趨化因子VCC-1在肝細胞癌中的表達及意義.pdf

1、目的：VCC-1是一種新發(fā)現(xiàn)的趨化因子，目前研究表明VCC-1與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，且與血管生成密切相關(guān)。而在肝細胞癌中研究較少，本研究擬研究趨化因子VCC-1在肝細胞癌中的表達及其臨床意義。
　　 方法：設(shè)計VCC-1 PCR所需引物，根據(jù)驗證結(jié)果采用最佳引物，制作VCC-1及內(nèi)參GAPDH標(biāo)準(zhǔn)品，確定二者的標(biāo)準(zhǔn)曲線各參數(shù)。首先收集組織標(biāo)本，培養(yǎng)肝細胞癌細胞株。再提取8種肝細胞癌細胞株、10例正常肝臟組織標(biāo)本、42例肝癌組織及癌

2、旁組織中的總RNA表達情況，采用RT-PCR法逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。最后采用RealtimePCR法分別檢測以上樣本的mRNA表達，利用2-△△Ct公式計算出不同樣本VCC-1基因mRNA的表達，了解各細胞株之間表達差異，正常肝臟組織有無表達，以及癌組織與癌旁組織表達有無差異，并結(jié)合臨床資料分析VCC-1表達與臨床各種指標(biāo)之間關(guān)系，分析其臨床意義。
　　 結(jié)果：在8種肝細胞癌細胞株中，SUN398的VCC-1 mRNA相對表達量最高

3、，而Hep3B和Huh7幾乎不表達，其他細胞株SUN387、SUN449、SUN423、HepG2、PLC5表達介于之間。10例正常肝組織中，8例無表達，其中2例微表達，較細胞株及癌組織、癌旁組織表達要低(P＜0.01)。42例標(biāo)本中，均有乙肝病毒感染，癌組織及癌旁組織同時存在表達，癌組織高于癌旁組織26例（61％，14.9±7.6倍），癌旁高于癌組織16例（39％，6.9±5.4倍），癌組織表達上調(diào)（P＜0.01）。結(jié)合臨床資料發(fā)現(xiàn)癌

4、組織高表達VCC-1與腫瘤分化程度、直徑有關(guān)（P＜0.05），而與性別、年齡、AFP、癌栓無關(guān)（P＞0.05），而復(fù)發(fā)的3例標(biāo)本均有癌組織高表達（20.1±2.3倍），提示VCC-1高表達可能與肝細胞癌高危復(fù)發(fā)相關(guān)。有癌栓的8例標(biāo)本中，有5例出現(xiàn)癌組織VCC-1高表達（17.3±4.5倍），3例低表達。
　　 結(jié)論：在肝癌細胞株中的VCC-1表達存在差異，為下一步研究VCC-1基因在肝細胞癌中的作用地位奠定了基礎(chǔ)。正常肝組織基本