PEO-b-P4VP用于毛細管電泳分離蛋白質的研究.pdf

1、毛細管電泳(CE)作為一種強有力的分析技術，在生物工程、醫(yī)學藥物和食品檢測等生命科學和化學所涉及的領域都顯示了極其重要的應用前景，由于CE的理論分離柱效與樣品組分擴散系數(shù)成反比，使其在生物大分子(如蛋白質和核酸)的分離方面應用比較廣泛。但由于毛細管內表面的硅羥基電離(pH>3)形成帶負電的吸附點，使管壁對生物大分子尤其是堿性蛋白質產生強烈的吸附，導致峰拖尾、峰形展寬、分離效率與遷移時間的重復性下降，甚至形成不可逆吸附使分離無法進行。

2、 目前，人們通常采用極端pH、添加劑、外加徑向電場和聚合物涂層等幾種方法來抑制蛋白質在管壁的吸附。極端pH和添加劑的方法會降低分離選擇性甚至引起蛋白質變性；外加徑向電場又需要特殊的儀器裝置：聚合物涂層方法穩(wěn)定、高效，是解決此問題的有效途徑之一。毛細管涂層的形成大致可分為三類：動態(tài)涂覆，化學鍵合和物理吸附。其中，動態(tài)涂覆方法最簡單，但是穩(wěn)定性差：化學鍵合涂層穩(wěn)定性較好但制作工藝麻煩；物理吸附方法既簡便易行又具有較高穩(wěn)定性，并且涂層可再

3、生，因而備受親睞。已用于化學鍵合方法改性毛細管壁的聚合物包括聚丙烯酰胺(PAM)，聚乙烯醇(PVA)，聚乙二醇(PEG)，聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)等：通過物理吸附方法改性毛細管壁的聚合物包括聚乙烯醇(PVA)，聚環(huán)氧乙烷(PEO)，聚醚(PEO-PPO-PEO三嵌段共聚物)，聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)，聚羥乙基丙烯酰胺(PHEA)，聚氨基葡萄糖(Chitosan)，聚乙烯亞胺(PEI)等。 本論文通過原子轉

4、移自由基聚合(AXRP)方法合成了兩嵌段聚合物聚(乙二醇-4-乙烯基吡啶)(PEO-b-P4VP)，并將其作為毛細管電泳分離堿性蛋白質的涂層，取得了較好效果，具體研究內容包括以下幾個方面： 一、將聚N，N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)作為物理吸附的涂層，研究了毛細管預處理過程對電滲流及堿性蛋白質分離的影響，優(yōu)化了分離條件。 二、通過ATRF方法合成了一組不同分子量的PEO-b-P4VP嵌段聚合物，并用核磁(NMR)、體積排