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    • 簡(jiǎn)介:生物化學(xué)試卷生物化學(xué)試卷2一、選擇題一、選擇題1測(cè)定100克生物樣品中氮含量是2克,該樣品中蛋白質(zhì)含量大約為A625B125C1D2E202KM值是指AV等于12VMAX時(shí)的底物濃度BV等于12VMAX時(shí)的酶濃度CV等于12VMAX時(shí)的溫度DV等于12VMAX時(shí)的抑制劑濃度E降低反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度3NADH氧化呼吸鏈的組成部份不包括ANADBCOQCFADDFESECYT4各種細(xì)胞色素在呼吸鏈中傳遞電子的順序是AA→A3→B→C1→12O2BB→C1→C→A→A3→12O2CA1→B→C→A→A3→12O2DA→A3→B→C1→A3→12O2EC→C1→B→AA3→12O25主要發(fā)生在線(xiàn)粒體中的代謝途徑是A糖酵解途徑B三羧酸循環(huán)C磷酸戊糖途徑D脂肪酸合成E乳酸循環(huán)6糖原分解所得到的初產(chǎn)物是AUDPGB葡萄糖C1磷酸葡萄糖D1磷酸葡萄糖和葡萄糖E6磷酸葡萄糖7磷酸戊糖途徑A是體內(nèi)CO2的主要來(lái)源B可生成NADPH直接通過(guò)呼吸鏈產(chǎn)生ATPC可生成NADPH,供還原性合成代謝需要D是體內(nèi)生成糖醛酸的途徑8血漿脂蛋白中膽固醇含量最多的是ACMBVLDLCIDLDLDLEHDL9下列哪種酶不參與脂肪酸的Β氧化A脂肪酰COA合成酶B脂肪酰COA脫氫酶C肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶D琥珀酰COA轉(zhuǎn)硫酶EΔ2烯酰水化酶10不能轉(zhuǎn)變成乙酰COA的物質(zhì)是AΒ羥丁酸B脂肪酸C乙酰乙酸D膽固醇E甘油11膽固醇生物合成的限速酶是A硫解酶BHMGCOA合成酶CHMGCOA還原酶DHMGCOA裂解酶E以上都不是12急性肝炎時(shí)血清中哪些酶的活性可見(jiàn)升高5乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)基因包括、和。三、名詞解釋三、名詞解釋1分子雜交2活性中心3磷氧比(PO)4變構(gòu)調(diào)節(jié)5酮體6岡崎片段7受體8生物轉(zhuǎn)化9順式作用元件10層析四、簡(jiǎn)述題四、簡(jiǎn)述題1比較糖酵解與糖有氧氧化有何不同2簡(jiǎn)述酮血癥發(fā)病機(jī)制,為什么注射葡萄糖可以消除酮血癥3寫(xiě)出機(jī)體內(nèi)的尿素生成過(guò)程。4根據(jù)實(shí)驗(yàn)課操作,簡(jiǎn)述組織DNA的提取方法。5簡(jiǎn)述基因工程的基本步驟。五、論述題五、論述題1敘述蛋白質(zhì)生物合成的基本過(guò)程。2何謂競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用原理敘述磺胺類(lèi)藥物作用機(jī)制。答案2一、選擇一、選擇1B2A3C4B5B6C7C8D9D10D11C12B13D14B15B16C17C18B19B20A二、填空二、填空1ASPGLUTHRSERSYS2底物濃度酶濃度溫度PH激活劑抑制劑3四環(huán)素族金霉素土霉素鏈霉素卡那霉素489885ZYA三、名詞三、名詞1不同來(lái)源的DNA或RNA鏈,當(dāng)DNA鏈之間、RNA鏈之間或DNA與RNA之間存在互補(bǔ)順序時(shí),在一定條件下可以發(fā)生互補(bǔ)配對(duì)形成雙螺旋分子,這種分子稱(chēng)為雜交分子。形成雜交分子的過(guò)程稱(chēng)為分子雜交。2酶分子中的必需基團(tuán)在空間結(jié)構(gòu)中彼此靠近,形成一個(gè)能與底物特異性結(jié)合并催化底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的特定空間區(qū)域。這一區(qū)域稱(chēng)為酶的活性中心。3P0比值是指每消耗一克原子氧所需消耗的無(wú)機(jī)磷的克原子數(shù)。
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    • 簡(jiǎn)介:生物化學(xué)單元測(cè)驗(yàn)生物化學(xué)單元測(cè)驗(yàn)I一、是非判斷題一、是非判斷題(8分)分)1、果糖是左旋的,因此它屬于L構(gòu)型。()2、己糖有8種異構(gòu)體。()3、胰蛋白酶專(zhuān)一地切在多肽鏈中堿基氨基酸的N端位置上。()4、多肽合成中往往以芐氧羧基(C6H5CH2-O-CO-)保護(hù)氨基,并可用三氟乙酸輕易地將它除去;羧基可轉(zhuǎn)變成叔丁酯,并用堿皂化去除。()5、疏水作用是使蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定地一種非常重要的次要鍵。()6、逆流分溶和紙層析,這兩種分離氨基酸的方法是基于同一原理。()7、蛋白質(zhì)的SDS聚丙稀酰胺凝膠電泳和圓盤(pán)電泳所依據(jù)的分離原理是完全不同的。()8、測(cè)定酶活力時(shí),一般測(cè)定產(chǎn)物生成量比測(cè)定底物消耗量更為準(zhǔn)確。()二、名詞解釋?zhuān)總€(gè)二、名詞解釋?zhuān)總€(gè)3分,共分,共24分)分)1、脂質(zhì)體2、肽鍵(PEPTIDEBOND)3、構(gòu)型和構(gòu)象4、結(jié)構(gòu)域5、別構(gòu)效應(yīng)6、雙向電泳(TWODIMENSIONALELECTROPHESIS)7、酶的比活力8、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用8、酶的活性部位三、填空題(每空三、填空題(每空05分,共分,共10分)分)1、纖維素是由________________組成,它們之間通過(guò)________________糖苷鍵相連。2、人血液中含量最豐富的糖是________________,肝臟中含量最豐富的糖是________________,肌肉中含量最豐富的糖是________________。3、現(xiàn)欲分離某蛋白質(zhì)溶液中的四個(gè)蛋白質(zhì)成分,它們分子量和等電點(diǎn)列于表內(nèi)蛋白質(zhì)MRPIA1200010B620004C280007D90005如不考慮次要因素,它們?cè)谄暇厶悄zG75柱上分離時(shí),流出的先后次序?qū)⑹亲钕?,,其次,最后流出的蛋白質(zhì)是。如選用羧甲基纖維素柱分離上面四種蛋白質(zhì),并用鹽濃度梯度洗脫,流出的先后次序?qū)⑹?、、、?、脲酶只作用于尿素,而不作用于其他任何底物,因此它具有專(zhuān)一性;甘油激酶可以催化甘油磷酸化,僅生成甘油1磷酸一種底物,因此它具有專(zhuān)一性。5、影響酶促反應(yīng)速度的因素有、、、、和。四、選擇題(四、選擇題(10分)分)1、氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有058%的色氨酸(色氨酸的分子量為204)。(8)(A)試計(jì)算牛血清白蛋白的最小分子量(假設(shè)每個(gè)蛋白分子只含有一個(gè)色氨酸殘基)。(B)凝膠過(guò)濾測(cè)得的牛血清白蛋白的分子量為70,000,試問(wèn)血清白蛋白分子含有幾個(gè)色氨酸殘基2、ANFINSEN用核糖核酸酶進(jìn)行的變性-復(fù)性實(shí)驗(yàn),在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)方面得出的重要結(jié)論是什么(10)3、新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖濃度高。可是掰下的玉米貯存幾天后就不那么甜了,因?yàn)?0%糖已經(jīng)轉(zhuǎn)化為淀粉了。如果將新鮮玉米去掉外皮后浸入沸水幾分鐘,然后于冷水中冷卻,儲(chǔ)存在冰箱中可保持其甜味。這是什么道理(8)4、何謂共價(jià)調(diào)節(jié)酶舉例說(shuō)明其如何通過(guò)自身活性的變化實(shí)現(xiàn)對(duì)代謝的調(diào)節(jié)。(10)5、什么是回文順序和鏡像重復(fù)結(jié)構(gòu)二者結(jié)構(gòu)上的特征是什么(12)參考答案參考答案是非題答案是非題答案1、錯(cuò)。2、錯(cuò)。3、錯(cuò)。4、對(duì)。5、對(duì)。6、對(duì)。7、對(duì)。8、對(duì)。名詞解釋答案名詞解釋答案1、脂質(zhì)體(LIPOSOME)是由包圍水相空間的磷脂雙層形成的囊泡(小泡)。2、肽鍵(PEPTIDEBOND)一個(gè)氨基酸的羧基與另一個(gè)的氨基的氨基縮合,除去一分子水形成的酰氨鍵。3、構(gòu)型(CONFIGURATION)一個(gè)有機(jī)分子中各個(gè)原子特有的固定的空間排列。這種排列不經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵的斷裂和重新形成是不會(huì)改變的。構(gòu)型的改變往往使分子的光學(xué)活性發(fā)生變化。構(gòu)象(CONFMATION)指一個(gè)分子中,不改變共價(jià)鍵結(jié)構(gòu),僅單鍵周?chē)脑有D(zhuǎn)所產(chǎn)生的原子的空間排布。一種構(gòu)象改變?yōu)榱硪环N構(gòu)象時(shí),不要求共價(jià)鍵的斷裂和重新形成。構(gòu)象改變不會(huì)改變分子的光學(xué)活性。4、結(jié)構(gòu)域(DOMAIN)在蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)內(nèi)的獨(dú)立折疊單元。結(jié)構(gòu)域通常都是幾個(gè)超二級(jí)結(jié)構(gòu)單元的組合。5、別構(gòu)效應(yīng)(ALLOSTERICEFFECT)又稱(chēng)為變構(gòu)效應(yīng),是寡聚蛋白與配基結(jié)合改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象,導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物活性喪失的現(xiàn)象。6、雙向電泳(TWODIMENSIONALELECTROPHESE)等電聚膠電泳和SDSPAGE的組合,即先進(jìn)行等電聚膠電泳(按照PI)分離,然后再進(jìn)行SDSPAGE(按照分子大小分離)。經(jīng)染色得到的電泳圖是二維分布的蛋白質(zhì)圖。7、比活(SPECIFICACTIVITY)每分鐘每毫克酶蛋白在25OC下轉(zhuǎn)化的底物的微摩爾數(shù)。比活是酶純度的測(cè)量。8、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用(UNCOMPETITIVEINHIBITION)抑制劑只與酶底物復(fù)合物結(jié)合而不與游離的酶結(jié)合的一種酶促反應(yīng)抑制作用。這種抑制使KM和ΥMAX都變小但ΥMAXKM不變。9、活性部位(ACTIVESITE)酶中含有底物結(jié)合部位和參與催化底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的氨基酸殘基部分。活性部位通常位于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域或亞基之間的裂隙或是蛋白質(zhì)表面的凹陷部位,通常都是由在三維空間上靠得很進(jìn)的一些氨基酸殘基組成。填空題答案填空題答案
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    • 簡(jiǎn)介:120072007~20082008學(xué)年第一學(xué)期期末考試試卷學(xué)年第一學(xué)期期末考試試卷B卷課程名稱(chēng)課程名稱(chēng)_生物化學(xué)(二)生物化學(xué)(二)____課程代碼課程代碼_MED130067MED130067________開(kāi)課院系開(kāi)課院系生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)_考試形式考試形式閉卷閉卷姓名名學(xué)號(hào)號(hào)專(zhuān)業(yè)業(yè)題號(hào)123總分得分一、單選題(每題1分,共50分)1、假尿嘧啶核苷的尿嘧啶與核糖彼此連接的位置是AN-1-C-1'BN-3-C-1'CC-5-C-1'DC-4-C-1'EC-2-C-5'2、關(guān)于核苷酸的敘述,其中正確的是A核苷酸有的呈堿性有的呈酸性B核苷酸是兩性化合物C核苷酸是酸性化合物D核苷酸是堿性化合物E核苷酸是中性化合物3、關(guān)于TRNA分子的下述各項(xiàng),哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的錯(cuò)誤的A在RNA中它是最小的單鏈分子BTRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)通常為三葉草形C在RNA中TRNA含稀有堿基最多D它可在二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)一步盤(pán)曲為倒“L”形的三級(jí)結(jié)構(gòu)E以上都不對(duì)4、關(guān)于DNA分子大小的描述,其中錯(cuò)誤的錯(cuò)誤的是A有分支的高分子化合物B無(wú)分支的線(xiàn)狀大分子CDNA分子大于RNA分子D長(zhǎng)度、堿基對(duì)數(shù)目和分子量均可表示其大?。湃祟?lèi)DNA分子量的數(shù)量級(jí)為1095、濃度為50ΜG/ML的雙股DNA,在1CM光程內(nèi)的吸光值約為(裝訂線(xiàn)內(nèi)不要答題)3E在DNA轉(zhuǎn)錄中把轉(zhuǎn)錄的RNA鏈彼此連接起來(lái)14、在半保留復(fù)制中,如果DNA分子的雙股全都標(biāo)有放射性標(biāo)記,而在無(wú)放射性標(biāo)記的溶液中復(fù)制兩次,那么4個(gè)DNA分子的放射性分布應(yīng)該是A2個(gè)DNA分子都無(wú)放射性B4個(gè)DNA分子都有放射性C2個(gè)DNA分子的兩股都有放射性D4個(gè)DNA分子都無(wú)放射性E1個(gè)DNA分子的兩股都有放射性15、DNA復(fù)制中RNA引物的主要作用是A引導(dǎo)合成岡崎片段B作為合成岡崎片段的模板C為DNA合成原料DNTP提供附著點(diǎn)D激活DNA聚合酶E引導(dǎo)DDDP與DNA模板結(jié)合16、有關(guān)RNA合成的錯(cuò)誤敘述錯(cuò)誤敘述是ARNA鏈的延伸方向是5'→3'B只有在DNA存在時(shí),RNA聚合酶方可催化RNA合成CRNA聚合酶在催化轉(zhuǎn)錄時(shí),需要解鏈酶DRNA的堿基需要與DNA堿基互補(bǔ)E需要4種三磷酸核糖核苷做為原料17、細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所是ARRNAB核糖體CMRNADTRNAE以上都不對(duì)18、關(guān)于氨基酸活化過(guò)程的錯(cuò)誤敘述錯(cuò)誤敘述是A氨基酰TRNA合成酶對(duì)氨基酸和TRNA都有特異性B活化一個(gè)氨基酸凈消耗兩個(gè)高能磷酸鍵C活化氨基酸的氨基酰TRNA合成酶只有一種D活化反應(yīng)是不可逆的E這類(lèi)酶都是巰基酶19、任何蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中的氨基酸序列,根本上是取決于ADNA上的堿基順序BMRNA上的密碼子順序CTRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的順序D核糖體中RRNA的堿基順序E與以上順序都無(wú)關(guān)20、MRNA在蛋白質(zhì)生物合成中的重要性,在于它攜帶有A編碼多肽鏈的密碼子B氨基酸C識(shí)別密碼子的結(jié)構(gòu)D各種起始因子E終止因子21、關(guān)于密碼子的錯(cuò)誤描述錯(cuò)誤描述是A每一個(gè)密碼子由三個(gè)堿基組成
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    • 簡(jiǎn)介:所有試卷資料免費(fèi)下載所有試卷資料免費(fèi)下載CUNDUM整理1生物化學(xué)王鏡巖生物化學(xué)王鏡巖第三版第三版課后習(xí)題解答全課后習(xí)題解答全(上冊(cè)(上冊(cè)113章,下冊(cè)章,下冊(cè)1940章)章)第一章糖類(lèi)提要糖類(lèi)是四大類(lèi)生物分子之一,廣泛存在于生物界,特別是植物界。糖類(lèi)在生物體內(nèi)不僅作為結(jié)構(gòu)成分和主要能源,復(fù)合糖中的糖鏈作為細(xì)胞識(shí)別的信息分子參與許多生命過(guò)程,并因此出現(xiàn)一門(mén)新的學(xué)科,糖生物學(xué)。多數(shù)糖類(lèi)具有CH2ON的實(shí)驗(yàn)式,其化學(xué)本質(zhì)是多羥醛、多羥酮及其衍生物。糖類(lèi)按其聚合度分為單糖,1個(gè)單體;寡糖,含220個(gè)單體;多糖,含20個(gè)以上單體。同多糖是指僅含一種單糖或單糖衍生物的多糖,雜多糖指含一種以上單糖或加單糖衍生物的多糖。糖類(lèi)與蛋白質(zhì)或脂質(zhì)共價(jià)結(jié)合形成的結(jié)合物稱(chēng)復(fù)合糖或糖復(fù)合物。單糖,除二羥丙酮外,都含有不對(duì)稱(chēng)碳原子C或稱(chēng)手性碳原子,含C的單糖都是不對(duì)稱(chēng)分子,當(dāng)然也是手性分子,因而都具有旋光性,一個(gè)C有兩種構(gòu)型D和L型或R和S型。因此含N個(gè)C的單糖有2N個(gè)旋光異構(gòu)體,組成2N1對(duì)不同的對(duì)映體。任一旋光異構(gòu)體只有一個(gè)對(duì)映體,其他旋光異構(gòu)體是它的非對(duì)映體,僅有一個(gè)C的構(gòu)型不同的兩個(gè)旋光異構(gòu)體稱(chēng)為差向異構(gòu)體。單糖的構(gòu)型是指離羧基碳最遠(yuǎn)的那個(gè)C的構(gòu)型,如果與D甘油醛構(gòu)型相同,則屬D系糖,反之屬L系糖,大多數(shù)天然糖是D系糖FISCHERE論證了己醛糖旋光異構(gòu)體的立體化學(xué),并提出了在紙面上表示單糖鏈狀立體結(jié)構(gòu)的FISCHER投影式。許多單糖在水溶液中有變旋現(xiàn)象,這是因?yàn)殚_(kāi)漣的單糖分子內(nèi)醇基與醛基或酮基發(fā)生可逆親核加成形成環(huán)狀半縮醛或半縮酮的緣故。這種反應(yīng)經(jīng)常發(fā)生在C5羥基和C1醛基之間,而形成六元環(huán)吡喃糖如吡喃葡糖或C5經(jīng)基和C2酮基之間形成五元環(huán)呋喃糖如呋喃果糖。成環(huán)時(shí)由于羰基碳成為新的不對(duì)稱(chēng)中心,出現(xiàn)兩個(gè)異頭差向異構(gòu)體,稱(chēng)Α和Β異頭物,它們通過(guò)開(kāi)鏈形式發(fā)生互變并處于平衡中。在標(biāo)準(zhǔn)定位的HSWTH式中D單糖異頭碳的羥基在氧環(huán)面下方的為Α異頭物,上方的為Β異頭物,實(shí)際上不像HAWTH式所示的那樣氧環(huán)面上的所有原子都處在同一個(gè)平面,吡喃糖環(huán)一般采取椅式構(gòu)象,呋喃糖環(huán)采取信封式構(gòu)象。單糖可以發(fā)生很多化學(xué)反應(yīng)。醛基或伯醇基或兩者氧化成羧酸,羰基還原成醇;一般的羥基參與成脂、成醚、氨基化和脫氧等反應(yīng);異頭羥基能通過(guò)糖苷鍵與醇和胺連接,形成糖苷化合物。例如,在寡糖和多糖中單糖與另一單糖通過(guò)O糖苷鍵相連,在核苷酸和核酸中戊糖經(jīng)N糖苷鍵與心嘧啶或嘌呤堿相連。生物學(xué)上重要的單糖及其衍生物有GLCGAL,MANFRUGLCNACGALNACLFUCNEUNACSIAGLCUA等它們是寡糖和多糖的組分許多單糖衍生物參與復(fù)合糖聚糖鏈的組成,此外單糖的磷酸脂,如6磷酸葡糖,是重要的代謝中間物。蔗糖、乳糖和麥芽糖是常見(jiàn)的二糖。蔗糖是由ΑGLC和ΒFRU在兩個(gè)異頭碳之間通過(guò)糖苷鍵連接而成,它已無(wú)潛在的自由醛基,因而失去還原,成脎、變旋等性質(zhì),并稱(chēng)它為非還原糖。乳糖的結(jié)構(gòu)是GALΒ14GLC,麥芽糖是GLCΑ14GLC它們的末端葡萄搪殘基仍有潛在的自由醛基,屬還原糖。環(huán)糊精由環(huán)糊精葡糖基轉(zhuǎn)移酶作用于直鏈淀粉生成含67或8個(gè)葡萄糖殘基,通過(guò)Α14糖苷鍵連接成環(huán),屬非還原糖,由于它的特殊結(jié)構(gòu)被用作穩(wěn)定劑、抗氧化劑和增溶劑等。淀粉、糖原和纖維素是最常見(jiàn)的多糖,都是葡萄糖的聚合物。淀粉是植物的貯存養(yǎng)料,屬貯能多糖,是人類(lèi)食物的主要成分之一。糖原是人和動(dòng)物體內(nèi)的貯能多糖。淀粉可分直鏈淀粉和支鏈淀粉。直鏈淀粉分子只有Α14連鍵,支鏈淀粉和糖原除Α14連鍵外尚有Α16連鍵形成分支,糖原的分支程度比支鏈淀粉高。纖維素與淀粉、糖原不同,它是由葡萄糖通過(guò)Β14糖苷鍵連接而成的,這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)使纖維素具有適于作為結(jié)構(gòu)成分的物理特性,它屬于結(jié)構(gòu)多糖。所有試卷資料免費(fèi)下載所有試卷資料免費(fèi)下載CUNDUM整理3示的構(gòu)型RSA、ΑDFFRU;B、ΑLPGLC;C、R;D、S5L7葡萄糖的Α和Β異頭物的比旋ΑD20分別為1122和1870。當(dāng)ΑD吡喃葡糖晶體樣品溶于水時(shí),比旋將由1122降至平衡值5270。計(jì)算平衡混合液中Α和Β異頭物的比率。假設(shè)開(kāi)鏈形式和呋喃形式可忽略。Α異頭物的比率為365,Β異頭物為635解設(shè)Α異頭物的比率為X,則有1122X1871-X527解得X365,于是1-X635。6將500MG糖原樣品用放射性氰化鉀(K14CN處理,被結(jié)合的14CN正好是0193ΜMOL,另一500MG同一糖原樣品,用含3HCL的無(wú)水甲醇處理,使之形成還原末端的甲基葡糖苷。然后用高碘酸處理這個(gè)還原端成為甲基葡糖苷的糖原,新產(chǎn)生的甲酸準(zhǔn)確值是347ΜMOL。計(jì)算A糖原的平均相對(duì)分子質(zhì)量B分支的程度分支點(diǎn)A259106B1124解AMR050193106259106B34710616305113}葡萄糖在31℃水中平衡時(shí),Α吡喃葡糖和Β吡喃葡糖的相對(duì)摩爾含量分別為373和627。計(jì)算D葡萄糖在31℃時(shí)由Α異頭物轉(zhuǎn)變?yōu)棣愵^物的標(biāo)準(zhǔn)自由能變化。氣體常數(shù)R為8314JMOLK。ΔG0131KJMOL解ΔG0RTLNC2C18314300LN627373130KJMOL8竹子系熱帶禾本科植物,在最適條件下竹子生長(zhǎng)的速度達(dá)03MD高,假定竹莖幾乎完全由纖維素纖維組成,纖維沿生長(zhǎng)方向定位。計(jì)算每秒鐘酶促加入生長(zhǎng)著的纖維素鏈的單糖殘基數(shù)目。纖維素分子中每一葡萄糖單位約長(zhǎng)045NM。7800殘基S解032436000451097800殘基S9經(jīng)還原可生成山梨醇D葡萄醇的單糖有哪些L山梨糖D葡萄糖L古洛糖;D果糖10寫(xiě)出麥芽糖Α型、纖維二糖Β型、龍膽糖和水蘇糖的正規(guī)系統(tǒng)名稱(chēng)的簡(jiǎn)單形式,并指出其中哪些個(gè)是還原糖,哪些(個(gè)是非還原糖。解麥芽糖Α型GLCΑ1→4GLC纖維二糖Β型GLCΒ1→4GLC龍膽糖GLCΒ1→6GLC水蘇糖GALΑ1→6GALΑ1→6GLCΑ1←→Β2FRU11纖維素和糖原雖然在物理性質(zhì)上有很大的不同,但這兩種多糖都是14連接的D葡萄糖聚合物,相對(duì)分子質(zhì)量也相當(dāng),是什么結(jié)構(gòu)特點(diǎn)造成它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上的如此差別解釋它們各自性質(zhì)的生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)。答糖原是人和動(dòng)物餐間以及肌肉劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)最易動(dòng)用的葡萄糖貯庫(kù)。纖維素是植物的結(jié)構(gòu)多糖,是他們的細(xì)胞壁的主要組成成分。12革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁在化學(xué)組成上有什么異同肽聚糖中的糖肽鍵和糖蛋白中的糖
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    • 簡(jiǎn)介:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)考研習(xí)題集新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)考研習(xí)題集第一部份蛋白質(zhì)化學(xué)一、選擇題(從給出的幾個(gè)答案中選擇一個(gè)正確答案)1、含四個(gè)氮原子的氨基酸是A、賴(lài)氨酸B、精氨酸C、酪氨酸D、色氨酸E、組氨酸2、為獲得不變性的蛋白質(zhì),常用的方法有A、用三氯醋酸沉淀B、用苦味酸沉淀C、用重金屬鹽沉淀D、低溫鹽析E、常溫醇沉淀3、向血清中加入等容積的飽和硫酸銨液,可使A、白蛋白沉淀B、白蛋白和球蛋白都沉淀C、球蛋白原沉淀D、纖維蛋白原沉淀E、只有球蛋白沉淀4、由L谷氨酸,L半胱氨酸和甘氨酸構(gòu)成的三肽可能有幾種異構(gòu)體A、3B、6C、9D、10E、125、人體非必需氨基酸包括A、蛋氨酸B、酪氨酸C、亮氨酸D、苯丙氨酸E、異亮氨酸6、對(duì)于蛋白質(zhì)的溶解度,下列敘述中哪一條是錯(cuò)誤的A、可因加入中性鹽而增高B、在等電點(diǎn)時(shí)最大C、可因加入中性鹽降低D、可因向水溶液中加入酒精而降低E、可因向水溶液中加入丙酮降低7、某人攝取55克蛋白質(zhì),其中5克未被消化,經(jīng)過(guò)24小時(shí)后從尿中排出入20克N,他處于A、總氮平衡B、負(fù)氮平衡C、正氮平衡D、必須明確年齡而后判斷E、必然明確性別而后判斷8、芳香族必需氨基酸包括A、蛋氨酸B、酪氨酸C、亮氨酸D、苯丙氨酸E、脯氨酸9、含硫的必需氨基酸是A、半胱氨酸B、蛋氨酸C、蘇氨酸D、亮氨酸E、色氨酸10、蛋白質(zhì)變性時(shí)不應(yīng)出現(xiàn)的變化是A、蛋白質(zhì)的溶解度降低B、失去原有的生理功能C、蛋白的天然構(gòu)象破壞D、蛋白質(zhì)分子中各種次級(jí)鍵被破壞E、蛋白質(zhì)分子個(gè)別肽鍵被破壞11、轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是A、焦磷酸硫胺素B、磷酸吡哆醛C、硫辛酸D、四氫葉酸E、輔酶A12、一蛋白質(zhì)分子中一個(gè)氨基酸發(fā)生了改變,這個(gè)蛋白A、二級(jí)結(jié)構(gòu)一定改變B、二級(jí)結(jié)構(gòu)一定不變C、三級(jí)結(jié)構(gòu)一定改變D、功能一定改變E、功能不一定改變13、蛋白質(zhì)的變性伴隨有結(jié)構(gòu)上的變化是A、肽鏈的斷裂B、氨基酸殘基的化學(xué)修飾C、一些側(cè)鏈基因的暴露D、二硫鏈的打開(kāi)E、氨基酸排列順序的改變14、在電場(chǎng)中,蛋白質(zhì)泳動(dòng)速度取決于A、蛋白質(zhì)顆粒的大小B、帶凈電荷的多少C、蛋白質(zhì)顆粒的形狀D、(A)(B)E、(A)(B)(C)15、某蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為75,在PH60的條件下進(jìn)行電泳,它的泳動(dòng)方向是A、原點(diǎn)不動(dòng)B、向正極移動(dòng)C、向負(fù)極移動(dòng)D、向下移動(dòng)E、無(wú)法預(yù)測(cè)16、典型的Α螺旋中每圈含氨基酸殘基數(shù)為A、46個(gè)B、36個(gè)C、26個(gè)D、56個(gè)E、10個(gè)17、體內(nèi)腎上腺素來(lái)自哪種氨基酸A、色氨酸B、谷氨酸C、苯丙氨酸D、酪氨37、用葡聚糖凝膠作為凝膠過(guò)濾載體,進(jìn)行蛋白質(zhì)和多肽混合物含鹽的柱層析,在鹽的脫峰后面出現(xiàn)兩個(gè)峰,這說(shuō)明A、實(shí)驗(yàn)有差錯(cuò),峰是假象;B、是正?,F(xiàn)象,多數(shù)的蛋白質(zhì)和肽都在鹽洗脫后才洗脫。C、這是因?yàn)槠暇厶悄z吸附了蛋白質(zhì)和肽,使之在鹽峰之后洗脫38、典型的Α螺旋中每圈含氨基酸殘基數(shù)為A、36B、26C、46D、5439、協(xié)同效應(yīng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是A、蛋白質(zhì)分子的締合B、別構(gòu)作用C、蛋白質(zhì)分子被激活D、為單體蛋白質(zhì)40、生物體中的肽都是A、直接生物合成的B、先生物合成蛋白質(zhì),然后水解而得到C、有不同的合成途徑D、目前不清楚41、蛋白質(zhì)所含的天冬酰胺和谷氨酰胺兩種殘基是A、生物合成時(shí)直接從模板中譯讀而來(lái)B、蛋白質(zhì)合成以后經(jīng)專(zhuān)一的酶經(jīng)轉(zhuǎn)酰胺作用而成C、蛋白質(zhì)合成以后經(jīng)專(zhuān)一的酶氨解而成D、蛋白質(zhì)合成以后經(jīng)專(zhuān)一的轉(zhuǎn)氨酶作用成42、用SEPHAROSE4B柱層析來(lái)分離蛋白質(zhì),這是一種A、離子交換柱層析B、吸附柱層析C、分子篩凝膠過(guò)濾柱層析D、配柱層析43、如果要測(cè)定一個(gè)小肽的氨基酸順序,下列試劑中那一個(gè)你認(rèn)為最合適的A、茚三酮B、CNBRC、胰蛋白酶D、異硫氰酸苯酯44、從血紅蛋白酸水解所得到的氨基酸的手性光學(xué)性質(zhì)A、都是L型的B、都是左旋的C、并非都是L型的D、有D型也有L型的45、PAULY試劑是將對(duì)氨基苯磺酸的重氮化合物噴灑到濾紙上,定性檢測(cè)蛋白質(zhì)的試劑,有蛋白質(zhì)的地方顯橘紅色。它的生色反應(yīng)是發(fā)生在蛋白質(zhì)內(nèi)的A、色氨酸的吲哚環(huán)B、酪氨酸的酚羥基C、組氨酸的Α氨基D、半胱氨酸的琉基46、蛋白質(zhì)可與堿共熱而水解,雖然這個(gè)過(guò)程會(huì)破壞一些氨基酸,但它卻被常用來(lái)定量蛋白質(zhì)中的A、絲氨酸B、半胱氨酸C、蘇氨酸D、色氨酸47、與蛋白質(zhì)右手Α螺旋結(jié)構(gòu)完全鏡面對(duì)稱(chēng)的結(jié)構(gòu)是A、左手Α螺旋結(jié)構(gòu)B、與由D型氨基酸有相同順序形成的右手Α螺旋C、與由D型氨基酸有相同順序形成的左手Α螺旋D、D型氨基酸形成的Γ螺旋48、在PH7的水溶液里,在典型的球狀蛋白分子中,處于分子的內(nèi)部的氨基酸殘基經(jīng)常是A、GLUB、PHEC、THRD、ASN49、用凝膠過(guò)濾柱層析分離蛋白質(zhì)時(shí),一般講都是A、分子體積最大的蛋白質(zhì)首先洗脫B、分子體積最小的蛋白首先洗脫C、沒(méi)有吸附的蛋白質(zhì)首先洗脫D、不帶電荷地先洗脫50、有一個(gè)蛋白質(zhì)樣品,經(jīng)SDS凝膠電泳及盤(pán)狀電泳檢查均顯一條帶;N端分析及C端分析說(shuō)明它只有一個(gè)端基;等電聚焦電泳中呈現(xiàn)一深一淺的兩條帶,一般情況下,這蛋白質(zhì)樣品最可能是A、樣品不純B、樣品呈微不均一性C、樣品由幾種大小不同的亞基組成51、血紅蛋白和肌紅蛋白都含有血紅素輔基,前者輸氧,后者貯氧。之所以有這種差別,那是因?yàn)锳、二者的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)有相當(dāng)大的不同B、血紅蛋白分子中還含有二磷酸甘油化合物DPGC、血紅蛋白分子包含了四個(gè)亞基而肌紅蛋白只有一個(gè)亞基D、二者都有別構(gòu)效應(yīng)
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    • 簡(jiǎn)介:急性心肌損傷生物化學(xué)標(biāo)志物20090809來(lái)源檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)在線(xiàn)作者TBLAB瀏覽337次【字號(hào)大中小】1979年WHO提出急性急性心肌梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)①典型的持續(xù)的胸痛史,②典型的心電圖改變,包括ST段抬高和Q波出現(xiàn),③心肌酶學(xué)的改變。并認(rèn)為以上三項(xiàng)中的二項(xiàng)以上陽(yáng)性可診斷為急性心肌梗死。檢驗(yàn)地帶網(wǎng)一個(gè)理想的心肌損傷標(biāo)志物除了高敏感性和高特異性外,還應(yīng)該具有以下特性①主要或僅存在于心肌組織,在心肌中有較高的含量,在正常血液中不存在,可反映小范圍的損傷;②能檢測(cè)早期心肌損傷,且窗口期長(zhǎng);③能估計(jì)梗死范圍大小,判斷預(yù)后;④能評(píng)估溶栓效果。檢驗(yàn)地帶網(wǎng)一、歷史演變檢驗(yàn)地帶網(wǎng)1954年首先報(bào)告測(cè)定天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ASPARTATEAMINOTRANSFERASEAST)有助診斷AMI,1952年首先從牛心肌提純?nèi)樗崦摎涿窵ACTATEDEHYDROGENASELD,1955年用于診斷急性心肌梗死。1963年發(fā)現(xiàn)了肌酸激酶CREATINEKINASECK在急性心肌梗死時(shí)快速升高,1966年發(fā)表了CKMB在急性心肌梗死診斷中作用的報(bào)告,CK和LD的同工酶檢測(cè)提高了診斷的特異性。1979年WHO提出急性心肌梗死診斷標(biāo)準(zhǔn),血清AST、LD、CK以及同功酶組成血清心肌酶譜,在60、70年代在診斷AMI中起過(guò)重要的作用。1985年出現(xiàn)應(yīng)用單抗測(cè)定CKMB質(zhì)量CKMBMASS方法,CKMBMASS成為測(cè)定CKMB的首選方法。1989年診斷急性心肌梗死的心肌肌鈣蛋白T(CARDIACTROPONINTCTNT)試劑誕生,1992年CTNT首次用于不穩(wěn)定性心絞痛,同時(shí)出現(xiàn)了心肌肌鈣蛋白I(CARDIACTROPONINICTNI)。1994年CKMB亞單位開(kāi)始用于臨床病人的早期分篩,1996年發(fā)表大樣本的CTNT和CTNI的臨床應(yīng)用報(bào)告。近幾年內(nèi),國(guó)內(nèi)外一致認(rèn)為肌紅蛋白和CKMB亞型是急性心肌梗死早期標(biāo)志物,肌鈣蛋白是心肌損傷的確診標(biāo)志物。檢驗(yàn)地帶網(wǎng)二、傳統(tǒng)的心肌酶譜本文來(lái)自檢驗(yàn)地帶網(wǎng)(一)天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶COPYRIGHTAST在AMI發(fā)生后6~12H升高,24~48H達(dá)峰值,持續(xù)到第5天或一周降低。由于AST不具備組織特異性,血清單純AST升高不能診斷心肌損傷。當(dāng)今學(xué)術(shù)界已不主張AST用于急性心肌梗死診斷。本文來(lái)自檢驗(yàn)地帶網(wǎng)(二)乳酸脫氫酶(LD)及其同工酶以前和36H以后敏感度較低,只有CKMB亞型可用于急性心肌梗死早期診斷。③對(duì)心肌微小損傷不敏感。COPYRIGHTCK同工酶的特異性和敏感性高于總CK,目前臨床傾向用CKMB替代CK作為心肌損傷的常規(guī)檢查項(xiàng)目。三、心肌肌鈣蛋白檢驗(yàn)地帶網(wǎng)(一)總肌鈣蛋白檢驗(yàn)地帶網(wǎng)1肌鈣蛋白TN的特性TN復(fù)合體存在于各種骨骼肌胞漿的細(xì)絲中,由鈣介導(dǎo)調(diào)節(jié)肌肉收縮。平滑肌無(wú)肌鈣蛋白,由鈣調(diào)素調(diào)節(jié)平滑肌收縮。1973年將與鈣結(jié)合的部分稱(chēng)肌鈣蛋白C(TNC)含抑制因子部分稱(chēng)為肌鈣蛋白I(TNI)和原肌球蛋白結(jié)合部分稱(chēng)為肌鈣蛋白TTNT。COPYRIGHT2肌鈣蛋白的作用機(jī)理檢驗(yàn)地帶網(wǎng)由于CTN窗口期長(zhǎng)于LD,在診斷發(fā)現(xiàn)較遲的急性心肌梗死時(shí)可替代LD。和CKMB比較,正常人血清中幾乎測(cè)不到CTN,因而它對(duì)急性心肌梗死有較高的分辨能力。CTN是心肌特有的,因而特異性高。在懷疑急性心肌梗死的病人,一般在入院,和入院后3H、6H、9H各測(cè)一次CTN和肌紅蛋白。COPYRIGHT(二)心肌肌鈣蛋白T1心肌肌鈣蛋白TCTNT的檢測(cè)近年發(fā)現(xiàn)應(yīng)用CTNT對(duì)不穩(wěn)定心絞痛病人監(jiān)測(cè)可以發(fā)現(xiàn)一些輕度和小范圍心肌損傷。檢驗(yàn)地帶網(wǎng)2CTNT的臨床意義COPYRIGHT表11–1不同采樣時(shí)間CTNI和CKMB診斷MI敏感度檢驗(yàn)地帶網(wǎng)心臟標(biāo)志物發(fā)作后0~4H5~11H12~23H24~47HN74N123N178N108
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    • 簡(jiǎn)介:0生物化學(xué)習(xí)題冊(cè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系生物化學(xué)與分子生物學(xué)系編南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院氨基酸與蛋白質(zhì)一、填空1在組成蛋白質(zhì)的二十種氨基酸中,是亞氨基酸,當(dāng)它在螺旋行進(jìn)中出現(xiàn)時(shí),可使螺旋。2LYS的COOH、NH3+的PK值分別為218和895,該氨基酸的PI值為974,則R基團(tuán)的PK值為,它是由基團(tuán)的解離引起的。3GLU的PK1COOH219、PK2R基團(tuán)425、PK3NH3+967,該氨基酸的PI值為。4蛋白質(zhì)在波長(zhǎng)為NM的紫外光中有明顯的吸收峰,這是由、和三種氨基酸殘基所引起的。5有一混合蛋白樣品,含A、B、C、D四種蛋白質(zhì),其PI分別為49、52、66和78,若將此樣品液置于PH70的緩沖液中電泳,向陰極移動(dòng)的有。6某蛋白質(zhì)的某一區(qū)段含有15個(gè)氨基酸殘基,這些殘基之間均可形成如右圖所示的氫鍵。27纖維蛋白質(zhì);8肽單位答案一填空1PRO中斷21053氨基33224280TYRTRPPHE5D61Α螺旋2252113疏水二選擇題1B2ACD3D4B5A6D7A8DE核酸化學(xué)一、名詞解釋1核酸的增色效應(yīng);2核酸的TM值;3GAFF定則;4DNA雙螺旋;5拓?fù)洚悩?gòu)酶;6核小體;7退火;8限制性?xún)?nèi)切酶;9反向重復(fù)序列;10基因二、填空1提純的結(jié)核分枝桿菌DNA,其腺嘌呤含量為151,則鳥(niǎo)嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶的含量依次是、、。2關(guān)于TRNA的結(jié)構(gòu)及功能組成TRNA的核苷酸大約個(gè),TRNA3′末端三個(gè)核苷酸順序是;二級(jí)結(jié)構(gòu)呈形;三級(jí)結(jié)構(gòu)呈形,其
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    • 簡(jiǎn)介:組織相容性復(fù)合體MHC能引起強(qiáng)而迅速的排斥反應(yīng)的抗原稱(chēng)為主要組織相容性抗原,其編碼基因是一組緊密連鎖的基因群,稱(chēng)為主要組織相容性復(fù)合體。組蛋白IHISTONES是保守的DNA結(jié)合蛋白,是染色體的結(jié)構(gòu)蛋白,分為HL、H2A、H2B、H3及H4五種,與DNA共同組成真核生物染色質(zhì)的基本單位核小體。指導(dǎo)RNAGUIDERNA原生動(dòng)物及植物線(xiàn)粒體中進(jìn)行RNA編輯所需的RNA序列,是與已正確編輯的RNA序列互補(bǔ)的一小段RNA,被用來(lái)作為向未經(jīng)編輯的RNA中插入堿基的模板。阻遏蛋白R(shí)EPRESSL是指轉(zhuǎn)錄調(diào)控系統(tǒng)中調(diào)節(jié)基因表達(dá)產(chǎn)物豐度的蛋白質(zhì),其作用部位往往是操縱子的操縱區(qū),起著阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的作用。增強(qiáng)子ENBANCER能提高轉(zhuǎn)錄起始效率的序列被稱(chēng)為增強(qiáng)子或強(qiáng)化子。增強(qiáng)子可位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的5’或3’末端,而且一般與所調(diào)控的靶基因的距離無(wú)關(guān)。自主復(fù)制序列AUTONOMOUSLYREPLICATINGSEQUENCESARS是酵母DNA復(fù)制的起點(diǎn),長(zhǎng)約150BP左右,包括數(shù)個(gè)復(fù)制起始必需的保守區(qū)。不同ARS序列的共同特征是有一個(gè)被稱(chēng)為A區(qū)的LLBP的保守序列。原位雜交INSITUHYBRIDIZATIONISH是用標(biāo)記的核酸探針,經(jīng)放射自顯影或非放射檢測(cè)體系,在組織、細(xì)胞及染色體水平上對(duì)核酸進(jìn)行定位和相對(duì)定量研究的一種手段。通常分為RNA原位雜交和染色體原位雜交兩大類(lèi)。轉(zhuǎn)座子TRANSPOSONTN是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。參與轉(zhuǎn)座子易位及DNA鏈整合的酶稱(chēng)為轉(zhuǎn)座酶。轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)TRANIONINITIATIONSITE是指與新生RNA鏈第一個(gè)核苷酸相對(duì)應(yīng)DNA鏈上的堿基位點(diǎn),通常為嘌呤。常把起點(diǎn)前,即5,末端的序列稱(chēng)為上游(UPSTREAM),而把其后面即3’末端的序列稱(chēng)為下游(DOWNSTREAM)。轉(zhuǎn)錄單元TRANIONUNIT是一段可被RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄成一條連續(xù)MRNA鏈的DNA包括轉(zhuǎn)錄起始和終止信號(hào)。一個(gè)簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)錄單位只攜帶合成種蛋白的信息,復(fù)合轉(zhuǎn)錄單位可攜帶不止一種蛋白質(zhì)分子的信息。移碼突變FRAMESHIFTMUTATION指一種突變,其結(jié)果可導(dǎo)致核苷酸序列與相對(duì)應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列之間的正常關(guān)系發(fā)生改變。移碼突變是由刪去或捕入一個(gè)核苷酸的“點(diǎn)突變”構(gòu)成的,突變位點(diǎn)之前的密碼子不發(fā)生改變,但突變位點(diǎn)以后的所有密碼了都發(fā)生變化,編碼的氨基酸出現(xiàn)錯(cuò)誤。野生型和突變型WILDTYPEMUTANT生物學(xué)上把所研究的基因位點(diǎn)未發(fā)生改變的生物個(gè)體稱(chēng)為野生型,把所研究的基因位點(diǎn)發(fā)生遺傳突變的生物個(gè)體稱(chēng)為突變型。因此,野生型和突變型是相對(duì)的,甚至可能根據(jù)所研究目的基因的不同而發(fā)生轉(zhuǎn)換。信號(hào)識(shí)別蛋白SIGNALRECOGNITIONPROTEINSRP由6種緊密結(jié)合的信號(hào)識(shí)別蛋白質(zhì)與一個(gè)長(zhǎng)約300核苷酸的7SRNA分子形成的核糖核蛋白顆粒,能識(shí)別核糖體上新合成多肽鏈的前導(dǎo)序列并與其結(jié)合,將核糖體、新合成肽鏈及信號(hào)識(shí)別顆粒導(dǎo)向內(nèi)質(zhì)網(wǎng),使肽鏈的翻譯及轉(zhuǎn)運(yùn)同時(shí)進(jìn)行。同工TRNAICOGNATETRNA指幾個(gè)代表相同氨基酸、能夠被一個(gè)特殊的氨酰TRNA合成酶識(shí)別的TRNA。小分子干擾核糖核酸SIRNA,SHTINTERFERINGRNAS是長(zhǎng)度為2125個(gè)核苷酸的雙鏈小分子RNA它是引發(fā)轉(zhuǎn)錄后基因沉默中序列特異性的RNA降解的重要中間媒介。SIRNA具有5’端磷酸基和3’端羥基,兩條鏈的3’端各有兩個(gè)堿基突出于末端。在轉(zhuǎn)錄后沉默和RNAI的過(guò)程中,SIRNA作為識(shí)別目標(biāo)基因的引導(dǎo)物。肽酰TRNAPEPTIDYTRNA指在蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程中,在肽鍵合成之后,連接在新生肽鏈上的TRNA分子。順?lè)醋覦STRON功能基因,意為通過(guò)順式(基因序列)及反式(所編碼的蛋白質(zhì))試驗(yàn)所確定的一個(gè)遺傳學(xué)單位。細(xì)菌人工染色體BAC科學(xué)家用細(xì)菌的F質(zhì)粒及其調(diào)控基因構(gòu)建的細(xì)菌染色體克隆載體,常用來(lái)克隆150KB左右大小的DNA片段。細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因CONC即被激活的原癌基因,能夠轉(zhuǎn)化NTH3T3成纖維細(xì)胞或其他靶細(xì)胞成為腫瘤細(xì)胞的基因,也稱(chēng)癌基因(ONCOGENE)。孟德?tīng)朑REGMEND奧地利修道士,經(jīng)典遺傳學(xué)創(chuàng)始人,他的豌豆雜交試驗(yàn)可能是遺傳學(xué)歷史上最具有傳奇色彩并且最引人人勝的研究成果,是遺傳學(xué)的奠基石基因組DNA文庫(kù)CDNAGENOMICDNALIBRARY是某一生物體全部或部分基因的集合。將某個(gè)生物的基因組DNA或CDNA片段與適當(dāng)載體在體外重組后,轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞,所得的菌落或噬菌體的集合即為該生物的基因組DNA或CDNA文庫(kù)。核定位序列NUCLEARLOCALIZATLONSEQUENCENLS蛋白質(zhì)中的一種常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)域,通常為一短的氨基酸序列,它能與人核載體相互作用,將蛋白質(zhì)運(yùn)進(jìn)細(xì)胞核內(nèi)。UL厘摩CENTIMGAN重組頻率的測(cè)量單位OL厘摩相當(dāng)于在一個(gè)世代巾,由于交換而使一個(gè)遺傳位點(diǎn)標(biāo)記從第二個(gè)遺傳位點(diǎn)標(biāo)記中分離出來(lái)的可能性是L。在人類(lèi)基因組中,L厘摩大約相當(dāng)于100萬(wàn)個(gè)堿基對(duì)。高速泳動(dòng)蛋白HMG蛋白HIGHMOBILITYGROUPPROTEIN是一類(lèi)能用低鹽溶液抽提、能溶于2的三氯乙酸、相對(duì)分子質(zhì)量在30XL04以下的非組蛋白。因其相對(duì)分子質(zhì)量小、在凝膠電泳中遷移速度快而得名。分為HMGI和HMG2兩大類(lèi)。這類(lèi)蛋白的特點(diǎn)是能與DNA結(jié)合,也能與H作用,但與DNA的結(jié)合并不牢固,可能與DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有關(guān),在DNA復(fù)制和重組中起重要作用?;蚯贸鼼ENEKNOCKOUT針對(duì)一個(gè)序列已知但功能未知的基因,從DNA水平上設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),徹底破壞該基因的功能或消除其表達(dá)機(jī)制,從而推測(cè)該基因的生物學(xué)功能。復(fù)制起始點(diǎn)REPLICATIONIGIN是DNA鏈上獨(dú)特的具有起始DNA復(fù)制功能的堿基順序。大腸桿菌的復(fù)制起點(diǎn)包括IC和IH,IC是首選的復(fù)制起點(diǎn),而IH是在RNASEH缺失突變株巾發(fā)現(xiàn)的一系列復(fù)制起點(diǎn)。翻譯一轉(zhuǎn)運(yùn)同步機(jī)制COTRANSLATIONALTRANSLOCATION某個(gè)蛋白質(zhì)的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)是同時(shí)發(fā)生的。翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制POSTTRANSLATIONALTRANSLOCATION蛋白質(zhì)從核糖體上釋放后才發(fā)生轉(zhuǎn)運(yùn)。單核苷酸的多態(tài)性SINGLENUCLEOTIDEPOLYMPHISM,SNPS單核甘酸多態(tài)性指在基因組中不同個(gè)體的DNA序列上的單個(gè)堿基差異。同一位置上的每個(gè)堿基類(lèi)型叫做一個(gè)等位位點(diǎn)。二組分系統(tǒng)TWOCOMPONENTSYSTEM由位于細(xì)胞質(zhì)膜上的傳感蛋白(該蛋白常常具有激酶活性)以及位于細(xì)胞質(zhì)中的應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白組成。傳感激酶常在受到膜外環(huán)境信號(hào)刺激時(shí)被磷酸化,并將其磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白上,使該磷酸化的應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白成為阻遏物或誘導(dǎo)蛋白,通過(guò)對(duì)操縱子的阻遏或激活作用調(diào)控下游基因表達(dá)。多順?lè)醋覯RNAPOLYCISTRONICMESSENGERRNA一種能作為兩種或多種多肽鏈翻譯模板的信使RNA由DNA鏈卜的鄰近順?lè)醋铀缍?。重疊基因OVERLAPPINGGENENESTEDGENE具有部分共用核苷酸序列的基因,即同一段DNA攜帶了兩種或兩種以上不同蛋白質(zhì)的編碼信息。重疊的部分可以在調(diào)控區(qū),也可以在結(jié)構(gòu)基因區(qū)。常見(jiàn)于病毒和噬菌體基因組中。單核苷酸多態(tài)性SNPSINGLENUCLEOTIDEPOLYMPHISM指基因組DNA序列中由于單個(gè)核苷酸(A,T,C和G)的突變而引起的物種多態(tài)性。TDNA根癌農(nóng)桿菌TI(TUMINDUCING)或RI(ROOTINDUCING)質(zhì)粒中的一段DNA序列,可以從農(nóng)桿菌巾轉(zhuǎn)移并穩(wěn)定整合到植物基因組中,是植物分子生物學(xué)中廣泛應(yīng)用的遺傳轉(zhuǎn)化載體。P轉(zhuǎn)座子PELEMENT足一種能夠誘發(fā)雜種不育(HYBRIDDYSGENESIS)的果蠅轉(zhuǎn)座子,果蠅中幾乎所有的雜種不育都是由于P轉(zhuǎn)座子插入基因組W位點(diǎn)而引起的N所有P轉(zhuǎn)座子兩翼都有31個(gè)堿基的倒置重復(fù)序列,P轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座導(dǎo)致靶DNA復(fù)制產(chǎn)生8堿基正向重復(fù)序列。插入序列IONALSEQUENCEIS是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子,是細(xì)菌的一小段可轉(zhuǎn)座元件,它不含有任何宿主基因而常被稱(chēng)為插入序列,它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。SD序列SHINEDALGARNOSEQUENCE存在于原核生物起始密碼子AUG上游7一12個(gè)核苷酸處的一種47個(gè)核苷酸的保守片段,它與16SRRNA3,端反向互補(bǔ),所以可將MRNA的AUG起始密碼了置于核糖體的適當(dāng)位置以便起始翻譯作用。根據(jù)首次識(shí)別其功能意義的科學(xué)家命名。GUAG法則GUAGRULE多數(shù)細(xì)胞核MRNA前體中內(nèi)含子的5,邊界序列為GU,3’邊界序列為AGC因此,GU表示供體銜接點(diǎn)的5,端,AG代表接納體銜接點(diǎn)的3’端序列。習(xí)慣上,把這種保守序列模式稱(chēng)為GUAG法則。RNA的剪接RNASPLIANG從MRNA前體分子中切除被稱(chēng)為內(nèi)含子(INTRON)的非編碼區(qū),并使基因中被稱(chēng)為外顯子(EXON)的編碼區(qū)拼接形成成熟MRNA的過(guò)程就稱(chēng)為RNA的剪接。
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    • 簡(jiǎn)介:廈門(mén)大學(xué)2003年生物化學(xué)考研試題一填空題(共30分)1蔗糖是有一分子()和一分子()組成,它們之間是通過(guò)()鍵相連。2核苷三磷酸在代謝中起重要的作用。()是能量和磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移的重要物質(zhì),()參與單糖的轉(zhuǎn)變和多糖的合成,()參與卵磷脂的合成,()供給肽鏈合成時(shí)所需要的能量。3將RNA變性后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上再進(jìn)行雜交,此技術(shù)稱(chēng)為()印跡法。4給動(dòng)物食用3H標(biāo)記的(),可使DNA帶有放射行,而RNA不帶放射性。5酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的雙倒數(shù)作圖(LINEWEAVERBURK作圖法),得到的直線(xiàn)在縱軸上的截距為(),橫軸上的截距為()。6核酸復(fù)制時(shí),DNA聚合酶沿模板鏈()方向移動(dòng);轉(zhuǎn)錄時(shí),RNA聚合酶沿模板鏈()方向移動(dòng);翻譯時(shí),核糖體沿模板鏈()方向移動(dòng)。7糖酵解的關(guān)鍵控制酶是(),果糖-2,6-二磷酸的作用是()糖酵解。8細(xì)菌的DNA連接酶以()為能量來(lái)源,動(dòng)物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶以()為能源。9血紅蛋白與氧結(jié)合的過(guò)程呈現(xiàn)()效應(yīng),是通過(guò)血紅蛋白的()現(xiàn)象實(shí)現(xiàn)的。10。雙鏈DNA中,若()含量多,則TM值高。11。SNRNA主要參與()的加工成熟,真核生物TRNA的加工成熟C。分子極性的不同D。溶解度的不同5轉(zhuǎn)氨酶中以何種氨基酸與-酮酸的轉(zhuǎn)氨酶最為重要A。甘氨酸B。蛋氨酸C。絲氨酸D。谷氨酸6吖啶染料可以引起下列哪種突變A。轉(zhuǎn)換B。顛換C。移碼突變D。嘧啶二聚體7RNA經(jīng)NAOH水解,其產(chǎn)物是哪一種A。3′-核苷酸B。5′-核苷酸C。2′-核苷酸D。3′-核苷酸和2′-核苷酸8嘌呤霉素抑制蛋白質(zhì)生物合成是由于它是A。核糖體失活蛋白B。核糖核酸酶C。氨酰TRNA的類(lèi)似物D。RNA聚合酶的抑制劑
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    • 簡(jiǎn)介:36第四章第四章內(nèi)分泌系統(tǒng)生物化學(xué)內(nèi)分泌系統(tǒng)生物化學(xué)激素HMONES是內(nèi)分泌腺或內(nèi)分泌細(xì)胞所分泌的一類(lèi)化學(xué)物質(zhì),這些物質(zhì)對(duì)一定的組織或細(xì)胞靶組織或靶細(xì)胞發(fā)揮特有的作用,產(chǎn)生特定的生物學(xué)效應(yīng),調(diào)節(jié)體內(nèi)代謝。激素是一類(lèi)重要的細(xì)胞外信息信號(hào)分子,屬“第一信使”?,F(xiàn)在已知的激素約有數(shù)十種之多,本章重點(diǎn)討論的有下列幾類(lèi)甲狀腺激素、腎上腺髓質(zhì)及皮質(zhì)激素、胰島的激素、垂體激素以及下丘腦激素等。主要介紹它們的化學(xué)本質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系、生物合成和降解以及對(duì)代謝的作用等。同時(shí)還介紹兩類(lèi)較新發(fā)現(xiàn)的激素心鈉素和內(nèi)皮素。性激素、前列腺素、松果體激素等將在以后有關(guān)學(xué)科中討論。第一節(jié)第一節(jié)甲狀腺激素甲狀腺激素甲狀腺分泌的激素總稱(chēng)甲狀腺激素,主要為T(mén)3和T4,T4又稱(chēng)甲狀腺素THYROXME,它們都是含碘的酪氨酸衍生物,見(jiàn)表41。注MIT3MONOIODOTYROSINE,DIT3,5DLIODOTYROSI33,5,3’TRIODOTHYRONINE,RT3,REVERSET3,T43,5,3,5TETRAIODOTHYRONINE,THYROXINC一、生物合成一、生物合成甲狀腺激素在甲狀腺濾泡內(nèi)合成,合成原料是酪氨酸和碘。但酪氨酸并非游離的,而一種特殊的蛋白表4-1人甲狀腺中含碘的酪氨酸衍生物人甲狀腺中含碘的酪氨酸衍生物38于濾泡腔中細(xì)胞外,此與其他激素多儲(chǔ)存于細(xì)胞內(nèi)有所不同。另一點(diǎn)不同的是甲狀腺激素的儲(chǔ)存量很大,可供機(jī)體利用50~120天之久,因此當(dāng)應(yīng)用抑制甲狀腺激素合成的藥物時(shí),用藥時(shí)間必需較長(zhǎng)才能奏效。二、分泌、運(yùn)輸及降解二、分泌、運(yùn)輸及降解一分泌儲(chǔ)存于濾泡腔中的甲狀腺球蛋白在促甲狀腺激素TSH的刺激下,首先通過(guò)胞飲作用由頂端膜吞入細(xì)胞與溶酶體融合,溶酶體中有蛋白酶,將甲狀腺球蛋白水解,釋出T3、T4及MIT、DKI,其中T及T4擴(kuò)散入血液,而MIT及DKI則經(jīng)脫碘酶作用脫碘,脫去的碘可以再用于合成甲狀腺激素。正常成人每日分泌50~150ΜG甲狀腺激素,主要為T(mén)3、T4很少。二運(yùn)輸血漿中T4含量平均84ΜG/100ML,T3平均012ΜG/100ML。T4和T3的絕大部分與血漿中的某些蛋白質(zhì)結(jié)合表42。由于血漿蛋白質(zhì)結(jié)合的含碘物主要是T4和T3,因此測(cè)定血漿中與蛋白質(zhì)結(jié)合的碘的量可以反映甲狀腺激素的量,稱(chēng)為蛋白結(jié)合碘PROTEINBOUNDIODINEPBI,正常人PBL4~8/ΜG/100ML,甲亢時(shí)升高,甲減時(shí)降低。三降解T3和T4由血循環(huán)運(yùn)送至各組織細(xì)胞中發(fā)揮作用,T3的生物活性較大,是T4的3~5倍,T3被認(rèn)為是甲狀腺激素的活性形式。T4進(jìn)入外周組織后約80%轉(zhuǎn)變?yōu)門(mén)3還有少雖RT3。T4和T3在外周組織中發(fā)揮作用后,脫氨酸降解為四碘甲腺乙酸和三碘甲腺乙酸而自尿中排出體外。還有部分T4和T3在肝臟中與葡萄糖醛酸結(jié)合后自膽汁排入腸道。三、對(duì)代謝的作用三、對(duì)代謝的作用一促進(jìn)能量代謝甲狀腺激素能促進(jìn)心肌、骨骼肌和腎臟等肺組織除外細(xì)胞膜上NA、KATP酶的活性,于是ATP分解加快,ADP/ATP比值升高,刺激線(xiàn)粒體呼吸加強(qiáng),耗氧量增加,基礎(chǔ)代謝率BASICMETABOLICRATE,BMR增高、二蛋白質(zhì)代謝生理劑量下,甲狀腺激素能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,對(duì)發(fā)揮生長(zhǎng)激素的加速蛋白質(zhì)合成的作用是必要的。幼年時(shí)甲狀腺激素缺少可致呆小癥,生長(zhǎng)激素缺少則致侏儒癥。超生理大劑量的甲狀腺激素則促進(jìn)蛋白質(zhì)分解代謝,因此甲亢患者肌肉萎縮、身體消瘦。三糖代謝甲狀腺激素促進(jìn)①小腸中單糖葡萄糖、半乳糖的吸收。②肝糖原的分解。因此甲狀腺激素促使血糖升高。四脂代謝1甲狀腺激素能增強(qiáng)脂肪組織對(duì)腎上腺素和胰高血糖素的敏感性,此時(shí)脂肪細(xì)胞中CAMP濃度增高,促使脂肪酶活性升高,于是脂肪動(dòng)員增加,血漿游離脂肪酸FREEFATTYACIDS,F(xiàn)FA濃度升高。2甲狀腺激素對(duì)膽固醇的合成與轉(zhuǎn)化均有促進(jìn)作用,但后者大于前者。即主要加速膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懕?-2血漿中與甲狀腺激素結(jié)合的蛋白質(zhì)血漿中與甲狀腺激素結(jié)合的蛋白質(zhì)
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    • 簡(jiǎn)介:中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)碩士入學(xué)生物化學(xué)2002年一是非題請(qǐng)將正確的敘述用““表示,錯(cuò)誤的用““表示,每小題1分,共20分。1一個(gè)化合物如果能和茚三酮反應(yīng)生成紫色,說(shuō)明這個(gè)化合物是氨基酸、肽和蛋白質(zhì)。2雖然在非哺乳動(dòng)物中出現(xiàn)自由的D氨基酸和由D氨基酸構(gòu)成的多肽。但在哺乳動(dòng)物中最近顯示也含有某些自由的D氨基酸。3CNBR能分裂GLYMETPRO三肽。4雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)特有的反應(yīng),所以二肽也有雙縮脲反應(yīng)。5蛋白質(zhì)的亞基或稱(chēng)亞單位和肽鏈?zhǔn)峭x的。6測(cè)定變構(gòu)酶的分子量可以用十二烷基硫酸鈉SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。7蛋白質(zhì)所含的ASN和GLN兩種殘基是生物合成時(shí)直接從模板中翻譯來(lái)的。8若一核酸樣品在某溫度范圍內(nèi),對(duì)260NM的光吸收增加30%左右,則這個(gè)核酸是雙螺旋結(jié)構(gòu)。9溶液的PH值與核酸的紫外吸收無(wú)關(guān)。10DNA連接酶能將兩條游離的DNA單鏈連接起來(lái)。11酶促反應(yīng)的初速度與底物濃度無(wú)關(guān)。12如果加入足夠的底物,即使存在非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,酶促反應(yīng)也能達(dá)到正常的VMAX。13就光合作用的總反應(yīng)來(lái)說(shuō),葡萄糖分子中的氧原子最終來(lái)自水。14丙酮酸脫氫酶復(fù)合物催化底物脫下的氫最終是交給NAD生成NADHH的。15從乙酰COA合成1分子軟脂酸,必須消耗8分子ATP。16磷脂酸是脂肪和磷脂合成的中間物。17CTP參加磷脂生物合成,UTP參加糖原生物合成,GTP參加蛋白質(zhì)生物合成。18在ECOLI中,DNA連接酶所催化的反應(yīng)需NAD為反應(yīng)提供磷酸鍵能。19蛋白質(zhì)合成起始以后,核糖體中每形成一個(gè)肽鍵都需要消耗兩個(gè)GTP成GDPPI。20寡酶素對(duì)氧消耗的抑制作用可被2,4二硝基苯酚解除。二選擇題下列有任選編碼項(xiàng)目,請(qǐng)將正確項(xiàng)目的編號(hào)寫(xiě)出來(lái)。每小題1分,共35分。1蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定方法有哪些方法A直接法B間接法C質(zhì)譜法D連接法2一個(gè)谷氨酸溶液,用5ML的1M的NAOH來(lái)滴定,溶液中的PH從10上升到70,下列數(shù)據(jù)中哪一個(gè)接近于該溶液中所含谷氨酸的毫摩爾數(shù)A15B30C60D123蛋白質(zhì)典型的Α螺旋是什么A2610B310C3613D44164每分子血紅蛋白可結(jié)合氧的分子數(shù)是多少A1B2C3D45免疫球蛋白是一種什么蛋白A糖蛋白B脂蛋白C鐵蛋白D核蛋白6煤氣中毒主要是因?yàn)槊簹庵械腃O起了什么作用A抑制巰基酶的活性,使巰基酶失活。B抑制了膽堿酯酶活性,使乙酰膽堿堆積,引起神經(jīng)中毒的癥狀。C和血紅蛋白結(jié)合后,血紅蛋白失去了運(yùn)輸氧的功能,使患者因缺氧而死。D抑制了體內(nèi)所有酶的活性,使代謝反應(yīng)不能正常進(jìn)行。7根據(jù)WATSONCRICK模型,求每一微米DNA雙螺旋含核苷酸的平均數(shù)是多少A25400B2540C29411D29418某DNA分子的AT含量為90%,其TM值是多少一部位進(jìn)入呼吸鏈ANADBFMNCCYTAA3D以上都不是26關(guān)于氧化磷酸化機(jī)制的敘述錯(cuò)誤的是什么AH不能自由通過(guò)線(xiàn)粒體內(nèi)膜B電子并不排至內(nèi)膜外C線(xiàn)粒體內(nèi)膜胞液一面帶正電荷D線(xiàn)粒體內(nèi)膜胞液一面PH比基質(zhì)一面高27以NADP為輔酶的酶有哪些A蘋(píng)果酸脫氫酶B異檸檬酸脫氫酶C蘋(píng)果酸酶D葡萄糖6磷酸脫氫酶28軟脂酰COA經(jīng)過(guò)一次Β氧化,其產(chǎn)物通過(guò)TCA循環(huán)和氧化磷酸化產(chǎn)生ATP的數(shù)目是多少A5B9C12D1429原核生物的DNA聚合酶的特點(diǎn)是什么ADNA聚合酶I由7種,9個(gè)亞單位組成BDNA聚合酶Ⅱ有最強(qiáng)的核酸外切酶活性CDNA聚合酶Ⅲ二聚體是真正起復(fù)制作用的酶D用4種脫氧核苷作底物30用3HUTP作同位素?fù)饺雽?shí)驗(yàn),放射性可出現(xiàn)于什么地方A線(xiàn)粒體DNAB核膜C,核仁DHNRNA31G蛋白的活化包括哪些AGTP取代GDP連接到Α亞基上BGTP-Α亞基與ΒR復(fù)合物分離CΑ亞基連接的GTP緩慢水解限制激素活性DΑ亞基的GTPASE的活性表現(xiàn)32通過(guò)控制基因活性,即控制轉(zhuǎn)錄來(lái)發(fā)揮作用的物質(zhì)是什么A甾醇類(lèi)激素B甲狀腺素C125OH2D3D視黃酸33RAS蛋白是GTP連接的蛋白。RAS蛋白的特點(diǎn)是什么A最早發(fā)現(xiàn)的小G蛋白B質(zhì)膜內(nèi)側(cè)蛋白C主要受酪氨酸蛋白激酶調(diào)節(jié)D具有很低的GTPASE活性34在蛋白質(zhì)合成中不消耗高能磷酸鍵的步驟是什么A移位B氨基酸活化C肽鍵的形成D氨基酰TRNA進(jìn)入A位點(diǎn)35甘油二脂是什么化合物A脂肪合成或降解的中間產(chǎn)物B磷脂酶C作用于PIP2的產(chǎn)物是第二信使C磷脂酶C作用于卵磷脂的產(chǎn)物D磷脂酶A作用于磷脂的產(chǎn)物三填空每小題1分,共30分。1如果GGC是MRNA5ˋ→3ˋ方向中的密碼子,其TRNA的反密碼子5ˋ→3ˋ方向是什么2蛋白質(zhì)生物合成時(shí)肽?;D(zhuǎn)移酶活性存在于核糖體的什么地方3ECOLI合成的所有未修飾的多肽鏈,其N(xiāo)端應(yīng)是哪種氨基酸4四環(huán)素阻斷原核生物多肽鏈合成的機(jī)制是什么5DNA上某段堿基順序?yàn)?ˋACTAGTCAG3ˋ,轉(zhuǎn)錄后的MRNA上相應(yīng)的堿基順序是什么6DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶由數(shù)個(gè)亞單位組成,其核心酶的組成是什么7RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄,其底物是什么8DNA以半保留方式進(jìn)行復(fù)制,若一完全被標(biāo)記的DNA分子,置于無(wú)放射標(biāo)記的溶液中復(fù)制兩代,所產(chǎn)生的4個(gè)DNA分子的放射性狀況如何9第二信使包括哪些物質(zhì)
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    • 簡(jiǎn)介:臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)IFCC定義為定義為“包含對(duì)人體健康和患病包含對(duì)人體健康和患病時(shí)化學(xué)狀態(tài)的研究以及用于診斷、治療和預(yù)防疾病的化學(xué)時(shí)化學(xué)狀態(tài)的研究以及用于診斷、治療和預(yù)防疾病的化學(xué)試驗(yàn)方法的應(yīng)用試驗(yàn)方法的應(yīng)用”。臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)的主要任務(wù)①②③④臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展趨勢(shì)①實(shí)驗(yàn)室高新技術(shù)的發(fā)展分離與分析技術(shù)、自動(dòng)化與酶法分析、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和體外診斷試劑②快速小型化檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展快速檢測(cè)試條、小型化多用途檢驗(yàn)儀器③檢驗(yàn)質(zhì)量控制和系統(tǒng)評(píng)估檢驗(yàn)結(jié)果可靠有用、檢驗(yàn)與臨床結(jié)合密切臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)與臨床醫(yī)學(xué)的關(guān)系與探討疾病發(fā)生機(jī)制的關(guān)系、與臨床疾病診斷和治療的關(guān)系疾病診斷和早期診斷判斷疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后治療效果監(jiān)測(cè)健康普查和咨詢(xún)、與臨床和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的關(guān)系急性時(shí)相反應(yīng)、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白血脂正常,膽固醇不高的人群。有嚴(yán)重AS性疾病和家族史人群。有早期<50歲冠心病、腦血管或外周血管病癥狀的人群。服用氨甲喋呤、氨茶堿、苯妥英等人群中HCY升高的比例較高,有進(jìn)一步引發(fā)血管疾病的可能,需要聯(lián)合考慮。繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患(蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)紊亂)以及燒傷等。①肝功能衰竭和氨基酸代謝失衡肝衰竭時(shí)芳香族氨基酸(AAA)在肝臟中的降解減少,其血漿濃度升高;而支鏈氨基酸(BCAA)在肌肉等組織中的分解沒(méi)有減少,相反因肝臟降解胰島素減少、血漿胰島素升高,促進(jìn)BCAA進(jìn)入肌肉,降解增多,導(dǎo)致血漿BCAA濃度下降。正常情況下BCAAAAA3035,肝病時(shí)可顯著下降,比值降至1左右往往發(fā)生肝性腦病。芳香族色氨酸、苯丙氨酸因血液濃度上升,進(jìn)入腦組織的量也增加;血漿BCAA下降又導(dǎo)致AAA進(jìn)入腦細(xì)胞的比例增加,這些AAA在腦組織中可形成假性神經(jīng)遞質(zhì),是引起肝性腦病和肝昏迷的重要原因。②腎臟疾病由于腎小管損害、腎近曲小管功能障礙引起。某些腎臟疾病時(shí)僅有腎小管重吸收氨基酸障礙(氨基酸尿);有些病人的腎近曲小管的所有重吸收功能均受影響,已經(jīng)不僅僅是氨基酸尿。高尿酸血癥是指37℃時(shí),血清中尿酸含量男性超過(guò)420ΜMOLL,女性超過(guò)350ΜMOLL。由尿酸排泄障礙或嘌呤代謝紊亂引起。腎臟尿酸排泄減少或體內(nèi)嘌呤來(lái)源過(guò)多均可導(dǎo)致高尿酸血癥。①排泄障礙當(dāng)GFR下降或近端腎小管對(duì)尿酸的重吸收增加或(和)分泌功能減退時(shí),便導(dǎo)致,一般在慢性腎病時(shí)出現(xiàn)。另一種是機(jī)制不明的多基因型遺傳缺陷引起的原發(fā)性。②嘌呤代謝合成紊亂大多數(shù)屬于多基因遺傳缺陷,機(jī)制不明。由酶缺陷引起的占少數(shù)痛風(fēng)(痛風(fēng)(GOUT))是一組嘌呤代謝紊亂所致的疾病,由遺傳性和(或)獲得性的尿酸排泄減少和(或)嘌呤代謝障礙,導(dǎo)致高尿酸血癥及尿酸鹽結(jié)晶形成和沉積,從而引起特征性急性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石、間質(zhì)性腎炎,嚴(yán)重者呈關(guān)節(jié)畸形及功能障礙;常伴尿酸性尿路結(jié)石。(僅有高尿酸血癥,即使合并尿酸性結(jié)石也不稱(chēng)之為痛風(fēng))血清中的蛋白質(zhì)因?yàn)槎际怯砂被峤M成,性質(zhì)相似,除清蛋白等少數(shù)蛋白質(zhì)有某種特性可利用染料結(jié)合法等方法測(cè)定外,其他都需制備特異的抗血清,采用免疫比濁法、免疫擴(kuò)散法、化學(xué)發(fā)光免疫法、放射免疫法等方法測(cè)定。臨床所指的特定蛋白質(zhì)主要有臨床所指的特定蛋白質(zhì)主要有ALB、PA、AAT、AAG、HP、AMG、CER、TRF、CRP,以及免疫球蛋白以及免疫球蛋白IGG、IGM、IGA和補(bǔ)體和補(bǔ)體C3、C4,這,這14種蛋白質(zhì),目前已有國(guó)際公認(rèn)種蛋白質(zhì),目前已有國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)。的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)。血清總蛋白測(cè)定血清總蛋白測(cè)定
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    • 簡(jiǎn)介:生物化學(xué)試題答案(2)一、一、名詞解釋名詞解釋20201、乙醛酸循環(huán)(2分)是某些植物,細(xì)菌和酵母中檸檬酸循環(huán)的修改形式,通過(guò)該循環(huán)可以收乙乙酰COA經(jīng)草酰乙酸凈生成葡萄糖。乙醛酸循環(huán)繞過(guò)了檸檬酸循環(huán)中生成兩個(gè)CO2的步驟。2、無(wú)效循環(huán)(FUTILECYCLE)(2分)也稱(chēng)為底物循環(huán)。一對(duì)酶催化的循環(huán)反應(yīng),該循環(huán)通過(guò)ATP的水解導(dǎo)致熱能的釋放。EG葡萄糖ATP葡萄糖6磷酸ADP與葡萄糖6磷酸H2O葡萄糖PI反應(yīng)組成的循環(huán)反應(yīng),其凈反應(yīng)實(shí)際上是ATP+H2O=ADP+PI。3、糖異生作用(2分)由簡(jiǎn)單的非糖前體轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑倪^(guò)程。糖異生不是糖酵解的簡(jiǎn)單逆轉(zhuǎn)。雖然由丙酮酸開(kāi)始的糖異生利用了糖酵解中的七步進(jìn)似平衡反應(yīng)的逆反應(yīng),但還必需利用另外四步酵解中不曾出現(xiàn)的酶促反應(yīng),繞過(guò)酵解過(guò)程中不可逆的三個(gè)反應(yīng)4、生糖生酮氨基酸既可以轉(zhuǎn)變成糖或酯的氨基酸。5、啟動(dòng)子DNA分子中RNA聚合酶能夠結(jié)合并導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始的序列。6、錯(cuò)配修復(fù)(MISMATCHREPAIR)(2分)在含有錯(cuò)配堿基的DNA分子中,使正常核苷酸序列恢復(fù)的修復(fù)方式。這種修復(fù)方式的過(guò)程是識(shí)別出下正確地鏈,切除掉不正確鏈的部分,然后通過(guò)DNA聚合酶和DNA連接酶的作用,合成正確配對(duì)的雙鏈DNA。7、外顯子(EXON)(2分)既存在于最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中,也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。術(shù)語(yǔ)外顯子也指編碼相應(yīng)RNA內(nèi)含子的DNA中的區(qū)域。8、(密碼子)擺動(dòng)(WOBBLE)(2分)處于密碼子3ˊ端的堿基與之互補(bǔ)的反密碼子5ˊ端的堿基(也稱(chēng)為擺動(dòng)位置),例如I可以與密碼子上3ˊ端的U,C和A配對(duì)。由于存在擺動(dòng)現(xiàn)象,所以使得一個(gè)TRNA反密碼子可以和一個(gè)以上的MRAN密碼子結(jié)合。9、魔點(diǎn)(2分)任何一種氨基酸缺乏,或突變導(dǎo)致任何一種氨基酰TRNA合成酶的失活都將引起嚴(yán)謹(jǐn)控制生長(zhǎng)代謝的反應(yīng)。此時(shí)細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)兩種不同尋常的核苷酸,電泳時(shí)出現(xiàn)2個(gè)特殊的斑點(diǎn),稱(chēng)之為魔點(diǎn)。為PPGPPPPPGPP10、Q循環(huán)(2分)在電子傳遞鏈中,2個(gè)氫醌(QH2)分別將一個(gè)電子傳遞給2個(gè)細(xì)胞色素C,經(jīng)過(guò)細(xì)胞色素BLBH等參與的循環(huán)反應(yīng),生成一個(gè)氫醌和醌的循環(huán)。二、填空題(二、填空題(2020分)分)7向線(xiàn)粒體懸浮液中加入琥珀酸,磷酸,DNP(二硝基苯酚)一起保溫,若向懸液液中加入ADP,則耗氧量明顯增加。(1分)8在大腸桿菌中,DNA連接酶催化的反應(yīng)需要NAD作為電子供體。(1分)9丙酮酸羧化酶的激活,意味著TCA循環(huán)中的一種或多種代謝物離開(kāi)循環(huán)用于合成,或循環(huán)代謝能力增強(qiáng)。(1分)10脂肪酸合成所需的碳源完全來(lái)自乙酰COA它可以通過(guò)?;d體蛋白穿過(guò)線(xiàn)粒體內(nèi)膜而進(jìn)入胞漿。(1分)11在一厭氧細(xì)菌的培養(yǎng)物中若添加F,將導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞中P烯醇式丙酮酸2P甘油酸的比率很快降低。(1分)12代謝物降解物基因活化蛋白(CAP)的作用是與CAMP形成復(fù)合物后,再與啟動(dòng)基因結(jié)合,促進(jìn)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。(1分)13在所有已知的DNA聚合酶中,只有RNA腫瘤病毒中依賴(lài)RNA的DNA聚合酶不需要引物。(1分)14SSB(單鏈結(jié)合蛋白)能降低DNA的TM值。(1分)15寡霉素抑制ATP的合成,同時(shí)意味著氧的利用被停止。(1分)16在大多數(shù)生物中,氨基酸的A氨基轉(zhuǎn)變成NH3是一個(gè)氧化過(guò)程,通常需要FAD或NAD作為氧化劑。(1分)17磷酸戊糖途徑以降解葡萄糖作為代價(jià),為機(jī)體提供ATP與還原能力。(1分)18嘌呤霉素與氨酰TRNA結(jié)構(gòu)相似,通過(guò)以共價(jià)方式摻入到肽鏈的N末端,從而抑制蛋白質(zhì)的合成。(1分)19已糖激酶和葡萄糖激酶兩者都可催化葡萄糖生成6PG,但兩者相比,前者對(duì)葡萄糖的專(zhuān)一性較差,KM較小。(1分)20乙醛酸循環(huán)是生物體中普遍存在的一條循環(huán)途徑,它是TCA循環(huán)的輔助途徑之一。(1分)1,2,3,4,5,6,7,8,9,10111213,14,15,16,17,18,19,20四、簡(jiǎn)答與計(jì)算四、簡(jiǎn)答與計(jì)算4040,選,選881、分解代謝為細(xì)胞合成代謝提供的主要產(chǎn)品有什么(5分)分解代謝為合成代謝提供ATPNADPH小分子。2、向10ML的6磷酸G和1磷酸G的混合溶液中加入10ML含有過(guò)量的NADP,MG2,6磷酸G脫氫酶溶液,此溶液在1CM比色杯中測(cè)得OD340057當(dāng)再加入10ML磷酸G變位酶后測(cè)得OD340050計(jì)算1)原始溶液中6磷酸G的濃度,2)原始溶液中1磷酸G的濃度。(5分)①發(fā)生的反應(yīng)如下DHE6PGNADP6P葡萄糖酸NADPH;由于溶液中NADP過(guò)量,因此有1MOL6PG就會(huì)產(chǎn)生1MOLNADPHH;NADPH的濃度C916105M310226570所以原始液中6PG的濃度9161052182104M②加入PG變位酶后1PG6PG新增加的NADPHH的量即為1PG的量,此條件下,NADPH濃度為C804105M31022650換算成原始溶液中6PG的濃度為
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    • 簡(jiǎn)介:9910年生物化學(xué)真題問(wèn)答題匯總2010年生物化學(xué)問(wèn)答題三、簡(jiǎn)答題1、輔基和輔酶有何不同,請(qǐng)寫(xiě)出三種維生素與輔酶的關(guān)系。這些輔酶在代謝中的應(yīng)用。答根據(jù)酶催化反應(yīng)最適條件的要求,原則上在酶測(cè)定體系中應(yīng)加入一定量的輔助因子。輔助因子(COFACTS)是指酶的活性所需要的一種非蛋白質(zhì)成分,包括輔酶、輔基和金屬離子激活劑。與酶緊密結(jié)合的輔因子稱(chēng)為輔基;不含輔基的酶蛋白稱(chēng)為脫輔基酶蛋白(APOENZYME),沒(méi)有催化活性,必須加入足量輔基,和它結(jié)合成為全酶(HOLOENZYME),才有催化活性。脫輔基酶蛋白與輔基孵育一段時(shí)間后,酶活性才會(huì)恢復(fù),因此,往往需要樣品與試劑中的輔基先預(yù)孵育的過(guò)程。輔基的用量往往較少。與酶蛋白結(jié)合很松弛,用透析和其它方法很易將它們與酶分開(kāi)的稱(chēng)為輔酶(COENZYME)。輔酶盡管不同于酶的底物,但在作用方式上和底物類(lèi)似,在酶反應(yīng)過(guò)程中與酶結(jié)合、分離及反復(fù)循環(huán)。輔酶用量的確定可將它們按底物處理。例如乳酸脫氫酶中輔酶按雙底物動(dòng)力學(xué)方程計(jì)算。硫胺素即維生素B1。它在生物體內(nèi)的輔酶形式是硫胺素焦磷酸TPP。硫胺素焦磷酸過(guò)去也稱(chēng)為輔羧酶。它在動(dòng)物糖代謝中起著重要作用,例如丙酮酸在脫羧作用時(shí)需要它。在TPP缺少的情況下代謝中間物丙酮酸不能順利脫羧會(huì)積聚于血液和組織中而出現(xiàn)神經(jīng)炎癥狀。TPP還是其他酶例如酮酸氧化酶、轉(zhuǎn)酮醇酶的輔酶。TPP催化的酶反應(yīng)還需要有鎂離子的存在。核黃素即維生素B2。參與組成兩種輔酶是細(xì)胞內(nèi)的氧化還原系統(tǒng)的主要成分它們是黃素單核苷酸FMN和黃素腺嘌呤二核苷酸FAD。FMN和FAD是一系列黃素連接的氧化還原酶或稱(chēng)為黃素蛋白類(lèi)的輔酶,從它們與酶蛋白結(jié)合緊密的程度來(lái)說(shuō),也可認(rèn)為是輔基。這些酶中有的除了FMN或FAD外,還需要一些金屬輔助因子,如鐵或鉬離子等。因此它們被稱(chēng)為金屬黃素蛋白。這些酶催化一系列可逆或不可逆的細(xì)胞中的氧化還原反應(yīng)。吡哆醛及其衍生物吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇總稱(chēng)為維生素B6(圖3維生素的結(jié)構(gòu)式的結(jié)構(gòu)式“CLASSIMAGE)。維生素B6參與形成兩種輔酶,即吡哆醛磷酸和吡哆胺磷酸。需要吡哆醛磷酸或吡哆胺磷酸作為輔酶的酶在氨基酸代謝中特別重要,催化轉(zhuǎn)氨、脫羧以及消旋作用等。輔酶輔酶作為酶的輔因子的有機(jī)分子,本身無(wú)催化作用,但一般在酶促反應(yīng)中有傳遞電子、原子或某些功能基團(tuán)作為酶的輔因子的有機(jī)分子,本身無(wú)催化作用,但一般在酶促反應(yīng)中有傳遞電子、原子或某些功能基團(tuán)如參與氧化還如參與氧化還原或運(yùn)載?;幕鶊F(tuán)原或運(yùn)載?;幕鶊F(tuán)的作用。在大多數(shù)情況下,可通過(guò)透析將輔酶除去。的作用。在大多數(shù)情況下,可通過(guò)透析將輔酶除去。輔酶(輔酶(COENZYMECOENZYME)是一類(lèi)可以將化學(xué)基團(tuán)從一個(gè)酶轉(zhuǎn)移到另一個(gè)酶上的有機(jī)小分子,與酶較為松散地結(jié)合,對(duì)于特定酶的)是一類(lèi)可以將化學(xué)基團(tuán)從一個(gè)酶轉(zhuǎn)移到另一個(gè)酶上的有機(jī)小分子,與酶較為松散地結(jié)合,對(duì)于特定酶的活性發(fā)揮是必要的。有許多維他命及其衍生物,如核黃素、硫胺素和葉酸,都屬于輔酶。這些化合物無(wú)法由人體合成,必活性發(fā)揮是必要的。有許多維他命及其衍生物,如核黃素、硫胺素和葉酸,都屬于輔酶。這些化合物無(wú)法由人體合成,必須通過(guò)飲食補(bǔ)充。不同的輔酶能夠攜帶的化學(xué)基團(tuán)也不同須通過(guò)飲食補(bǔ)充。不同的輔酶能夠攜帶的化學(xué)基團(tuán)也不同NADNAD或NADPNADP攜帶氫離子,輔酶攜帶氫離子,輔酶A攜帶乙?;?,葉酸攜帶甲酰基,攜帶乙?;~酸攜帶甲?;?,SS腺苷基蛋氨酸也可攜帶甲?;O佘栈鞍彼嵋部蓴y帶甲?;?。二、甲氨蝶呤抗腫瘤作用的化學(xué)原理。答甲氨蝶呤為抗甲氨蝶呤為抗葉酸葉酸類(lèi)抗腫瘤藥,主要通過(guò)類(lèi)抗腫瘤藥,主要通過(guò)對(duì)二氫葉酸還原酶的抑制對(duì)二氫葉酸還原酶的抑制而達(dá)到阻礙腫瘤細(xì)胞的合成,而抑制腫瘤細(xì)胞的生而達(dá)到阻礙腫瘤細(xì)胞的合成,而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)與繁殖。長(zhǎng)與繁殖。②旋光性下降;旋光性下降;③粘度降低;粘度降低;④生物學(xué)功能喪失或改變。生物學(xué)功能喪失或改變。應(yīng)用應(yīng)用DNA雜交是指不同來(lái)源的雜交是指不同來(lái)源的DNA經(jīng)熱變性后,在慢慢冷卻的復(fù)性過(guò)程中,由于異源經(jīng)熱變性后,在慢慢冷卻的復(fù)性過(guò)程中,由于異源DNA之間的某些區(qū)域有相同之間的某些區(qū)域有相同的序列,可以彼此結(jié)合形成雜交分子,稱(chēng)此方法為的序列,可以彼此結(jié)合形成雜交分子,稱(chēng)此方法為DNA分子雜交。分子雜交。DNA也可與互補(bǔ)的也可與互補(bǔ)的RNA之間發(fā)生雜交,形成之間發(fā)生雜交,形成DNARNA雜交分子。核酸雜交可在液相或固相上進(jìn)行,由于硝酸纖維素膜只吸附變性雜交分子。核酸雜交可在液相或固相上進(jìn)行,由于硝酸纖維素膜只吸附變性DNA,故常用硝酸纖維素膜作核酸雜交的,故常用硝酸纖維素膜作核酸雜交的支持介質(zhì)。支持介質(zhì)。由于嘌呤和嘧啶在由于嘌呤和嘧啶在240NM240NM~290NM290NM紫外線(xiàn)處表現(xiàn)出強(qiáng)烈的吸收性能,所以可以利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定堿基、核苷、紫外線(xiàn)處表現(xiàn)出強(qiáng)烈的吸收性能,所以可以利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定堿基、核苷、核苷酸和核酸,它們的最大吸收峰值在核苷酸和核酸,它們的最大吸收峰值在260NM260NM附近。不同核苷酸有不同的吸收特性,可以此作定性定量檢測(cè)。附近。不同核苷酸有不同的吸收特性,可以此作定性定量檢測(cè)。DNA變性后,粘度改變,鋼性線(xiàn)性分子變得無(wú)序,粘度下降,變性后,粘度改變,鋼性線(xiàn)性分子變得無(wú)序,粘度下降,UV吸收增強(qiáng),其規(guī)律如下高色效應(yīng)吸收增強(qiáng),其規(guī)律如下高色效應(yīng)核酸變性后、氫核酸變性后、氫鍵破壞,雙螺旋結(jié)構(gòu)破壞,堿基暴露,紫外吸收(鍵破壞,雙螺旋結(jié)構(gòu)破壞,堿基暴露,紫外吸收(260NM)增強(qiáng),謂高色效應(yīng)。解鏈溫度)增強(qiáng),謂高色效應(yīng)。解鏈溫度融解溫度(融解溫度(TM)UV吸收增吸收增值達(dá)到最大吸收增值值達(dá)到最大吸收增值50時(shí)的溫度,稱(chēng)時(shí)的溫度,稱(chēng)TM。TM值與值與DNAGC含量有關(guān),含量有關(guān),GC含量愈大,含量愈大,TM愈高,反之則反;與核酸分子長(zhǎng)度有關(guān),分子愈長(zhǎng),愈高,反之則反;與核酸分子長(zhǎng)度有關(guān),分子愈長(zhǎng),22核酸雜交的分子基礎(chǔ)是什么有哪些應(yīng)用價(jià)值核酸雜交的分子基礎(chǔ)是什么有哪些應(yīng)用價(jià)值答答雜交(雜交(HYDRIDIZATIONHYDRIDIZATION)兩個(gè)以上的分子因具有相近的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)而在適宜的條件下形成雜交體()兩個(gè)以上的分子因具有相近的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)而在適宜的條件下形成雜交體(HYBRIDHYBRID),),雜交體中的分子不是來(lái)自一個(gè)二聚體分子。同一個(gè)二聚體中的兩個(gè)分子在變性解離后重組合稱(chēng)為復(fù)性。雜交體中的分子不是來(lái)自一個(gè)二聚體分子。同一個(gè)二聚體中的兩個(gè)分子在變性解離后重組合稱(chēng)為復(fù)性。利用兩條不同來(lái)源利用兩條不同來(lái)源的多核苷酸鏈之間的互補(bǔ)性而使它們形成雜交體雙鏈叫核酸雜交。的多核苷酸鏈之間的互補(bǔ)性而使它們形成雜交體雙鏈叫核酸雜交。與核酸雜交技術(shù)相對(duì)應(yīng)的另一項(xiàng)技術(shù)被稱(chēng)為探針技術(shù),與核酸雜交技術(shù)相對(duì)應(yīng)的另一項(xiàng)技術(shù)被稱(chēng)為探針技術(shù),它是指利用標(biāo)記分子對(duì)其它分子的識(shí)別性而實(shí)現(xiàn)對(duì)后者進(jìn)行檢測(cè)的一種技術(shù),我們把標(biāo)記的分子叫探針(它是指利用標(biāo)記分子對(duì)其它分子的識(shí)別性而實(shí)現(xiàn)對(duì)后者進(jìn)行檢測(cè)的一種技術(shù),我們把標(biāo)記的分子叫探針(PROBEPROBE)。將探)。將探針技術(shù)與分子雜交技術(shù)相結(jié)合,從而使分子雜交技術(shù)得以廣泛推廣應(yīng)用。目前所用的核酸雜交技術(shù)均應(yīng)用了標(biāo)記技術(shù)。針技術(shù)與分子雜交技術(shù)相結(jié)合,從而使分子雜交技術(shù)得以廣泛推廣應(yīng)用。目前所用的核酸雜交技術(shù)均應(yīng)用了標(biāo)記技術(shù)。核酸雜交的原理核酸雜交的原理具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強(qiáng)度等)可按堿基互補(bǔ)原則形成具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強(qiáng)度等)可按堿基互補(bǔ)原則形成雙鏈,此雜交過(guò)程是高度特異的。雜交的雙方是待測(cè)核酸及探針。待測(cè)核酸序列為性病病原體基因組或質(zhì)粒雙鏈,此雜交過(guò)程是高度特異的。雜交的雙方是待測(cè)核酸及探針。待測(cè)核酸序列為性病病原體基因組或質(zhì)粒DNADNA。探針以。探針以放射核素或非放射性核素標(biāo)記,以利于雜交信號(hào)的檢測(cè)。放射核素或非放射性核素標(biāo)記,以利于雜交信號(hào)的檢測(cè)。核酸的分子雜交技術(shù)是目前生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一,是定性或定量檢測(cè)特異核酸的分子雜交技術(shù)是目前生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一,是定性或定量檢測(cè)特異RNARNA或DNADNA序列片段的有力工具。序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的堿基互補(bǔ)原則而發(fā)展起來(lái)的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等條件下,雙鏈它是利用核酸分子的堿基互補(bǔ)原則而發(fā)展起來(lái)的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等條件下,雙鏈DNADNA之間的氫鍵被破壞之間的氫鍵被破壞變性變性,雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈。這時(shí)加入異源的,雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈。這時(shí)加入異源的DNADNA,在核酸雜交的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種用于研究,在核酸雜交的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種用于研究和診斷的非常有用的技術(shù)稱(chēng)探針技術(shù)和診斷的非常有用的技術(shù)稱(chēng)探針技術(shù)PROBEPROBE。一小段。一小段例如十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)百個(gè)例如十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)百個(gè)核苷酸聚合體的單鏈,有放射性同位素如核苷酸聚合體的單鏈,有放射性同位素如32P32P、35S35S或生物素標(biāo)記其末端或全鏈,就可作為探針。把待測(cè)或生物素標(biāo)記其末端或全鏈,就可作為探針。把待測(cè)DNADNA變性并吸附在一種特殊的濾膜,例如硝酸纖維素膜上。變性并吸附在一種特殊的濾膜,例如硝酸纖維素膜上。然后把濾膜與探針共同培育一段時(shí)間,使發(fā)生雜交。用緩沖液沖洗膜。由于這種濾膜能較牢固地吸附雙鏈的核酸,單鏈的然后把濾膜與探針共同培育一段時(shí)間,使發(fā)生雜交。用緩沖液沖洗膜。由于這種濾膜能較牢固地吸附雙鏈的核酸,單鏈的在沖洗時(shí)洗脫了。帶有放射性的探針若能與待測(cè)在沖洗時(shí)洗脫了。帶有放射性的探針若能與待測(cè)DNADNA結(jié)合成雜化雙鏈,則保留在濾膜上結(jié)合成雜化雙鏈,則保留在濾膜上。通過(guò)同位素的放射自顯影或生物。通過(guò)同位素的放射自顯影或生物素的化學(xué)顯色,就可判斷探針是否與被測(cè)的素的化學(xué)顯色,就可判斷探針是否與被測(cè)的DNADNA發(fā)生雜交。有雜交現(xiàn)象則說(shuō)明被測(cè)發(fā)生雜交。有雜交現(xiàn)象則說(shuō)明被測(cè)DNADNA與探針有同源性與探針有同源性HOMOGENEITYHOMOGENEITY,即,即二者的堿基序列是可以互補(bǔ)的。二者的堿基序列是可以互補(bǔ)的。例如想知道某種病毒是否和某種腫瘤有關(guān),可把病毒的例如想知道某種病毒是否和某種腫瘤有關(guān),可把病毒的DNADNA制成探針。從腫瘤組織提取制成探針。從腫瘤組織提取
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