松花江流域微生物分布及其多樣性研究.pdf

1、松花江流域是我國東北的重要地區(qū)，為加強(qiáng)對(duì)其水生態(tài)環(huán)境狀況的了解，本課題對(duì)松花江流域(嫩江、第二松花江、松花江干流及它們各自的支流)的微生物數(shù)量和群落多樣性進(jìn)行了比對(duì)分析。應(yīng)用傳統(tǒng)平板培養(yǎng)法(HeterotrophicPlate Counts，HPC)和流式細(xì)胞技術(shù)(Flow Cytometric，F(xiàn)CM)測定水樣中的細(xì)菌數(shù)；運(yùn)用試劑盒法提取樣品中的總DNA，以巢式PCR(Polymerase Chain Reaction)和降落PCR(

2、Touchdown PCR)擴(kuò)增細(xì)菌16SrDNA片段，PCR產(chǎn)物通過聚丙烯酰胺凝膠電泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis，DGGE)技術(shù)對(duì)目的片段進(jìn)行分離，進(jìn)而對(duì)水樣中的細(xì)菌群落多樣性進(jìn)行研究分析。利用SPSS軟件作各采樣點(diǎn)的環(huán)境影響因子和微生物數(shù)量、群落多樣性的相關(guān)性分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，總活細(xì)菌數(shù)的數(shù)量級(jí)在106上下，而可培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)僅為104左右，在總活細(xì)菌數(shù)中所占的平均比例不超過2％。

3、這說明平板計(jì)數(shù)法可能導(dǎo)致對(duì)水環(huán)境中微生物實(shí)際數(shù)量的低估；而流式細(xì)胞計(jì)數(shù)方法在微生物計(jì)數(shù)方面較有優(yōu)勢。整體上松花江流域干流的微生物數(shù)量要高于支流，松花江干支流一般居于三大河流數(shù)值排序的中間段；而在變化趨勢上，雖然兩種計(jì)數(shù)手段都未顯示出松花江流域微生物數(shù)量變化的趨勢，但總活細(xì)菌顯示出了相對(duì)較明顯的規(guī)律性。就DGGE圖譜分析而言，松花江流域的部分區(qū)段出現(xiàn)了分區(qū)的現(xiàn)象，但是從整體上這種趨勢并不明顯?？偟目磥?，松花江流域支流的微生物群落多樣性要高

4、于干流。這一結(jié)論可能是由于支流地形和環(huán)境因素多樣性的影響，支流擁有更為豐富的微生物族群，當(dāng)其中某些微生物進(jìn)入主干河流后受到環(huán)境因素或污染物的影響被選擇性淘汰，因此主干河流的微生物種群多樣性反而不高。在采樣點(diǎn)采集的溫度、鹽度、酸堿度、溶解氧和電導(dǎo)率這五種環(huán)境影響因子的相關(guān)性分析方面，水溫和鹽度是影響松花江流域水生微生物群落結(jié)構(gòu)的主要影響因子；但它們對(duì)群落結(jié)構(gòu)的影響與數(shù)量分布的趨勢并不一致。本課題還將松花江水樣的微生物數(shù)量及多樣性與其他水體