亞油酸氧化反應過程的拉曼光譜分析.pdf

1、脂質(zhì)是一種低溶于水而高溶于非極性溶劑的生物大分子。脂質(zhì)過氧化,作為機體損傷的一種特殊形式,被認為是許多中毒過程的起點,甚至可能是致癌、致畸乃至突變的重要環(huán)節(jié)之一。關于脂質(zhì)過氧化反應研究的關鍵在于過氧化水平的檢測。目前關于脂質(zhì)過氧化反應水平的檢測方法主要有碘量法、硫氰酸鐵法、TBA檢測法、熒光法、化學發(fā)光法、高效液相色譜法等。分別從底物的消耗、氧化產(chǎn)物的生成角度,間接反映脂質(zhì)過氧化的程度。目前沒有哪一種方法可以全面的對脂質(zhì)過氧化水平進行檢

2、測,只能是根據(jù)研究者的實驗條件和目的采用多種方法從多個角度對脂質(zhì)過氧化反應的程度進行檢測。
　　 拉曼光譜分析技術提供了一種直接研究生物大分子的物理檢測手段。在結構生物學研究領域有著獨特的優(yōu)點。拉曼光譜非常適合研究生物大分子,能夠?qū)Υ蠓肿訌秃衔镏械闹匾稽c,提供非常豐富而精確的信息。
　　 亞油酸屬于不飽和脂肪酸,其成分單一,結構簡單,非常適合研究氧化反應過程中分子結構的變化。因此本實驗以亞油酸為材料,采用拉曼光譜分析技

3、術研究亞油酸過氧化反應過程中分子結構的變化,研究不飽和脂肪酸的氧化過程并進一步研究了紫外輻射對亞油酸氧化過程的影響。本實驗的主要內(nèi)容:
　　 (1)亞油酸的拉曼光譜分析,對亞油酸的拉曼光譜進行譜峰指認,并研究了不同波長激光光源對亞油酸拉曼光譜的影響和短時間352nm激光輻照對亞油酸拉曼光譜的影響。結果表明亞油酸的拉曼光譜主要由724 cm-1、838 cm-1、908cm-1、972 cm-1、1075 cm-1、1263 cm

4、-1、1439 cm-1、1657 cm-1、2729 cm-1、2854 cm-1、2903 cm-1、3014cm-1構成,可以作為亞油酸的特征峰；通過選用不同波長激光光源對樣品檢測發(fā)現(xiàn),514nm的可見激光器作為光源檢測效果更好一些。短時間的紫外激光輻照處理發(fā)現(xiàn),在所研究的時間范圍內(nèi)325nm激光照射對亞油酸樣品的拉曼光譜沒有影響,說明拉曼檢測過程檢測激光對樣品的影響可以忽略。
　　 (2)從亞油酸自氧化反應產(chǎn)物的生成和反

5、應底物的結構變化兩個角度出發(fā),分別采用TBA法和共軛二烯法與拉曼光譜分析方法監(jiān)測亞油酸自氧化反應過程。結果表明:拉曼光譜技術能夠用來檢測生物大分子材料的結構變化。隨著自氧化過程的展開,亞油酸的拉曼光譜從峰型和峰強兩方面均存在變化。拉曼光譜技術能夠彌補TBA法和共軛二烯法的不足,排除了共軛二烯和MDA來源的不確定性,能夠靈敏有效地對不飽和脂肪酸的氧化過程進行檢測。
　　 (3)研究紫外輻照對亞油酸過氧化反應的影響,結果表明:紫外輻

6、照加速了亞油酸的氧化,其中劑量為45J/cm2的紫外輻照效果最明顯。經(jīng)15J/cm2、45J/cm2、60J/cm2的紫外輻照使δ(=CH)形變振動的標志峰1266 cm-1峰的消失時間由未輻照的72h縮短為48h,經(jīng)劑量為30J/cm2紫外輻照的樣品在反應至24h就已經(jīng)消失；v(C=C)和羧酸中C=O的標志峰1658 cm-1強度增大時間提前；=CH中C-H振動特征峰3014 cm-1的消失時間提前了24h,輻照后樣品841 cm-1