一氧化氮與一氧化氮合酶對心肌的保護作用.pdf

1、目的：
　　 觀察缺血再灌注與缺血后處理時心肌一氧化氮（NO）生成量與一氧化氮合酶（NOS）活性。使用NOS激動劑與抑制劑后，測定大鼠心臟乳酸脫氫酶活性、心肌梗死面積。探討NO與NOS在缺血后處理心肌保護機制中的作用。
　　 方法：
　　 將48只Wistar大鼠隨機分成4組，建立Langendorff離體心臟灌注模型。對照組用Kreb’s液灌注，心臟保持持續(xù)工作狀態(tài)10 min，缺血30 min，再灌注120

2、min；實驗組用Kreb’s液灌注，全心缺血30 min后，再灌注30 s后，缺血30 s，反復(fù)3次，然后持續(xù)灌注117 min；激動劑組（再灌注損傷+L-Arg）全心肌缺血30 min，再灌注120 min。灌流液為1mmol/L L-Arg的Krebs液；抑制劑組（缺血后處理+L-NNA）全心肌缺血30 min，再灌注30 s，梗死30 s，重復(fù)3次后再灌注117 min。灌流液為1mmol/L L-NNA的Krebs液。
　

3、　 再灌注結(jié)束時，TTC染色觀察心肌梗死面積，高壓液相色譜儀（HPLC）分析心肌組織中NO生成量與NOS活性，采用紫外分光光度法測定乳酸脫氫酶活性。
　　 結(jié)果：
　　 1.缺血再灌注與缺血后處理時LDH活性和心肌梗死面積比較
　　 實驗組心肌釋放的LDH活性顯著低于對照組（P<0.01）。與對照組相比，實驗組心肌梗死面積縮小（P<0.05）。
　　 2.缺血再灌注與缺血后處理時心肌NO生成量與NOS活

4、性比較
　　 實驗組NO生成量及NOS活性均高于對照組（P<0.05）。
　　 3.NOS激動劑及抑制劑對心肌細(xì)胞的影響。
　　 NO生成量實驗組及抑制劑組高于對照組（P<0.05），激動劑組低于實驗組（P<0.05）；實驗組心肌組織NOS活性高于激動劑組與抑制劑組（P<0.05）；實驗組、激動劑組及抑制劑組LDH活性及心臟梗死面積均顯著低于對照組（P<0.05）；實驗組心肌組織LDH活性及心臟梗死面積低于抑制劑

5、組（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.后處理能夠縮小心肌梗死面積；減少缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞LDH的釋放，對缺血再灌注損傷心肌具有保護作用。
　　 2.后處理時，因其對再灌注損傷心肌細(xì)胞的保護，存在于內(nèi)皮細(xì)胞上的eNOS較缺血再灌注時多，故而后處理時NO生成量及NOS活性均高于缺血再灌注時。
　　 3.缺血后處理時，心臟NO生成量與NOS活性均高于缺血再灌注時，心臟損傷程度也較缺血再灌注低；使用N

6、OS抑制劑后，缺血后處理對心臟的保護程度減弱；使用NOS激動劑后，缺血再灌注對心臟的損傷降低。
　　 4.本實驗結(jié)果表明，使用NOS激動劑L-Arg可提高心肌NOS活性與NO生成量，同時心肌也受到了一定的保護；而NOS抑制劑L-NNA不僅降低了NOS活性與NO生成量，也減弱了后處理對心肌的保護作用。據(jù)此，推測NO在缺血后處理保護心肌機制中有一定作用，為進一步研究后處理保護缺血再灌注損傷心肌的機制提供新的線索。使用NOS激動劑可保