、母乳等處，具有諸多重要的生理功能，例如，攝入DHA可以大大的降低患上心血管疾病、關(guān)節(jié)炎、心律不齊、哮喘和血脂代謝等慢性疾病的概率。DHA提取純化的傳統(tǒng)方法主要來源于海洋魚類。隨著DHA的生理功能的不斷發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致DHA的需求量越來越大，然而傳統(tǒng)來源遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能夠滿足市場的需

2、求。研究表明，魚類體內(nèi)的DHA源于其食物鏈最底層的食物海洋微生物。目前，通過海洋微生物發(fā)酵生產(chǎn)DHA已經(jīng)成為研究的熱門。
　　目前發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于生產(chǎn)的富含DHA的海洋微藻并不多，裂壺藻是最理想的工業(yè)化生產(chǎn)DHA的藻株。裂壺藻（Schizochytrium limacinum）是一種的真核海洋微藻，營養(yǎng)方式為異養(yǎng)兼自養(yǎng)，生長繁殖速度快，生命力旺盛，可抵御不良生活環(huán)境，對營養(yǎng)物質(zhì)條件要求不高，主要依靠碳源、氮源和無機(jī)鹽生長，藻粉和藻油D

3、HA對人體安全、無毒副作用。但是，裂壺藻工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)還存在諸多問題有待解決。
　　本文中，我們對裂壺藻MYA-1381藻種進(jìn)行了純化、保藏，初步研究了裂壺藻的基本生長特性和培養(yǎng)條件，如培養(yǎng)基的pH、溫度、種齡和接種量等對其生長的影響，為了更經(jīng)濟(jì)高效的提高裂壺藻的生物量和DHA產(chǎn)量，通過單因素法對培養(yǎng)基中四種組分葡萄糖、酵母粉、玉米漿、海鹽的濃度優(yōu)化，得到了培養(yǎng)基最佳添加濃度和培養(yǎng)時間，然后進(jìn)一步采用Box-Behnken Des

4、ign優(yōu)化方法優(yōu)化培養(yǎng)基組分配比。最后得到了利于裂壺藻生物量和DHA積累的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基初始pH為6.5，裝液量為100/250 mL，接種量10％，培養(yǎng)溫度25℃，搖床轉(zhuǎn)速170 rpm/min，培養(yǎng)基組分分別是葡萄糖52.68 g/L、酵母粉8.78 g/L、玉米漿5.48 g/L、海鹽18.40 g/L，培養(yǎng)時間為96 h，生物量達(dá)到14.25 g/L，DHA含量可達(dá)133.60 mg/g。
　　同時，我們還初步研

5、究了裂壺藻藻油DHA的生理功能——減緩高脂飲食誘導(dǎo)小鼠肥胖的作用。以C57BL/6J小鼠作為研究對象，從體重及相關(guān)組織重量、血清相關(guān)指標(biāo)、肝組織形態(tài)及肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因等方面分析比較不同純度DHA的裂壺藻藻油對高脂飲食小鼠的影響，并以常規(guī)飲食和市售魚油為對照。研究發(fā)現(xiàn)，不同純度DHA藻油從早期就能防止體重增加，而魚油在處理后期才顯示較好的效果;同時藻油和魚油均可有效預(yù)防高脂飲食誘導(dǎo)的體重增加和腹部脂肪積累，小鼠中血清TG和TC的水平顯