HSS-1型自由流電泳設備的研制及其在提取肝細胞刺激因子上的應用.pdf

1、目的 自行研制一臺HSS．1型自由流電泳設備，并利用該設備分離提取乳豬肝組織中的肝細胞刺激因子(HSS)，建立乳豬肝細胞刺激因子的提取工藝路線。 方法 在自由流電泳技術工作原理基礎上進行技術改造，采用有機玻璃、聚乙烯管、微孔濾膜等為主要材料，輔以恒流泵、電泳儀等設備，自行設計和制作一套HSS．1型自由流電泳設備，用于提取乳豬肝細胞刺激因子(hepaticstimulatorsubstance，HSS)。

2、 先將乳豬肝組織用超聲破碎法制備肝細胞裂解液，然后用加熱離心法獲取HSS粗提液。用混合床離子交換樹脂除鹽技術去除HSS粗提液中的無機離子，并用QAE葡聚糖A-50層析技術確定HSS等電點范圍。最后利用HSS．1型自由流電泳設備分離提取HSS粗提液中的HSS。用MTT活性測定法確定提取物中HSS生物活性；用考馬斯亮藍蛋白含量測定法確定去除雜蛋白效果，并計算HSS比活性。 結果 1．已研制出一臺HSS．1型自由流電

3、泳設備樣機。 2．PBS預處理的離子交換樹脂可安全有效地應用于大量HSS粗提液的除鹽過程，除鹽徹底且保留HSS的生物活性。 3．HSS的大致等電點為5．0以下。 4．HSS粗提液經該設備電泳后，其中的HSS總活性沒有降低，比活性明顯升高。 結論 本實驗建立的乳豬HSS提取工藝方法簡單，HSS粗提液經自行設計制作的HSS．1型自由流電泳設備電泳后，HSS總活性沒有降低，比活性明顯提高，說明