新型稀土絡(luò)合物BC-EDTA的制備、表征及納米顆粒標(biāo)記用于時間分辨免疫檢測.pdf

1、本文主要圍繞超靈敏診斷技術(shù)的研究展開。時間分辨熒光免疫診斷(TRFIA)以及生物發(fā)光免疫診斷技術(shù)是現(xiàn)代免疫診斷方法中兩個引人注目的熱點領(lǐng)域，適合于臨床上微量抗原、抗體的檢測和病原微生物痕量檢測等。本論文選題在這兩個研究方向開展相關(guān)的研究工作。全文主要包括三個部分：綜述各種類型的高靈敏免疫檢測技術(shù)；新型稀土絡(luò)合物2，9-雙[N，N-雙(羧甲基)氨甲基]-4，7-(苯基)-1，10-(菲咯啉)(BC-EDTA)的合成及其標(biāo)記二氧化硅納米生顆

2、粒并運用于時間分辨熒光免疫診斷。 第一章為緒論，介紹了各種類型的超靈敏免疫檢測技術(shù)，并簡要介紹超靈敏檢測技術(shù)發(fā)展的最新成果。 第二章主要為稀土絡(luò)合物BC-EDTA的制備與表征。首先合成了一種新型稀土絡(luò)合物BC-EDTA，該螯合劑具有良好的水溶性，可與稀土金屬離子(Eu3+)形成強熒光絡(luò)合物，不需要加入增強液，且與銪離子形成的絡(luò)合物熒光強度十分穩(wěn)定。利用四極桿飛行時間質(zhì)譜、紅外吸收光譜、紫外吸收光譜和核磁共振氫譜對其進行表

3、征，結(jié)果表明，我們合成的絡(luò)合物與設(shè)計完全一致。 第三章描述了利用稀土絡(luò)合物BC-EDTA標(biāo)記二氧化硅納米應(yīng)用于時間分辨熒光免疫檢測。將納米熒光材料制備技術(shù)與時間分辨熒光免疫測定法相結(jié)合，建立了以熒光納米顆粒為生物標(biāo)記物的高靈敏度時間分辨熒光免疫分析方法。利用油包水型(W/O)微乳液體系，通過優(yōu)化乳液中各組分的配比和氨水的量來控制納米顆粒的大小和四乙氧基硅烷的水合化、聚合速度，得到了直徑為55 nm左右的空二氧化硅納米顆粒，再加入

4、(APTMS)，室溫反應(yīng)2 h，引入氨基。稀土螫合劑BC-EDTA與碳二亞胺(EDC)、(NHS)室溫攪拌下反應(yīng)30 min，與懸浮于pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中的顆粒反應(yīng)2 h，在加入Eu離子敏化發(fā)光，重復(fù)此過程4次，制得時間分辨熒光納米顆粒。再在熒光納米顆粒表面引入氨基，可以與抗體、抗原、寡核糖核苷酸等生物大分子交聯(lián)。這種熒光納米作為生物標(biāo)記物在免疫檢測，細胞成像及DNA雜化等領(lǐng)域?qū)⒕哂袕V闊的應(yīng)用空間。我們采用雙抗體夾心法對人血清中