以環(huán)糊精為主體的多功能新型熒光探針的設計、合成及其生物應用.pdf

1、環(huán)糊精(Cyclodextrin)是由直鏈淀粉在葡萄糖轉移酶(CGTase)的作用下生成的一系列環(huán)狀低聚糖的總稱，通常由α-1，4-糖苷鍵連接6-12個D-吡喃葡萄糖單元組成。其中研究較多的并且具有實際意義的是含有6、7、8個葡萄糖單元的分子，分別稱為α、β、和γ-環(huán)糊精。
　　環(huán)糊精具有疏水的空腔和親水的表面，可以在水溶液中選擇性結合各種具有適當極性和尺寸的有機、無機以及生物分子形成主-客體或超分子配合物。這種特性使其在化學和生

2、物學的許多領域得到廣泛應用，并能夠用于構建多種功能性的分子模型以實現其識別作用。然而天然環(huán)糊精與模型底物的配位作用一般相對較弱，所以通過在其側臂上引入具有功能性的修飾基團可以得到單體環(huán)糊精衍生物和橋連環(huán)糊精(環(huán)糊精二聚體)，這些環(huán)糊精的衍生物可以大大提高分子識別與結合能力，從而拓展了其應用范圍。同時由于單體環(huán)糊精衍生物以及橋連環(huán)糊精對某些熒光團的熒光具有明顯的增敏作用，所以使其在熒光探針領域備受關注。
　　基于β-環(huán)糊精獨特的結構

3、和特性，本論文主要開展了以下方面的研究:
　　設計合成了一種新型的基于熒光共振能量轉移(FRET)原理的自組裝熒光納米探針:巰基乙胺修飾的金納米-賴氨酸-橋連(β-環(huán)糊精)-熒光素，實現了在生物體系內胰蛋白酶的檢測。其中賴氨酸-橋連(β-環(huán)糊精)-熒光素作為能量供體，巰基乙胺(MEA)修飾的金納米(MGNPs)作為能量受體，這兩部分通過酰胺鍵組建成一個FRET納米探針，金納米有效地猝滅了熒光素的熒光。在胰蛋白酶存在的情況下，其能夠

4、專一性的水解賴氨酸與其他物質形成的酰胺鍵，所以特異性的切斷了探針的酰胺鍵，從而導致了被猝滅的熒光素熒光恢復。探針熒光強度的增加程度與胰蛋白酶濃度的不斷升高成正比?；诖耍瑯嫿艘环N可以直接檢測并且區(qū)別正常成人血清和急性胰腺炎患者血清中胰蛋白酶含量的方法。而且該納米探針成功地實現了對人胰腺癌細胞中胰蛋白酶濃度變化情況的成像分析。實驗證明探針具有高的靈敏度，好的專一性，對細胞的低毒性以及良好的膜穿透性。該檢測方法為臨床上研究胰腺疾病中胰蛋白