在重力自平衡的自由流設(shè)備中用親和自由流電泳模式提高組氨酸的分離效率.pdf

1、自由流電泳發(fā)展到現(xiàn)在幾十年間一直存在著兩個重要的問題：分離模式的缺乏以及分離效率較低。在本實驗課題中，我們首次提出了一種新型的自由流電泳模式——“親和自由流電泳”。這個模式的提出不但豐富了自由流的傳統(tǒng)模式而且還間接的提高了自由流電泳的分離效率。在親和自由流電泳這個模式中，有較高電荷密度的鎳離子作為模型配體，組氨酸作為目標(biāo)物。通過實驗條件的控制，鎳離子可以與組氨酸結(jié)合，結(jié)合形成的組氨酸-鎳離子復(fù)合物與低電荷密度的游離組氨酸分子相比，有很高

2、的電荷密度。與此同時，配體與其它組氨酸卻只有很微弱的相互作用。因此，跟其它組氨酸相比，以組氨酸-鎳離子復(fù)合物形式存在的組氨酸的遷移率大大的提高了，從而實現(xiàn)了對組氨酸的選擇性的分離和純化。基于這個模式，我們設(shè)計了親和自由流電泳的操作程序并實施了相關(guān)實驗。
　　實驗共分為兩部分，第一部分首先是區(qū)帶毛細(xì)管電泳的軟件模擬的設(shè)計，用于預(yù)測20種氨基酸在不同條件下的分離狀況，以確定有價值的目標(biāo)待分離物，這一簡單、實用、快速的現(xiàn)代方法的引進(jìn)是本

3、文的一大亮點。其次是在毛細(xì)管中對分離條件形成選擇和優(yōu)化，推導(dǎo)出親和自由流電泳的分離體系。
　　第二部分是親和自由流電泳模式可行性的驗證。在這部分中，先后進(jìn)行了兩種不同的自由流電泳模式，毛細(xì)管檢測，氨基酸分析等。最后，通過對普通的自由流區(qū)帶電泳和親和自由流電泳的分離效率的比較，分析得出親和自由流電泳的優(yōu)勢和應(yīng)用潛力。
　　這些實驗表明：（1）該技術(shù)可以大大的提高目標(biāo)物組氨酸和其它氨基酸之間的分離度；（2）該技術(shù)可以選擇性的將組