多室電泳分離系統(tǒng)的構(gòu)建及其在蛋白質(zhì)和小分子分離中的應(yīng)用.pdf

1、研究蛋白質(zhì)和小分子相互作用研究，對于藥理學(xué)、新藥開發(fā)、生物標志物識別、臨床診斷、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)具有非常重要的作用。然而，蛋白質(zhì)和小分子的分離在蛋白質(zhì)和小分子相互作用研究中具有重要的作用。但是現(xiàn)有的方法存在費時、費力等缺點。
　　本文構(gòu)建了一種能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)和小分子分離的新型電泳分離系統(tǒng)，即多室電泳分離系統(tǒng)。介紹了多室電泳分離系統(tǒng)的各個組成部分，即循環(huán)系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、冷凝系統(tǒng)、供電系統(tǒng)。同時對影響電泳分離效果的各個因素進行了優(yōu)化

2、，其中包括：電壓、電泳時間、緩沖溶液的濃度、膜的選擇等。當施加電壓8 V，電泳時間15 min（5 min/次），緩沖溶液為10mM磷酸緩沖溶液（pH=7.2），膜為0.2m醋酸纖維素膜和10KD聚醚砜超濾膜時，我們得到了最好的分離效果。在最佳條件下，90％以上的蛋白質(zhì)在電場力的作用下從樣品槽移動到接收槽，與電中性的游離小分子分離開。而后我們使用反相高效液相色潽法分別對蛋白質(zhì)和中性小分子進行檢測。實驗結(jié)果表明，該分離系統(tǒng)能夠有效的分離蛋