氨基酸和二肽的毛細(xì)管電泳分離研究.pdf

1、高效毛細(xì)管電泳(HPCE)是在傳統(tǒng)電泳技術(shù)與色譜技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種強(qiáng)有力的分離技術(shù)。它具有高效、快速、樣品用量少等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)、生命科學(xué)、藥學(xué)、環(huán)境科學(xué)等各個領(lǐng)域。 毛細(xì)管電泳作為一種強(qiáng)有力的分離技術(shù)，已經(jīng)成功的分離了多種不同類型的化合物，尤其在氨基酸、肽、蛋白質(zhì)以及藥物的手性拆分領(lǐng)域應(yīng)用最廣，顯示了其獨特的優(yōu)勢。此外，電泳具有多種靈活變換的分離模式，方法開發(fā)較為容易，操作費用低。 當(dāng)前，在線的紫外檢

2、測仍是毛細(xì)管電泳中最為常用的一種檢測手段，但是由于大多數(shù)的氨基酸和肽沒有或只有很弱的紫外吸收，直接紫外檢測滿足不了低含量組分測定的要求。衍生試劑的研究和應(yīng)用不僅可以克服儀器分析方法在某些方面的局限性，而且在化學(xué)方法的分離、富集和檢測中起著重要的作用。目前廣為應(yīng)用的衍生試劑主要有9-芴甲氧羰基氯(FMOC)、鄰苯二甲醛(OPA)和5-二甲氨基萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)。但是這些衍生試劑本身的一些特性決定了其應(yīng)用的局限性。為此，本文采用

3、新型衍生化試劑，改變被測化合物的特性，進(jìn)行了氨基酸和二肽的毛細(xì)管電泳的分離，結(jié)果令人滿意。 論文分三章： 第一章： 簡單介紹了毛細(xì)管電泳的發(fā)展及其基本理論。綜述了毛細(xì)管電泳在手性物質(zhì)和生物分子如氨基酸和肽的分離分析中的應(yīng)用。 第二章： 氨基酸和二肽的毛細(xì)管電泳分離研究，包括兩部分：2.1采用新型衍生試劑1，2-苯并-3,4-二氫咔唑-9-乙基氯甲酸酯(BCEOC)作為柱前衍生試劑，利用毛細(xì)管電泳在

4、膠束電動模式下對氨基酸進(jìn)行了分離，考察試劑用于氨基酸分離的幾個關(guān)鍵條件，實現(xiàn)了14種氨基酸的快速基線分離。 2.2以咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)作為柱前衍生試劑，在膠束電動色譜模式下對16種二肽進(jìn)行了分離，研究了該試劑衍生的二肽物分離的幾個關(guān)鍵的條件，在14min內(nèi)實現(xiàn)了16種CEOC二肽衍生物的分離。 第三章： 氨基酸和二肽的手性拆分研究，包括兩部分：3.1以咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)作柱前衍生試

5、劑，在毛細(xì)管區(qū)帶電泳和膠束電動色譜條件下，以不同配比的β-環(huán)糊精(β-CD)和脫氧膽酸鈉(SDC)作手性選擇劑，在兩種不同分離模式下，對氨基酸衍生物進(jìn)行了手性分離，同時對分離過程中的相關(guān)參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，分別實現(xiàn)了8種和10種氨基酸的快速手性分離。 3.2采用咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)作為柱前衍生試劑，基于二元手性選擇劑的協(xié)同作用，在毛細(xì)管膠束電動色譜模式下對二肽類衍生物進(jìn)行了手性分離，優(yōu)化了手性選擇劑的組合配比、緩沖溶液