一氧化氮分子熒光探針合成及性能研究.pdf

1、一氧化氮作為一種信息分子廣泛存在于生物體的細(xì)胞中,并直接參與生理活動(dòng)傳導(dǎo)信息。對(duì)于一氧化氮(NO)的研究已經(jīng)變得越來(lái)越需要,由于一氧化氮本身不具有熒光信號(hào),所以熒光分析法就要通過(guò)引入具有熒光基團(tuán)的試劑與一氧化氮反應(yīng),生成與熒光基團(tuán)自身光學(xué)性質(zhì)有一定差異的化合物,以此通過(guò)改變熒光基團(tuán)光學(xué)性質(zhì)來(lái)定性和定量測(cè)定一氧化氮。本論文共分為五章分別對(duì)一氧化氮的熒光探針的設(shè)計(jì)原理、分類(lèi)和合成及性能研究展開(kāi)研究,具體內(nèi)容如下:
　　 第一章,概述

2、了一氧化氮熒光探針的設(shè)計(jì)原理、分類(lèi),并介紹了研究現(xiàn)狀以及研究進(jìn)展。
　　 第二章,利用氨基熒光素和1,4,8,11-四氮雜十四烷相連制備了銅離子絡(luò)合物,并用紅外光譜、核磁共振、紫外吸收和熒光光譜等對(duì)配合物和一氧化氮進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和性能測(cè)試。在0.1 mol/L pH7.40的Tris-HCl緩沖溶液中,分別進(jìn)行了(1)加入NOC-18的實(shí)驗(yàn)對(duì)比;(2)一氧化氮濃度對(duì)熒光探針靈敏度的影響;(3)測(cè)試一氧化氮探針的選擇性及pH的影響等

3、實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)行熒光探針的性能測(cè)試。經(jīng)過(guò)測(cè)試后的發(fā)現(xiàn)此熒光探針的λex=465nm,處有最大發(fā)射波長(zhǎng)且為λem=522nm;并且在pH為4.5時(shí)有最大發(fā)射波長(zhǎng),并且在H2O2,ONOO-和OH-存在的情況下,熒光探針表現(xiàn)了很好的選擇性。
　　 第三章,本章我們使用二氯熒光素和鄰苯二胺合成了內(nèi)酰胺,然后與一氧化氮反應(yīng)生成二氯熒光素苯三唑。由于二氯熒光素苯三唑在水溶液中可以分解為二氯熒光素和苯三唑,且苯三唑本身具有很強(qiáng)的熒光,所以通過(guò)對(duì)其

4、熒光的檢測(cè)就可以對(duì)一氧化氮進(jìn)行定性和定量。實(shí)驗(yàn)中,我們使用了用紅外光譜、核磁共振、紫外吸收和熒光光譜等對(duì)配合物和一氧化氮進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和性能測(cè)試,并在0.1mol/L pH7.40的PBS緩沖溶液中,分別進(jìn)行了(1)測(cè)試一氧化氮釋放劑加入前后反應(yīng)的熒光強(qiáng)度變化;(2)測(cè)試隨時(shí)間變化下內(nèi)酰胺與一氧化氮反應(yīng)的熒光強(qiáng)度變化;(3)測(cè)試不同pH下內(nèi)酰胺反應(yīng)的熒光強(qiáng)度變化。經(jīng)過(guò)測(cè)試后的發(fā)現(xiàn)此熒光探針的入ex=521nm,處有最大發(fā)射波長(zhǎng)且為λem=

5、544nm;并且熒光探針在H2O2,ONOO-和OH-存在的情況下,表現(xiàn)了很好的選擇性。
　　 第四章,本章我們使用曙紅Y與鄰苯二胺反應(yīng)制備曙紅Y內(nèi)酰胺,與一氧化氮反應(yīng),并用紅外光譜、核磁共振、紫外吸收和熒光光譜等對(duì)配合物和一氧化氮進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和性能測(cè)試,并在0.1 mol/L pH7.40的PBS緩沖溶液中,分別進(jìn)行了(1)測(cè)試一氧化氮釋放劑加入前后反應(yīng)的熒光強(qiáng)度變化;(2)不同一氧化氮濃度對(duì)反應(yīng)的影響;(3)測(cè)試熒光探針選擇