激素、肽類的毛細(xì)管電泳分離研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳(CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(HPCE)或毛細(xì)管電分離法(CESM)，是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力、依據(jù)樣品各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的高效、高選擇性的新型液相分離分析技術(shù)。該方法具有高效、快速、自動(dòng)化程度高、試劑消耗少、環(huán)境污染小等優(yōu)點(diǎn)，在十幾年的時(shí)間中，特別是在最近幾年，受到分離分析科學(xué)家的極大關(guān)注，成為生物化學(xué)和分析化學(xué)中最受矚目，發(fā)展最快的分離分析新技術(shù)之一。 激素(hormo

2、ne)音譯為荷爾蒙，就是高度分化的內(nèi)分泌細(xì)胞合成并直接分泌入血的化學(xué)信息物質(zhì)，它通過調(diào)節(jié)各種組織細(xì)胞的代謝活動(dòng)來影響人體的生理活動(dòng)。激素的分泌量均極微，為毫微克(十億分之一克)水平，但其調(diào)節(jié)作用極其明顯。研究激素不僅可了解某種激素對(duì)動(dòng)物和人體的生長、發(fā)育、生殖的影響及致病的機(jī)理，還可利用測(cè)定激素來診斷疾病。肽(peptide)是氨基酸通過肽鍵彼此連結(jié)而成的小分子化合物，一般都由L型僅α-氨基酸組成，是生物體內(nèi)一類重要的活性物質(zhì)。肽類物質(zhì)

3、具有極強(qiáng)的活性和多樣性，是世界生物學(xué)界、醫(yī)學(xué)界、藥學(xué)界研究開發(fā)的熱點(diǎn)，生物活性肽將在世界范圍內(nèi)引起關(guān)注。 激素、肽類物質(zhì)是生命有機(jī)體的重要組成部分，使用毛細(xì)管電泳分離手段對(duì)它們進(jìn)行研究，對(duì)醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生等領(lǐng)域的發(fā)展創(chuàng)新都具有重要意義。由于大多數(shù)肽類物質(zhì)沒有或只有很弱的紫外吸收，直接紫外檢測(cè)滿足不了低含量組分測(cè)定的要求。衍生試劑的研究和應(yīng)用不僅可以克服儀器分析方法在某些方面的局限性，而且在化學(xué)方法的分離、富集和檢測(cè)中都起著重要的

4、作用。目前廣為應(yīng)用的衍生試劑主要有9-芴甲氧羰基氯(FMOC)、鄰苯二甲醛(OPA)和5-二甲氨基萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)等。但是這些衍生試劑本身的一些特性決定了其應(yīng)用的局限性。為此，本文采用新型衍生化試劑，改變被測(cè)化合物的特性，進(jìn)行了肽類物質(zhì)的毛細(xì)管電泳的分離，結(jié)果令人滿意。 論文分三章： 第一章： 簡單介紹了毛細(xì)管電泳的發(fā)展及其在藥物分析、生物分子分離、基因工程研究、臨床醫(yī)學(xué)等各方面的應(yīng)用，并對(duì)毛細(xì)管電

5、泳分離被分析物的策略及其相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)行了闡述。 第二章： 四種激素類物質(zhì)的毛細(xì)管電泳分離研究，采用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜模式對(duì)睪酮、皮質(zhì)酮、皮質(zhì)醇、孕酮等四種激素類物質(zhì)進(jìn)行了分離，研究了影響分離的幾個(gè)關(guān)鍵條件，在22分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)了四種激素類物質(zhì)的基線分離。 第三章： 非水毛細(xì)管電泳對(duì)肽類衍生物的分離研究，包括兩部分： 3.1非水毛細(xì)管電泳對(duì)BCEC-CI二肽衍生物的分離研究，以2-(11H-苯[a]