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文檔簡介
1、本工作建立一種芯片毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測腫瘤標(biāo)記物和DNA的方法。通過鄰氨基酚-過氧化氫-辣根過氧化物酶(OAP-H2O2-HRP)體系,利用芯片毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測技術(shù)分離檢測了腫瘤標(biāo)記物和DNA。
第一章為緒論,簡要介紹了芯片毛細(xì)管電泳,并就當(dāng)前微流控分析中常用的電化學(xué)檢測方法做了簡要綜述。介紹了芯片毛細(xì)管電泳發(fā)展和研究現(xiàn)狀。
第二章介紹了PDMS/玻璃復(fù)合芯片及電極的設(shè)計(jì)與加工。該復(fù)合芯片由玻璃基底和PD
2、MS芯片構(gòu)成。本章簡要介紹了PDMS芯片的加工以及玻璃基片上電極的設(shè)計(jì)和加工過程。
第三章對芯片毛細(xì)管電泳鄰氨基酚(OAP)-H2O2-辣根過氧化物酶(HRP)酶聯(lián)免疫分析體系進(jìn)行了較為詳細(xì)地研究,在最佳反應(yīng)條件下,測定游離HRP的線性范圍為4.5×10-9~7.8×10-13mol/L,檢測限為1.6×10-13 mol/L(S/N=3)。
第四章利用芯片毛細(xì)管電泳鄰氨基酚(OAP)-H202-辣根過氧化物
3、酶(HRP)酶聯(lián)免疫分析體系電化學(xué)檢測了甲胎蛋白(AFP)和人絨毛膜促性腺激素(HCG)。此方法成功地用于甲胎蛋白(AFP)和人絨毛膜促性腺激素(HCG)的檢測。AFP和HCG線性范圍分別為1.5~66.6 ng/mL和1.7~132.5 ng/mL,檢測限分別為0.48ng/mL和0.30 ng/mL。
第血章利用芯片毛細(xì)管電泳鄰氨基酚(OAP)-H2O2-辣根過氧化物酶(HRP)酶聯(lián)免疫分析體系電化學(xué)檢測了27個(gè)、39
4、個(gè)堿基的靶DNA。此方法利用生物素修飾的DNA與親核素修飾的辣根過氧化酶(avidin-HRP)反應(yīng)形成HRP標(biāo)記的DNA探針,之后與它的互補(bǔ)DNA鏈雜交。雜交反應(yīng)后,混合物包括HRP標(biāo)記的雙鏈DNA(dsDNA-HRP),過量的HRP標(biāo)記的單鏈DNA(ssDNA-HRP)和剩余的親核素修飾的辣根過氧化酶(avidin-HRP),最后通過芯片毛細(xì)管電泳進(jìn)行分離。該方法成功的分離檢測了27個(gè),39個(gè)堿基的靶DNA,它們的線性范圍分別為3.
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