食品中人工合成色素的毛細(xì)管電泳分離檢測(cè)研究

1、食品中人工合成色素的毛細(xì)管電泳分離檢測(cè)研究蔣奕修謝天堯（中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院分析化學(xué)研究所廣東廣州510275）摘要建立了毛細(xì)管電泳電導(dǎo)法分離檢測(cè)食品中人工合成色素檸檬黃和日落黃的分析新方法.采用CZE模式以未涂層融硅石英毛細(xì)管（50cm50m）為分離柱10mmolLTris10mmolLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%四乙烯五胺為電泳運(yùn)行液分離電壓15.0kV檸檬黃和日落黃在11分鐘內(nèi)獲得基線(xiàn)分離.檢出限分別為9.81

2、0－7molL和1.1107molL.應(yīng)用于市售飲料中檸檬黃和日落黃的測(cè)定取得滿(mǎn)意結(jié)果.關(guān)鍵詞毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測(cè)食品分析合成色素檸檬黃日落黃1前言在食品中添加著色劑是為了改善食品的色澤增加人們的食欲同時(shí)也為了提高其價(jià)值食品著色劑可分為天然色素和人工合成色素人工合成色素色澤艷麗不易褪色價(jià)格低廉.食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品為原料經(jīng)過(guò)磺化、硝化、偶氮化等一系列有機(jī)反應(yīng)化合而成有的還含有β萘胺和α氨基萘酚等致癌物.近年來(lái)某些作為食品

3、添加劑的合成色素已證實(shí)具有慢性毒性可以導(dǎo)致生育力下降、畸胎等.有些色素在人體內(nèi)可能轉(zhuǎn)換成致癌物質(zhì).例如人造奶油著色的奶油黃已被證實(shí)可以導(dǎo)致人和動(dòng)物患上肝癌而其它種類(lèi)的合成色素如橙黃能導(dǎo)致皮下肉瘤、肝癌、腸癌和惡性淋巴癌等.目前國(guó)際國(guó)內(nèi)的食品安全監(jiān)督機(jī)構(gòu)已出臺(tái)了相應(yīng)的法規(guī)來(lái)嚴(yán)格控制其使用范圍和使用量.我國(guó)準(zhǔn)許使用的人工合成色素有11種.“蘇丹紅”事件的爆發(fā)正是國(guó)際社會(huì)對(duì)食品安全問(wèn)題高度重視的結(jié)果[14].因此建立靈敏、快速、簡(jiǎn)便的測(cè)定食品

4、中人工合成色素的分析新方法具有重要的學(xué)術(shù)研究意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值.目前報(bào)道的有關(guān)食品色素檢測(cè)的方法有:高效液相色譜法[5]導(dǎo)數(shù)分光光度法[6]示波極譜法[7]單掃描極譜法[8]伏安法[9]和TLC[10]等.尚未見(jiàn)采用高效毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測(cè)報(bào)道.本文采用毛細(xì)管電泳電導(dǎo)檢測(cè)以10mmolLTris10mmolLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%四乙烯五胺為電泳介質(zhì)CZE分離模式建立了同時(shí)測(cè)定日落黃、檸檬黃2種常見(jiàn)的人工合成色素（結(jié)

5、構(gòu)式如圖1所示）的分離分析新方法具有快速、簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)并應(yīng)用于市售飲料中上述成分的檢測(cè)取得較滿(mǎn)意的結(jié)果.基金項(xiàng)目:中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院第六屆創(chuàng)新化學(xué)實(shí)驗(yàn)與研究基金，基金編號(hào):200612作者簡(jiǎn)介:蔣奕修，中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院02級(jí)化學(xué)專(zhuān)業(yè)?通訊聯(lián)系人:謝天堯，Email:－HAc－TEPA、Tris－Cit－TEPA、Tris－H3BO3－TEPA、Tris－H3BO3－TEPA－EDTA等多種緩沖體系結(jié)果表明:以Tris－H

6、3BO3－TEPA－EDTA體系為運(yùn)行液基線(xiàn)平穩(wěn)分離度和靈敏度最佳其中四乙烯五胺作為電滲流抑制劑[11].在固定四乙烯五胺濃度為0.2%H3BO3濃度為10mmolL的前提下通過(guò)加入Tris（2～15mmolL）來(lái)調(diào)節(jié)緩沖溶液的pH結(jié)果表明:pH較低時(shí)峰形有所重疊當(dāng)pH為8～9之間可獲得滿(mǎn)意的分離度.同時(shí)發(fā)現(xiàn)在該體系中加入EDTA能夠使基線(xiàn)更快達(dá)到穩(wěn)定.綜合考慮分離效果和基線(xiàn)情況本文選擇的電泳運(yùn)行液體系為:10mmolLTris10mm

7、olLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%TEPA.3.2進(jìn)樣方式的選擇比較重力進(jìn)樣和電動(dòng)進(jìn)樣兩種方式電動(dòng)進(jìn)樣的檢測(cè)靈敏度比重力進(jìn)樣約高6倍.這是由于當(dāng)樣品溶于比電泳運(yùn)行液低得多的溶液中在電動(dòng)進(jìn)樣時(shí)電場(chǎng)會(huì)基本加在樣品與管口之間當(dāng)離子從高電場(chǎng)突然進(jìn)入低電場(chǎng)時(shí)會(huì)因減速而堆集在電場(chǎng)交界處導(dǎo)致區(qū)帶縮短、濃度提高得到電堆積效果進(jìn)而提高檢測(cè)靈敏度.檸檬黃和日落黃在水中有一定溶解度，并呈現(xiàn)陰離子形式存在[12]故可通過(guò)電堆積進(jìn)樣來(lái)改善靈敏度.本

8、文采用電動(dòng)進(jìn)樣方式進(jìn)樣參數(shù)為10.0kV5s.3.3進(jìn)樣電壓在分離電壓為15.0kV的條件下結(jié)果表明:進(jìn)樣電壓（9.0～11.5KV）的改變對(duì)分離監(jiān)測(cè)的影響.進(jìn)樣電壓越低檸檬黃和日落黃的峰中間出現(xiàn)雜質(zhì)峰進(jìn)樣電壓越高檸檬黃和日落黃的峰出現(xiàn)拖尾.在進(jìn)樣電壓為－10.0kV的情況下檸檬黃和日落黃的分離情況最佳.3.4進(jìn)樣時(shí)間進(jìn)樣時(shí)間決定進(jìn)樣量進(jìn)樣太少達(dá)不到檢測(cè)靈敏度進(jìn)樣太多容易引起區(qū)帶展寬分離度變差本實(shí)驗(yàn)采用進(jìn)樣時(shí)間5s.3.5樣品處理的影響

9、樣品加熱除去CO2再經(jīng)過(guò)0.22μｍ微孔濾膜過(guò)濾后直接進(jìn)樣測(cè)出的色素峰較低原因是樣品pH值接近3使得色素大部分以中性分子形式存在降低了電遷移進(jìn)樣量從而影響了色素的檢測(cè)靈敏度.為此將上述樣品用0.6molLTris調(diào)節(jié)至pH值等于8后進(jìn)樣靈敏度提高6倍.故本實(shí)驗(yàn)中樣品采用上述前處理方法.3.6線(xiàn)性范圍、檢出限和重現(xiàn)性在上述選定的實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)標(biāo)準(zhǔn)檸檬黃和日落黃進(jìn)行測(cè)定毛細(xì)管電泳譜圖如圖2所示。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)濃度系列的檸檬黃和日落黃進(jìn)行了測(cè)定濃度與電