后向光散射分析技術開發(fā)及其在生化分析中的應用.pdf

1、共振光散射技術(RLS)自其建立以來,因操作簡便和靈敏度高已廣泛應用于研究分子的聚集行為及生物大分子和藥物分析等領域,但存在選擇性差的缺點.該文在普通RLS技術的基礎上,設計了后向光散射(Backward resonance light scattering,BRLS)信號檢測裝置,通過檢測后向的共振光散射信號,實現了對生物大分子的高靈敏及高選擇性分析.在pH 3.50的酸性介質中,萘鉻綠與蛋白質發(fā)生靜電作用產生以342.0nm為特征峰

2、的共振光散射(RLS)增強光譜.在此波長下,蛋白質的濃度與增強共振光散射強度(△I<,RLS>)呈線性關系,據此建立了痕量蛋白質的共振光散射分析法,方法成功地應用于尿樣中總蛋白質分析.在pH 2.90,離子強度為0.003 M時,在陽離子表面活性劑溴化十六烷基三甲銨(CTMAB)存在下,QT-蛋白質相互作用產生的粒子富集在H<,2>O/CCl<,4>界面上時,會在376nm產生BRLS特征峰,增強的BRLS信號,與HSA和BSA濃度成正

3、比例關系,據此建立了靈敏測定蛋白質的分析方法.在pH 3.00,鋁離子和水相中DNAs的結合能夠產生增強的共振光散射信號,Al(Ⅲ)-DNAs這種二元復合物還可以結合CCl<,4>溶液中的tetraphenylporphyrin(TPP),形成新的三元復合物TPP-A1(Ⅲ)-DNAs并富集在界面上.該復合物469nm產生強烈增強的BRLS信號,并且IBRLS正比于ctDNA和fsDNA的濃度,可用于靈敏的測定核酸,方法的檢出限在皮克級