介觀流控-閥上實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)光度法定量分析蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是重要的生命物質(zhì),在生命活動(dòng)過(guò)程中具有極其重要的功能,準(zhǔn)確、快速地測(cè)定蛋白質(zhì)的含量在生化、藥物、食品及臨床分析中具有重要意義。本論文的研究目的是結(jié)合介觀流控-閥上實(shí)驗(yàn)室以及固體表面熒光技術(shù),探索準(zhǔn)確、靈敏、快速的蛋白質(zhì)定量分析方法。
　　 論文首先結(jié)合微順序注射分析技術(shù),以剛果紅為顯色劑,在介觀流控-閥上實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)中建立了一種自動(dòng)、準(zhǔn)確、快速的在線蛋白質(zhì)定量分析過(guò)程。利用LOV的自動(dòng)介觀流控特征,有效地減少了分析過(guò)程中樣品

2、和試劑的消耗,提高了分析速度,避免了操作過(guò)程中樣品的交叉污染。在進(jìn)樣體積為20.0μl,試劑消耗量為4.0μl的條件下,方法的線性范圍為12.5～200μg ml-1,檢出限為5.6μg ml-1(3σ),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9％(50μg ml-1,n=11);分析頻率可達(dá)到60 h-1。對(duì)健康人血清、尿樣、市售乳飲料、酸奶中的蛋白質(zhì)分析測(cè)定結(jié)果與考馬斯亮藍(lán)法結(jié)果相符。
　　 固相萃取技術(shù)是樣品預(yù)處理中最常用的方法之一,對(duì)分離純

3、化后的組份進(jìn)行定量分析,可以驗(yàn)證所建立的分離純化體系的效率,常規(guī)的洗脫后再定量的檢測(cè)方式由于引入洗脫劑會(huì)引起吸附后的組份發(fā)生形態(tài)變化或結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,使分析結(jié)果產(chǎn)生不可避免的誤差。原位光譜檢測(cè)技術(shù)如固體表面熒光方法,是根據(jù)固相表面吸附前后表面光譜性質(zhì)、強(qiáng)度的變化與吸附物濃度的關(guān)系對(duì)吸附組份進(jìn)行原位實(shí)時(shí)定量檢測(cè),無(wú)需引入洗脫劑,消除了溶劑效應(yīng),保證了樣品的原始性。本論文以硅膠為吸附材料,以鄰苯二甲醛為熒光探針,采用固體表面熒光方法對(duì)固相萃取過(guò)程