鉑鈀納米微粒與蛋白質(zhì)相互作用的散射光譜及其分析應(yīng)用研究.pdf

1、貴金屬鉑，鈀納米微粒具有各種獨(dú)特的物理、化學(xué)性質(zhì)，研究它們與生物分子相互作用的光譜特征及其分析應(yīng)用具有重要的理論意義和應(yīng)用前景。蛋白質(zhì)是生物最重要的基本組成成分之一，其定量測(cè)定在生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和化學(xué)研究中占有十分重要的地位。近年來，二級(jí)散射(Second Order Scattering，SOS)和共振光散射(Resonance Light Scattering，RLS)技術(shù)作為新興的、簡(jiǎn)便的、高靈敏的分析技術(shù)受到人們的廣泛關(guān)注。本

2、文探討了鉑鈀納米微粒的制備，及其與蛋白質(zhì)相互作用的SOS和RLS光譜特征、影響因素、分析化學(xué)性質(zhì)及其分析應(yīng)用。 制備鉑納米微粒是為了考察納米鉑與蛋白質(zhì)的作用，考慮到保護(hù)劑的加入會(huì)阻礙納米鉑與蛋白質(zhì)的作用，本文選用既有還原作用又有保護(hù)分散作用的檸檬酸三鈉作為還原劑。油浴加熱，檸檬酸三鈉還原氯鉑酸制備出平均粒徑為1.3 nm，粒徑分布窄的納米鉑金屬微粒；微波加熱制備出了平均粒徑為1.4 nm的納米鈀金屬微粒。納米鉑鈀膠體均能穩(wěn)定存在

3、6個(gè)月以上。 在酸性介質(zhì)中，鉑納米微粒與血清蛋白共存時(shí)，形成較大體積的聚集體，納米鉑由1.3 nm變?yōu)?.6 nm，且粒徑分布變寬。在SOS法中，納米鉑體系的SOS峰位于244，258，300和323 nm，本實(shí)驗(yàn)選用λex/λem=258 nm/516 nm為測(cè)量波長，考察了適宜的反應(yīng)條件，光譜特征以及以鉑納米微粒作為SOS探針測(cè)定蛋白質(zhì)時(shí)方法的靈敏度和選擇性。發(fā)現(xiàn):蛋白質(zhì)在一定的濃度范圍內(nèi)與SOS強(qiáng)度成正比，方法的靈敏度高，

4、其檢出限(S/N=3)分別為3.8 ng/mL(牛血清白蛋白BSA)、7.9 ng/mL(人血清白蛋白HAS)，并且具有較好的選擇性，除了Ag+，Pb2+，Cu2+的允許量低外，其它常見的金屬離子、非金屬離子和氨基酸的影響較小。同時(shí)還研究了納米鉑用于RLS法測(cè)定蛋白質(zhì)的分析應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)：蛋白質(zhì)在一定的濃度范圍內(nèi)與RLS強(qiáng)度也成正比，方法的靈敏度高，其檢出限(S/N=3)分別為4.2 ng/mL(牛血清白蛋白BSA)、10.7 ng/mL(

5、人血清白蛋白HAS)，并且具有較好的選擇性。將以上兩種方法用于實(shí)際樣品的測(cè)定，結(jié)果令人滿意。 對(duì)納米鈀微粒與蛋白質(zhì)相互作用的二級(jí)散射(SOS)光譜進(jìn)行了研究，在酸性BR緩沖溶液中，平均粒徑為1.4 nm鈀納米微粒與生物大分子血清蛋白共存時(shí)，形成較大體積的聚集體，納米鈀增大為2.4 nm，且粒徑分布變寬，體系的散射強(qiáng)度急劇增強(qiáng)。考察了SOS光譜特征、適宜的反應(yīng)條件以及鉑納米微粒作為SOS探針測(cè)定蛋白質(zhì)時(shí)方法的靈敏度和選擇性，發(fā)現(xiàn)，