簡介：樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLSDCS是體內(nèi)最重要的抗原提呈細(xì)胞能夠啟動(dòng)初始T細(xì)胞活化、增殖、分化并產(chǎn)生免疫效應(yīng)在免疫系統(tǒng)中居于獨(dú)特的地位。成熟DCS能夠激發(fā)免疫應(yīng)答而不成熟DCS則涉及免疫耐受的誘導(dǎo)。利用DC的免疫調(diào)節(jié)作用誘導(dǎo)免疫耐受是當(dāng)前移植領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。研究表明髓系未成熟DC亞群IMMATUREDCSUBSETIMDC或靜息DCRESTINGDC由于表面黏附輔佐分子如B7、ICAM1、CD40等缺乏因此具有免疫耐受性可以誘導(dǎo)T細(xì)胞失能ANERGY、低反應(yīng)性及向TH2細(xì)胞極化并誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞REGULATYTCELLSTREG產(chǎn)生未成熟DC的這些效應(yīng)對器官移植時(shí)免疫穩(wěn)定態(tài)的維持具有重要的作用。因此研究調(diào)節(jié)DCS發(fā)育成熟的因素及其機(jī)制對于闡明自身免疫病、移植排斥反應(yīng)、抗腫瘤免疫等的機(jī)制和探索防治措施有著重要的意義。細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制分子SUPRESSSOFCYTOKINESIGNALINGSOCS是1997年STARR、ENDO和NAKA所在的三個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)小組用不同的方法相繼發(fā)現(xiàn)的一類與細(xì)胞因子JAKSTAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)的負(fù)性調(diào)節(jié)因子。SOCS能抑制ILS、IFNΓ、GH等多種細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑不僅對JAKSTAT信號(hào)途徑有負(fù)性調(diào)控作用而且還參與其它信號(hào)途徑的調(diào)節(jié)其功能涉及機(jī)體正常組織的分化和器官的發(fā)育因此為學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注。SOCS通過選擇性抑制IL12STAT4或IL4STAT6途徑的信號(hào)傳導(dǎo)實(shí)現(xiàn)對TH細(xì)胞的分化調(diào)控其平衡紊亂導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生。SOCS1為該家族中含SH2結(jié)構(gòu)域的SOCS成員之一又稱JABJAKBINDINGPROTEIN或SSI1STATINDUCEDSTATINHIBIT1。正常生理?xiàng)l件下SOCS1蛋白分子表達(dá)量很少；在細(xì)胞受到某些細(xì)胞因子刺激時(shí)其表達(dá)量可迅速明顯地增加。研究表明當(dāng)機(jī)體受到刺激以后SOCS1的MRNA在胸腺細(xì)胞內(nèi)的豐度顯著增加；在肺、脾和睪丸等器官中等增加。在體外SOCS1可以抑制多種信號(hào)傳導(dǎo)途徑在細(xì)胞中超表達(dá)時(shí)可以抑制IFNS、IL2、IL3、IL4、IL6、IL12、TNFΑ、LIF、OSM抑瘤素M等細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。SOCS1通過抑制由ILS、IFN以及LIF等所誘導(dǎo)的STAT活性以及TEC激酶和受體酪氨酸激酶RECEPTTYROSINEKINASERTK的活性調(diào)控細(xì)胞的分化與功能?？紤]到DC在抗原遞呈和免疫激活與耐受過程中的特殊作用尤其是體內(nèi)IMDC亞群的產(chǎn)生與細(xì)胞因子信號(hào)調(diào)控密切相關(guān)針對SOCS1負(fù)性調(diào)節(jié)IFNΓ、ILS等細(xì)胞因子信號(hào)的傳導(dǎo)可能對IMDC亞群產(chǎn)生具有重要的作用我們擬研究在DC分化、發(fā)育和抗原遞呈過程中SOCS1的表達(dá)及對其影響的因素探討SOCS1高表達(dá)對DC成熟、生物學(xué)特性和功能的影響LPS等炎癥因子刺激在其中的作用以及誘導(dǎo)T細(xì)胞耐受的效果。目前對于SOCS1和DC之間相互關(guān)系的研究主要集中在干擾SOCS1表達(dá)方面而對于高表達(dá)SOCS1對DC的影響則鮮有報(bào)道。近期研究顯示用RNA干擾技術(shù)沉默DC的SOCS1基因表達(dá)能促使DC成熟而增強(qiáng)其免疫原性。且SAKURAI49等研究發(fā)現(xiàn)在巨噬細(xì)胞中高表達(dá)SOCS1能夠明顯抑制腺病毒本身所誘導(dǎo)的初始免疫反應(yīng)。因此在理論上用細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)上調(diào)DC的SOCS1基因表達(dá)能抑制DC成熟而增強(qiáng)其耐受原性。鑒于此我們構(gòu)建了高表達(dá)SOCS1的腺病毒載體轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源的DCBMDC檢測BMDCS的表型、吞噬能力、細(xì)胞因子分泌以及刺激同種異體T細(xì)胞增殖的能力以及對細(xì)胞信號(hào)通路的影響以驗(yàn)證SOCS1的高表達(dá)是否能夠抑制DC成熟并增強(qiáng)其耐受原性。第一部分SOCS1腺病毒載體的構(gòu)建及其修飾的小鼠BMDC的制備腺病毒載體因其具有基因組結(jié)構(gòu)簡單、宿主細(xì)胞范圍廣、滴度高、感染效率高、無插入突變危險(xiǎn)等優(yōu)勢因此我們選擇了ADEASYTMADENOVIRALVECTSYSTEM體系構(gòu)建SOCS1載體。首先取經(jīng)過LPS刺激4小時(shí)后的小鼠脾臟抽提其MRNA然后根據(jù)報(bào)道及GENEBANK發(fā)布的基因和蛋白序列設(shè)計(jì)帶酶切位點(diǎn)的特異性引物RNA逆轉(zhuǎn)錄PCRRTPCR擴(kuò)增獲得小鼠SOCS1全長基因序列雙酶切后連接到ADEASYTMADENOVIRALVECTSYSTEM體系中的PSHUTTLECMV中然后與PADEASY1同源重組在293A細(xì)胞中包裝出帶有SOCS1目的基因的腺病毒PADESYSOCS1。通過PCR、酶切、測序鑒定及WESTERNBLOT檢測結(jié)果顯示攜帶小鼠SOCS1基因的腺病毒載體可高表達(dá)SOCS1蛋白說明帶有目的基因SOCS1的腺病毒構(gòu)建成功。經(jīng)過病毒的擴(kuò)增及滴度檢測我們構(gòu)建的小鼠PADEASYSOCS1腺病毒獲得了較高的滴度。采用GMCSF和IL4共同刺激小鼠骨髓細(xì)胞培養(yǎng)小鼠BMDC。此法培養(yǎng)的DC在57天時(shí)大部分為未成熟DC小集落經(jīng)LPS、CPG或POLYIC刺激2436小時(shí)后DC表面可伸出大量很長的突起；經(jīng)過流式細(xì)胞儀檢測BMDC的純度可以達(dá)到80％以上符合實(shí)驗(yàn)的要求。實(shí)驗(yàn)分為三組第一組正常BMDC組DCONLY第二組空病毒PADEASYTMVNG轉(zhuǎn)染小鼠BMDC形成空病毒對照組DCPADEASYVNG第三組將PADEASYTMSOCS1轉(zhuǎn)染BMDC形成SOCS1高表達(dá)組DCPADCASYSOCS1。普通顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)高表達(dá)SOCS1的BMDCS所形成的集落明顯的小且突起少而鈍；熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)大約80％BMDCS發(fā)出綠色熒光；同時(shí)RTPCR和WESTERNBLOT檢測上述BMDCS的SOCS1基因和蛋白的表達(dá)情況。與對照組相比實(shí)驗(yàn)組SOCS1蛋白的表達(dá)明顯增多。但由于病毒載體的影響與BMDCS相比空病毒對照組也有少量的SOCS1蛋白的表達(dá)。結(jié)果證實(shí)構(gòu)建的PADEASYSOCS1腺病毒能有效介導(dǎo)SOCS1基因在小鼠BMDCS中表達(dá)且空病毒可以誘導(dǎo)BMDCS微量的表達(dá)SOCS1。第二部分高表達(dá)SOCS1對BMDC生物學(xué)特性和功能的影響在本部分BMDCS被分為6組施以不同的刺激條件。A組培養(yǎng)過程中不加任何刺激的空白對照組DCONLYB組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMVNG空病毒對照組DCPADEASYTMVNGC組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMSOCS1實(shí)驗(yàn)組DCPADEASYTMSOCS1D組培養(yǎng)過程中不加任何刺激的空白對照組檢測前24小時(shí)再加入LPS刺激LPSDCE組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMVNG空病毒對照組檢測前24小時(shí)再加入LPS刺激LPSDCPADEASYTMVNG組F組培養(yǎng)第5天加入PADEASYTMSOCS1檢測前24小時(shí)再加入LPS刺激LPSDCPADEASYTMSOCS1組。經(jīng)過FACS、ELISA等實(shí)驗(yàn)手段檢測我們發(fā)現(xiàn)高表達(dá)SOCS1能夠明顯抑制BMDCS表面分子CD40、CD80、CD86和MHCII分子的表達(dá)；BMDCS攝取抗原能力維持在高水平而刺激異記憶T細(xì)胞增殖能力不足；同時(shí)伴隨著IL12P40、IL6、IFNΓ、及TNFΑ等細(xì)胞因子分泌水平的降低?？詹《窘M則恰恰相反在一定程度上刺激了BMDCS的成熟。但高表達(dá)SOCS1能夠明顯抑制空病毒所誘導(dǎo)的BMDCS的成熟作用。此外NFΚB在TLR誘導(dǎo)的DC成熟過程中起十分重要作用主要參與了細(xì)胞因子的分泌調(diào)節(jié)。SOCS1、P13K、PKCS等信號(hào)分子通過NFΚB、P38MAPK和JNK的激活而調(diào)控DC的成熟和細(xì)胞因子的分泌。因此我們選擇其中兩個(gè)重要的相關(guān)信號(hào)分子即NFΚB和JNK初步探索高表達(dá)SOCS1對BMDCS信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)高表達(dá)SOCS1的BMDCS中P65表達(dá)量明顯降低JNK的表達(dá)量有所升高；而LPS刺激后高表達(dá)SOCS1的BMDCS中P65表達(dá)量略微降低JNK的表達(dá)量明顯降低。因此我們推測高表達(dá)SOCS1的BMDCS在信號(hào)調(diào)節(jié)的過程中主要是P65發(fā)揮了調(diào)控作用；經(jīng)LPS刺激后主要由JNK發(fā)揮了調(diào)控作用從而抑制了DC的成熟和細(xì)胞因子的分泌。以上結(jié)果表明SOCS1在DC中的高表達(dá)能夠明顯抑制DC表型和功能的成熟增強(qiáng)其耐受原性并通過NFΚB和JNK信號(hào)途徑發(fā)揮調(diào)控作用為進(jìn)一步在器官移植領(lǐng)域中如何利用免疫負(fù)向調(diào)控分子維持免疫穩(wěn)定態(tài)提供了新的依據(jù)和方法。

簡介：博士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)B2011004005人小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞、上皮祖細(xì)胞生物學(xué)特性鑒定及體內(nèi)外成肝誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究BIOLOGICALCHARACTERISTICSIDENTIFICATIONANDINVITRO／INVIVOHEPATOGENICDIFFERENTIATIONOFHUMANMINORSALIVARYGLANDDERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLSANDEPITHELIALPROGENITORCELLS所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專業(yè)整形外科醫(yī)院李艷趙振民趙振民楊明勇王連召外科學(xué)研究方向成體干細(xì)胞完成日期2014年3月1人小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞、上皮祖細(xì)胞生物學(xué)特性鑒定及體內(nèi)外成肝誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的1對小涎腺組織分別進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞方向培養(yǎng)和上皮祖細(xì)胞方向培養(yǎng)；在先前研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步深入鑒定小涎腺兩種類型干細(xì)胞表型；對兩種細(xì)胞的生物學(xué)特性如生長曲線、倍增時(shí)間、克隆形成率等進(jìn)行檢測，分析其干細(xì)胞增殖潛能；選用2D平面培養(yǎng)和3DMATRIGEL培養(yǎng)兩種誘導(dǎo)方案，對兩種類型細(xì)胞分別進(jìn)行2D及3D成肝誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)，探索小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞MINORSALIVARYGLANDDERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLS，MSGMSCS及上皮祖細(xì)胞MINORSALIVARYGLANDDERIVEDEPITHELIALPROGENITORCELLS，MSGEPIPCS體外成肝誘導(dǎo)方法，分析確定其成肝分化潛能。2建立小鼠213肝大部分切除損傷模型，設(shè)立對照組；對小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞和上皮祖細(xì)胞進(jìn)行CMDIL熒光標(biāo)記示蹤；分別移植小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞及上皮祖細(xì)胞到小鼠肝損傷模型，評估移植細(xì)胞在肝損傷模型中的分布及轉(zhuǎn)化，探討這兩種類型細(xì)胞在體內(nèi)成肝的可能性。方法1對小涎腺組織進(jìn)行免疫熒光鑒定，分析從小涎腺組織中獲得干細(xì)胞的可能性；通過組織塊培養(yǎng)法從人小涎腺組織中培養(yǎng)間充質(zhì)千細(xì)胞及上皮祖細(xì)胞，進(jìn)行純化擴(kuò)增；利用免疫熒光、流式細(xì)胞儀等對獲得的細(xì)胞進(jìn)行表型鑒定；檢測克隆形成率、生長曲線及倍增時(shí)間，對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成骨成軟骨成脂分化誘導(dǎo)，研究兩種細(xì)胞的生物學(xué)特性。QPCR檢測干細(xì)胞及成肝相關(guān)基因的表達(dá)情況，并與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行比較，深入探討細(xì)胞的干細(xì)胞特征及成肝分化的可能性。2分別對兩種細(xì)胞進(jìn)行體B2D及3D成肝分化誘導(dǎo)，觀察細(xì)胞生長及形態(tài)的變化，通過免疫熒光、吲哚青綠ICG攝取及QPCR檢測不同誘導(dǎo)條件下的成肝分化情況。3對小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞和上皮祖細(xì)胞進(jìn)行CMDIL熒光標(biāo)記；建立小鼠2／3肝大部分切除模型，隨機(jī)分為3組MSGMSCS組移植小涎腺間充質(zhì)干細(xì)胞N15，其中有3只做流式分析用，MSGEPIPCS組移植小涎腺上皮祖細(xì)胞N_12，及正常對照組N_3；細(xì)胞通過尾靜脈注射移植到小鼠體內(nèi)，移植后I周、2周、3周、4周分別取材；熒光顯微鏡及流式細(xì)胞儀分析移植2周后細(xì)胞在小鼠體內(nèi)

簡介：蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文肺癌胸水腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞的生物學(xué)活性研究及臨床應(yīng)用姓名張紅宇申請學(xué)位級別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師吳昌平20030301霆塾壅爨鬟囂強(qiáng)整墨鏨墼塑壘蹩堂適整受筑盈蓬裹鬢援妻褒攮曩最高，對腫瘤細(xì)胞有很強(qiáng)的識(shí)別能力和殺傷力，此時(shí)是臨床應(yīng)用的最佳時(shí)間選擇。采用自體胸水TIL胸腔肉輸注治療肺癌患者近期療效好，海戮佟用輕，具鴦臨床疲熙徐毯。關(guān)鍵詞肺癌；胸腔積液；腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞；增殖力；表型分析；殺傷細(xì)胞活性療效作者張紅宇指導(dǎo)老師吳昌平

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)2010級碩士學(xué)位論文小干擾RNA沉默ARNT基因?qū)θ私Y(jié)腸癌HT29細(xì)胞生物學(xué)特性的影響EFFECTSOFSMALLINTERFERINGRNASILENCINGARNTGENEONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANCOLORECTALCARCINOMACELLSHT29課題來源廣東省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目20088030301163和20108031600119學(xué)位申請人楊祝導(dǎo)師姓名張剛慶專業(yè)名稱普通外科學(xué)培養(yǎng)類型專業(yè)學(xué)位培養(yǎng)層次碩士所在學(xué)院研究生學(xué)院第三臨床學(xué)院2013年05月01日廣州摘要負(fù)性調(diào)節(jié)因子、與細(xì)胞凋亡有關(guān)。因此，沉默ARNT基因后，使AHR、HIF1A、HIF2A和HIF3A缺乏對應(yīng)的亞基，繼而對結(jié)腸癌細(xì)胞的生物學(xué)特性會(huì)產(chǎn)生怎樣的影響目前尚不清楚。人的ARNT基因位于L號(hào)染色體1Q21，其CDNA全長為2604BP，開放閱讀框2367BP，為真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子BHLHPSA蛋白家族成員，在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)。CHANGKY等研究提示ARNT可能與人類宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。相關(guān)研究表明ARNT與肝癌的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移負(fù)相關(guān)。ARNT基因與人類結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展是正相關(guān)還是負(fù)相關(guān)目前尚不清楚。也有研究表明AI礬T能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和血管分支生成，而血管增生可以促進(jìn)結(jié)腸癌的生長。但目前ARNT基因在人類結(jié)腸癌的發(fā)生發(fā)展中的地位尚不明確。慢病毒載體1ENTIVIRALVECTOR，LV可以攜帶短發(fā)卡RNASHORTHAIRPINRNA，SHRNA表達(dá)組件進(jìn)入宿主基因組，通過RNAP01III啟動(dòng)子表達(dá)SHRNA，其莖環(huán)結(jié)構(gòu)的中間序列則被DICER酶識(shí)別并切除，產(chǎn)生的小干擾RNASIRNA可觸發(fā)內(nèi)源性MRNA的降解。慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾已被證明最有效和最穩(wěn)定，這基于其具有轉(zhuǎn)移基因片段容量大、轉(zhuǎn)基因效率高、不易引發(fā)宿主免疫反應(yīng)、轉(zhuǎn)基因可以持續(xù)而高效表達(dá)等優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)檢索，目前尚無將RNAI技術(shù)應(yīng)用于結(jié)腸癌HT29細(xì)胞ARNT基因的研究報(bào)道。目的獲取有效沉默人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞ARNT基因的SHRNA重組慢病毒；探討慢病毒介導(dǎo)的SIRNA沉默ARNT基因后對人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞體外增殖、凋亡和體內(nèi)成瘤的影響。為結(jié)腸癌的治療提供新的策略。方法一、靶向ARNT的SHRNA載體設(shè)計(jì)與構(gòu)建針對目的基因序列GENEID405，利用公用網(wǎng)站中提供的RNA干擾序列設(shè)計(jì)原則，設(shè)計(jì)多個(gè)RNA干擾靶點(diǎn)序列，根據(jù)設(shè)計(jì)軟件進(jìn)行評估測定，選擇4組II

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文釉基質(zhì)蛋白對體外培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響姓名侯小麗申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（口腔內(nèi)科學(xué)）指導(dǎo)教師吳織芬20040401第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文縮略語表縮略語英文全稱EMPSENAMELMATRIXPROTEINS中文全稱釉基質(zhì)蛋白ENIDENAMELMATRIXDERIVATIVE釉基質(zhì)蛋白衍生物HPDLCSHUMANPERIODONTALLIGAMENTCELLSRMSCSRATMARROWSTROMALCELLSTGFBTRANSFORMINGGROWTHFACTOR9PDGFPLATELETSDERIVEDGROWTHFACTORIGF1INSULINLIKEGROWTHFACTOR1FGFBACICFIBROBLASTGROWTHFACTORIL6INTEFLEUKIN一6PGE2PROSTAGLANDINE2BMPSBONEMORPHOGENETICPROTEINSFCSFETALCALFSERUMDM匣MDU粵。CCO’SMODI丘ED曲GL。MEDTUMMTT34，5DIMETHYLTHIAZOL2Y1一25DIPHENYLTETRAZOLIUMBROMIDEDMSODIMETHY’LSULFOXIDESDSSODIUMDODECYLSULFATEPAGEPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHRESIS人牙周膜細(xì)胞大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子13血小板源性生長因子胰島素樣生長因子1堿性成纖維細(xì)胞生長因子白細(xì)胞介索6前列腺素E2骨形成蛋白胎牛血清合成細(xì)胞培養(yǎng)基34，5二甲基噻唑2一2，5二苯基四氮唑嗅鹽二甲基亞砜十二烷基硫酸鈉聚丙酰胺凝膠電泳

簡介：分類號(hào)R7255密級⑧單位代碼10422SHANDONGUNIVERSITY碩士學(xué)位論文THESISFORMASTERDEGREE論文題目AIOIOS基因過表達(dá)對白血病細(xì)胞生物學(xué)特性及化療敏感性的影響INFLUENCEOFAIOLOSOVEREXPRESSIONONCELLBIOLOGICALBEHAVIOURSANDCHEMOSENSITIVITYINLEUKEMICCELLS作者姓名盧園園培養(yǎng)單位醫(yī)學(xué)院專業(yè)名稱兒科學(xué)指導(dǎo)教師鞠秀麗教授合作導(dǎo)師2014年4月15日88號(hào)7子學(xué)辦≯羔厶目錄中文摘要1英文摘要4符號(hào)說明8第一部分13AIOLOS慢病毒載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染效率檢測13材料及方法14結(jié)果23討論23第二部分26AIOLOS基因過表達(dá)對JURKAT細(xì)胞周期、凋亡及化療敏感性的影響26材料及方法一27結(jié)果31討論33結(jié)論一39附圖40參考文獻(xiàn)45致射49在學(xué)期間發(fā)表文章50

簡介：目前許多研究證明組織工程血管支架在體內(nèi)的再造機(jī)制是一種炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的血管重塑過程，炎癥反應(yīng)是宿主對損傷和異物產(chǎn)生的一種正常的應(yīng)答機(jī)制，其強(qiáng)度和持久性對材料在體內(nèi)的穩(wěn)定性和生物相容性產(chǎn)生影響。單核巨噬細(xì)胞是調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的重要細(xì)胞，可以通過細(xì)胞間直接接觸或旁分泌途徑對血管重要組分平滑肌細(xì)胞的生物學(xué)行為產(chǎn)生影響。為了研究單核巨噬細(xì)胞在體內(nèi)和體外對血管平滑肌生物學(xué)行為的影響，以便進(jìn)一步更好地調(diào)控組織工程血管支架移植后單核巨噬細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的浸潤和功能表型，本文首先采用冷凍干燥法制備絲素蛋白支架，這種方法制備的支架具有可控的孔徑連通度，良好的細(xì)胞相容性，然后分別從絲素支架的體外細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)皮下埋植兩方面進(jìn)行研究。首先體外細(xì)胞培養(yǎng)部分，通過在絲素支架上種植外周血來源的單核細(xì)胞，考察血管平滑肌細(xì)胞在單核細(xì)胞化的絲素支架上遷移、增殖及收縮表型的改變。利用掃描電鏡SEM觀察單核細(xì)胞在絲素材料上的表面形貌，并對DII標(biāo)記的平滑肌進(jìn)行熒光拍照，觀察共培養(yǎng)條件下平滑肌向支架內(nèi)的遷移情況。旁分泌途徑中，通過MTT實(shí)驗(yàn)、TRANSWELL實(shí)驗(yàn)、QPCR觀察單核細(xì)胞化絲素支架下的條件培養(yǎng)基對平滑肌細(xì)胞增殖、遷移及SM22基因表達(dá)情況的影響。結(jié)果顯示，單核細(xì)胞的種植促進(jìn)了平滑肌細(xì)胞在絲素支架材料內(nèi)的遷移、粘附和增殖，并且絲素支架微環(huán)境下的單核細(xì)胞更有利于血管平滑肌維持收縮表型。對于單核細(xì)胞化絲素支架在體內(nèi)的研究，首先利用HE染色對材料的細(xì)胞化進(jìn)行評價(jià)，然后通過免疫熒光染色對平滑肌ΑSMA進(jìn)行定量分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞的種植在一定程度上減少了大鼠體內(nèi)平滑肌細(xì)胞的浸潤，與體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果相反。為進(jìn)一步考察這一現(xiàn)象出現(xiàn)的原因，我們利用免疫熒光染色技術(shù)對大鼠內(nèi)源性的巨噬細(xì)胞CD68及其兩種分型M1、M2進(jìn)行定量考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，種植的外源性單核細(xì)胞在皮下埋植后逐漸消失并伴隨大鼠內(nèi)源性巨噬細(xì)胞浸潤地明顯減少，表明單核細(xì)胞的種植在一定程度上減輕了材料在體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，降低了內(nèi)源性巨噬細(xì)胞的遷移和浸潤程度。并且通過熒光染色發(fā)現(xiàn)減少的主要是內(nèi)源性M1促炎型巨噬細(xì)胞，而通常認(rèn)為M1型巨噬細(xì)胞可以通過分泌MCP1、TNFΑ等炎性因子對平滑肌細(xì)胞的遷移起促進(jìn)作用，提示體內(nèi)皮下埋植實(shí)驗(yàn)，平滑肌細(xì)胞的浸潤多少與內(nèi)源性巨噬細(xì)胞的浸潤程度正相關(guān)，而并不受種植的外源性單核細(xì)胞直接影響。

簡介：點(diǎn)擊查看更多bFGF對體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞生物學(xué)特性影響的初步研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：申請上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文樹突狀細(xì)胞表面樹突狀細(xì)胞表面C型凝集素受體型凝集素受體CLEC2表達(dá)差異表達(dá)差異對滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響對滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)生姓名薛卓維指導(dǎo)老師滕銀成教授學(xué)科專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)研究方向圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)培養(yǎng)單位上海市第六人民醫(yī)院答辯日期2014年10月28日上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。日期冫/年RΡ廠叫日上海交通大學(xué)

簡介：分類號(hào)密級UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文MIRNALETMIRNALET7A7A在肝內(nèi)膽管癌組織中在肝內(nèi)膽管癌組織中的表達(dá)及其對膽管癌細(xì)胞生物學(xué)行的表達(dá)及其對膽管癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究為影響的實(shí)驗(yàn)研究研究生姓名研究生姓名周璐璐周璐璐指導(dǎo)教師姓名、職稱指導(dǎo)教師姓名、職稱李灼日李灼日主任醫(yī)師主任醫(yī)師學(xué)科、專業(yè)名稱學(xué)科、專業(yè)名稱外科學(xué)外科學(xué)研究方向研究方向肝膽胰外科肝膽胰外科20132013年5月目錄英文縮寫詞表1中文摘要2英文摘要5引言9第一部分13材料與方法14結(jié)果17討論20第二部分24材料與方法25結(jié)果30討論37結(jié)論40參考文獻(xiàn)41綜述46主要成果目錄57致謝58

簡介：蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文大黃素對人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性及大鼠牙周組織IL6、BGP表達(dá)的影響姓名杜建東申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師余占海20080601內(nèi)能增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞ALP活性，10、20、100、200PG／M1濃度時(shí)對ALP活性無明顯影響。4、大黃素對大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型的牙周組織中IL一6、BGP表達(dá)的影響牙周炎組牙周組織中IL一6表達(dá)明顯高于正常組PO05，IL～6表達(dá)于治療第3、4周明顯低于牙周炎平行對照組PO05，牙周炎治療組IL一6表達(dá)第1、2周相比無明顯差異，第3、4周IL6表達(dá)相比亦無明顯差異，而第3、4周IL一6表達(dá)明顯低于第1、2周PO05。牙周炎組牙周組織中BGP表達(dá)低于正常組PO05，各時(shí)間段牙周炎治療組牙周組織中BGP表達(dá)明顯高于牙周炎平行對照組PO05，牙周炎治療組BGP表達(dá)第L、2周相比無明顯差異，第3、4周BGP表達(dá)明顯高于第1周PO05，而第3、4周之間BGP表達(dá)無明顯差異。結(jié)論大黃素在一定濃度范圍內(nèi)205011G／M1能提高牙周膜細(xì)胞的增殖活性、蛋白合成及ALP活性，大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型牙周組織中IL6含量較正常對照組明顯升高，BGP含量較正常對照組明顯降低，應(yīng)用大黃素能抑制實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎模型牙周組織中IL6的表達(dá)，增加了BGP的表達(dá)。根據(jù)上述結(jié)果證實(shí)大黃素可抑制牙周組織炎性反應(yīng)和促進(jìn)組織再生，從而為牙周病臨床的合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。關(guān)鍵詞大黃素，人牙周膜細(xì)胞，堿性磷酸酶，IL6，BGP，牙周炎模型Ⅱ

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簡介：中南大學(xué)博士學(xué)位論文SHRNA沉默RHOA對人結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究姓名楊開焰申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師陳道瑾20100501博士學(xué)位論文中文摘要第二章RNA干擾抑制結(jié)腸癌細(xì)胞株LOVO中RHOA的表達(dá)目的研究將P。HOASHRNA轉(zhuǎn)染入人結(jié)腸癌細(xì)胞株LOVO觀察其對細(xì)胞RHOA表達(dá)的沉默效應(yīng)。方法設(shè)計(jì)制備2對針對RHOA基因的SHRNA，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株LOVO，熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達(dá)；采用REALTIMERTPCR法測定RHOAMRNA的表達(dá)，WESTERNBLOT測定RHOA蛋白的表達(dá)。結(jié)果與未轉(zhuǎn)染的LOVOTK較，LOVOP1細(xì)胞RHOAMRNA與RHOA蛋白的表達(dá)強(qiáng)度分別為56330／0_4218％，33220／0_4227％，WESTEMBLOT結(jié)果與REALTIMERTPCR結(jié)果一致，和對照組比較有顯著性差異PO05。結(jié)論構(gòu)建的RHOASHIⅢA能有效抑制LOVO細(xì)胞中RHOA基因的表達(dá)；其中RHOASHIMAL干擾效果最佳。關(guān)鍵詞RHOA，RNA干擾，結(jié)腸癌細(xì)胞株。第三章RNA干擾RHOA的表達(dá)對結(jié)直腸癌細(xì)胞株LOVO生物學(xué)行為的影響目的研究RHOASHRNA對結(jié)直腸癌細(xì)胞株LOVO體外增殖、凋亡、遷移侵襲能力的影響，并初步探討其可能的機(jī)理。方法以成功構(gòu)建的穩(wěn)定表達(dá)SHRNA的LOVOP1為研究對象，以未轉(zhuǎn)染的LOVO細(xì)胞、LOVOP0為對照，繪制三組細(xì)胞的生長曲線比較生長差異，計(jì)算細(xì)胞倍增時(shí)間；MTT法比較三組細(xì)胞存活率的差異；細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、TRANSWELLD、室檢測三組細(xì)胞體外侵襲力的變化。結(jié)果未轉(zhuǎn)染的LOVO細(xì)胞、LOVOP0組細(xì)胞的各項(xiàng)指標(biāo)比較無明顯差異。與對照兩組的細(xì)胞比較，LOVOP1組的細(xì)胞生長明顯緩慢，從第四天開始生長速度明顯低于另外兩組，至對數(shù)生長期更明顯，生長曲線較平緩；LOVOP1組的細(xì)胞的倍增時(shí)間3124D時(shí)左右，延長約LOD時(shí)。LOVOP1組的細(xì)胞存活率明顯下降PO05。LOVOP1組的細(xì)胞的粘附力明顯下降PO05。LOVOP1遷移到劃痕區(qū)的細(xì)胞數(shù)明顯低于對照組P005。LOVOP1穿過MATRIGEL濾膜的細(xì)胞數(shù)明顯低于對照組P005。結(jié)論RHOA干擾質(zhì)粒P1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可抑制結(jié)腸癌細(xì)胞株LOVO的體外生長，使細(xì)胞倍增時(shí)間延長，抑制癌細(xì)胞的體外粘附、遷移侵襲能力。關(guān)鍵詞RHOA；SHRNA；粘附；侵襲。II

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目成人B系急性淋巴細(xì)胞白血病臨床和生物學(xué)特征與預(yù)后分析研究生姓名周潔指導(dǎo)教師姓名張日教授專業(yè)名稱血液病學(xué)研究方向白血病臨床與基礎(chǔ)論文提交日期2014年4月

簡介：碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目MIR31表達(dá)的抑制對胰腺癌PANC1細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制的初步探索研究生姓名胡波指導(dǎo)教師姓名匡玉庭專業(yè)名稱外科學(xué)研究方向消化系統(tǒng)腫瘤論文提交日期2014年5月