簡介：分類號B塑2魚UDC重慶醫(yī)科大學(xué)密級碩士學(xué)位論文論文題目不同轉(zhuǎn)移潛能喉癌細胞株的分離及生物學(xué)特性比較作者姓名傅然指導(dǎo)教師姓名職稱、單位名稱胡國華教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重慶市渝中區(qū)友誼路1號申請學(xué)位級別碩士學(xué)科、專業(yè)名稱耳鼻咽喉科學(xué)論文答辯年月2010年5月2010年5月目錄英漢縮略語名詞對照1中文摘要。2英文摘要4論文正文不同轉(zhuǎn)移潛能喉癌細胞株的分離及生物學(xué)特性比較6第一部分喉癌細胞系HEP2中不同轉(zhuǎn)移潛能細胞的分離71材料與方法72結(jié)J冪9I‘I寸論94，J、結(jié)11第二部分不同轉(zhuǎn)移潛能的細胞生物學(xué)特性檢測121材料與方法122結(jié)果183討論204，J、結(jié)2L全文總結(jié)。23參考文獻24PFFI蜀28文獻綜述3L蛩定謝。44攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文。45

簡介：蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文RNAI沉默GALECTIN1基因?qū)Ω伟┘毎飳W(xué)行為的影響姓名張暉漢申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師張有成20100501EFFECTSOFSILENCINGGALECTIN1GENEBYRNAIONTHEBEHAVIOROFHEPATOCYTECARCINOMACELLSABSTRACTOBJECTIVESTOESTABLISHTHEEXPERIMENTCONDITIONOFRNAINTERFERENCETOGALECTIN_1MRNAANDINVESTIGATETHEROLESOFGALECTIN1INTHEREGULATIONOFCELLBIOLOGICALBEHAVIOUROFHEPATOCYTECARCINOMACELLSMETHODSHUMANHEPATOCYTECARCINOMACELLSOFHEPG2WASCULTUREDAT37℃INAC02INCUBATORSPECIALSTEALTHRNAIWASTRANSFECTEDTOHEPATOCYTECARCINOMACELLSTESTRAINTHEEXPRESSIONOFGALECTIN1MRNARTPCRWASUSEDTOTESTTHESILENCINGRATEOFGALECTIN1GENEEXPRESSIONFLOWCYTOMETRYWASUSEDTOEXAMINETHEAPOPTOSISOFHEPG2CELLTHECELLPROLIFERATIONWASEXAMINEDBYMTIASSAYANDTHEINVASIONABILITYWASTESTEDBYMILLICELLCHAMBERSRESULTSAFTERTHETRANSFECTIONFOR48AND72HOURS，COMPAREDTOTHEBLANKCONTROL，THEEXPRESSIONOFGALECTIN1MRNAINHEPG2CELLSDECREASEDTO157％AND123％THECELLPROLIFERATIONRATEWASREDUCEDTO572％ANDTHENUMBEROFCELLSUNDERGOINGAPOPTOSISSIGNIFICANTLYINCREASEDTO225％AFTERTHETRANSFECTIONFOR48HOURSMEANWHILE，THEGALECTIN1MRNAEXPRESSIONRESTRAININGALSESULTEDINANINHIBITIONOFCELLMIGRATIONRATETO531％CONCLUSIONRNAINTERFERENCEBASEDONSIRNACANEFFECTIVELYINHIBITGALECTIN1GENEEXPRESSIONINHEPG2CELLSSILENCINGGALECTIN1GENEHASAN、一一澎鬻、，～

簡介：分類號學(xué)號D200878196學(xué)校代碼10487密級博士學(xué)位論文ATDC在大腸癌中的表達及其臨床意義和對腫瘤細胞生物學(xué)行為的影響學(xué)位申請人鄧軍學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師王國斌教授答辯日期2012年5月

簡介：點擊查看更多人臍帶來源間充質(zhì)干細胞生物學(xué)特性的研究及其對移植物抗宿主病作用的初步探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：四川大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠牙囊細胞體外培養(yǎng)方法的改良及生物學(xué)特性的初步研究姓名葉國申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師吳亞菲20070501聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本學(xué)位論文是本人在四川大學(xué)讀書期間在導(dǎo)師指導(dǎo)下取得的，論文成果歸四川大學(xué)所有，特此聲明。申請人指導(dǎo)教師Ⅻ卞閨P＼學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解四川大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)四川大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。學(xué)位論文作者簽名V十閨導(dǎo)師簽名≯，一1’簽字目期年月日簽字日期年月日＼學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向、工作單位通訊地址聯(lián)系方式郵政編碼

簡介：分類號學(xué)號M200975221學(xué)校代碼10487密級碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文下調(diào)下調(diào)PMS2基因后基因后A2780細胞細胞體外生物學(xué)功能的研究體外生物學(xué)功能的研究學(xué)位申請人劉子昳學(xué)科專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師王澤華教授答辯日期2012年4月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月

簡介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文靶向PEROXIREDOXINⅠ/Ⅱ誘導(dǎo)白血病細胞分化的化學(xué)生物學(xué)研究姓名劉傳緒申請學(xué)位級別博士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師陳國強20120428上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文劉傳緒靶向PEROXIRCDOXINI／II誘導(dǎo)白血病細胞分化的化學(xué)生物學(xué)研究IC50，1．5HM和PRXII表面IC50，15¨M過氧化物酶的活性。進一步的分子動力學(xué)實驗表明腺花素與PRXI結(jié)合強于與PRXII結(jié)合。6在維甲酸敏感及耐藥的急性早幼粒白血病細胞中，腺花素能很快上調(diào)C／EBPL3的轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平。C／EBPL3作為造血系統(tǒng)中的重要轉(zhuǎn)錄因子在髓系分化中發(fā)揮了重要作用。干擾PRXI或PRXII出現(xiàn)同樣效應(yīng)。與體外抑帶LJPRXFII酶活相一致的是腺花素在細胞內(nèi)引起中度H202上調(diào)。H202的清除劑N．乙酰．L．半胱氨酸可以完全阻斷腺花素誘導(dǎo)的白血病細胞分化及C／EBPL3的A2調(diào)。我們也發(fā)現(xiàn)中度H202上調(diào)可以快速活化ERKL／2，且ERKL／2的特異性抑制劑PD98059也可以阻斷腺花素誘導(dǎo)的白血病細胞分化及C／EBPIB的上調(diào)。于是我們提出PRXI／IIH202．ERKL／2．C／EBPL3信號通路參與腺花素誘導(dǎo)白血病細胞分化?？偵纤觯覀兊难芯繄蟮老倩ㄋ刈鳛榈谝粋€開發(fā)PRXI／II靶向治療藥物的天然產(chǎn)物，且PRXI／II在急性早幼粒白血病的發(fā)病學(xué)及治療學(xué)存在重要的研究價值。關(guān)鍵詞腺花素，急性早幼粒性白血病，細胞分化，化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)，過氧化還原酶I和II，過氧化氫2

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文四個H22克隆細胞株的RAPD特征及H22H8D8傳代細胞的生物學(xué)特性研究姓名王險峰申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師劉福英20060301中文摘要RANDOMAMPLIFIEDPOLYMORPHICDNA，RAPD可適用于任何一種未知基因核苷酸序列的生物學(xué)研究，并且它能客觀地反映生物整個基因組的特征。近年來已有大量應(yīng)用RAPD技術(shù)研究物種遺傳多樣性的報道，但運用RAPD技術(shù)研究腫瘤細胞株遺傳特性的報道尚不多見。本研究擬從47條引物中篩選出能夠較好的區(qū)分4個H22克隆細胞株的特異性引物，以對4個122克隆細胞株進行R鉀D特征分析研究。同時建立腫瘤動物模型，從體內(nèi)、體外兩方面觀察比較H22H8D8傳代細胞的遺傳穩(wěn)定性。為進一步比較分析其遺傳背景提供基礎(chǔ)資料。方法一、選用47條隨機引物對4個克隆細胞株H22H8D8、H22H2C4、H2212G4、H22一H2E10進行凡心D特征的分析研究。1腫瘤細胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管，迅速置于38℃水浴使其融化；無菌操作下取出細胞懸液至離心管中，補加10M1GKN液，1000轉(zhuǎn)／分離心5分鐘，去除上清液，重復(fù)一次該步驟。用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后移入培養(yǎng)瓶中，置于5℃C02培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液；按12的比例傳代細胞，傳代間隔一般是1次／天。2基因組DNA的制備用傳代細胞系作供體細胞，集細胞總數(shù)在L108個，用PBS液洗滌及TE緩沖液重懸細胞，加入DNA裂解液，55℃過夜，TRIS飽和酚及氯仿異戊醇241分別抽提，然后加入醋酸鈉及無水乙醇沉淀得到基因組DNA，75％的乙醇洗滌后，TE溶解備用。3RAPD特征分析應(yīng)用47條引物對4個H22細胞克

簡介：中圖分類號R78學(xué)科代號100302Y979881單位代碼10661研究生學(xué)號2003094基舞爭擎瓏碩士研究生畢業(yè)論文凍存對骨髓基質(zhì)細胞生物學(xué)特性影響的實驗研究EFFECTSOFCRYOPRESERVATIONCONDITIONOILTHEBIOLOGICALPROPERTIESOFBONEMARROWSTROMALCELLS研究生李厚軒專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)口腔內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師劉建國教授閆福華教授指導(dǎo)小組陳超副教授陳群講師研究起止時間2004年9月至2006年4月二0O六年四月中國遵義凍存對骨衄基質(zhì)細胞生物學(xué)特性影響的實驗研究PDGFPETPGAPLAPLGAPRPEPRRFERANKLRPTCPTGFVEGFPLATELETDERIVEDGROWTHFACTORPOLYETHYLENETEREPHTHALATEPOLYGLYCOLIDEPOLYLACTIDEPOLYLACTIDECOGLYCOLIDEPLATELETRICHPLASMAEPOLYTETRAFLUOROETHYLENERECEPTORACTIVATOROFNFKAPPABLIGANDRAPIDPROTOTYPINGTRICALCIUMPHOSPHATETRANSFORMINGGROWTHFACTORVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR3血小板衍生生長因子聚對苯二甲酸乙二醇酯聚羥基乙酸聚乳酸聚乳酸羥基乙酸富血小板血漿聚四氟乙烯KB受體活化因子配基快速模板磷酸三鈣轉(zhuǎn)化生長因子血管內(nèi)皮細胞生長因子

簡介：分類號基§塑2￡基Z2§2．．．．一一UDC密級博士學(xué)位論文胃癌SGC．7901細胞株側(cè)群細胞分選及生物學(xué)特性的論文題目墊壟塹窒作者姓名鎣鏊一一指導(dǎo)教師姓名職稱、單位名稱墨塵塑墼堡重鏖匡型盔堂墮星篁三醫(yī)墮迫垡凼型一一申請學(xué)位級別博士學(xué)科、專業(yè)名稱內(nèi)科學(xué)論文答辯年月三壁蘭堡苧旦一一2013年5月目錄英漢縮略語名詞對照??????????????????????????1中文摘要???????????????????????????????。3英文摘要????????????????????????．．．??????．5論文正文胃癌SGC．7901細胞株側(cè)群細胞分選及生物學(xué)特性的初步研究????7前言????????????????????????????????????????．7第一部分胃癌SGC．7901細胞株側(cè)群細胞分選及生物學(xué)特性的研究????。121．材料???????????????????????????????????????122．方法???????????????????????．．．???????????????143．結(jié)果???????????????????????????????????????174．討論???????????????????????????????????????22第二部分胃癌側(cè)群細胞耐藥性研究及干細胞相關(guān)基因檢測????????。251．材料??????????????????????????????252．方法???????????????????????????????????????273．結(jié)果???????????????????????????????????????334．討論??????????????????????????????????????．38全文總結(jié)??????????????????????????????．．41參學(xué)文獻?????．?????????????????????????．42文獻綜述??????????????????????????????．．47致謝??????????????????????????????????????????．．63博士期間發(fā)表的論文?????????????????????????．64

簡介：四川大學(xué)博士學(xué)位論文TIMP2基因轉(zhuǎn)染對C6膠質(zhì)瘤干細胞生物學(xué)特性的影響姓名肖其華申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)（神外）指導(dǎo)教師毛伯鏞20070401聲明秉承學(xué)校嚴謹?shù)膶W(xué)風(fēng)與優(yōu)良的科學(xué)道德，本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他入已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，不包含本人或他人已申請學(xué)位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了致謝。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本入承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽導(dǎo)師簽名

簡介：胚胎干細胞來源于胚胎時期囊胚的內(nèi)細胞團，是一種多潛能的干細胞，能在體外進行長期的自我更新，在體內(nèi)外可以分化為三個胚層來源的各種細胞類型，因而在基礎(chǔ)研究和臨床治療中都有很好的應(yīng)用前景。APODEMUSSYLVATICUS是一種嚙齒類動物，與小鼠在進化方面兩者差距比較大，與大鼠和小鼠之間的遺傳差距相近。本研究建立了了APODEMUSSYLVATICUS的胚胎干細胞系，命名為ASES1，具有24對染色體，能在體外長期培養(yǎng)傳代中保持未分化狀態(tài)，在體外自然分化能形成胚體，注射于裸鼠皮下能形成畸胎瘤。該細胞系表達多種多能性的分子標記，包括堿性磷酸酶、OCT4、NANOG和REX1，但是不表達SSEA1，SSEA3，SSEA4，TRA160和GCTM2。本研究還成功將GFP和DSRED兩種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染該細胞系，同時細胞仍保持增殖和分化潛能，并用RNA干擾技術(shù)滅活上述兩種基因在細胞內(nèi)的表達，證明該細胞系能進行基因操作。ASES的建立為APODEMUSSYLVATICUS發(fā)育和遺傳的研究提供重要的工具，使APODEMUSSYLVATICUS有望成為研究基因功能的新的模式動物。本實驗包括兩個部分1、APODEMUSSYLVATICUS胚胎干細胞系的建立2、APODEMUSSYLVATICUS胚胎干細胞系的生物學(xué)特性分析第一部分APODEMUSSYLVATICUS胚胎干細胞系的建立材料和方法11動物飼養(yǎng)APODEMUSSYLVATICUS的飼養(yǎng)條件于小鼠相似，包括飲食、溫度等。12胚胎干細胞系的建立使用79周的APODEMUSSYLVATICUS進行交配。取受精后35天母鼠的子宮，用M2培養(yǎng)液沖洗并收集囊胚，然后接種于預(yù)先接種好的放射后的小鼠胚胎成纖維細胞作為飼養(yǎng)層細胞的24孔板中。囊胚在培養(yǎng)12天后，胚胎會從透明帶孵出，內(nèi)細胞團明顯增殖長大，繼續(xù)培養(yǎng)34天，然后挑取增殖的內(nèi)細胞團消化吹打成單個細胞，接種于新的飼養(yǎng)層細胞上。47天后即可以觀察到未分化的胚胎干細胞克隆的生長。培養(yǎng)條件為37℃，5％CO2和95％濕度。結(jié)果從受精35天的母鼠子宮中獲得5個囊胚，其中的一個幾天后長出大量的類似小鼠胚胎干細胞的克隆。這些克隆成圓形，邊界清楚。克隆內(nèi)的細胞排列緊密，核漿比例高，有明顯的核仁，命名為ASES1。白血病抑制因子和飼養(yǎng)層細胞能夠保持培養(yǎng)細胞的未分化狀態(tài)，這與小鼠的胚胎干細胞類似。結(jié)論成功從嚙齒類動物APODEMUSSYLVATICUS的囊胚獲得了一種新的胚胎干細胞系，它能在體外長期傳代培養(yǎng)，細胞形態(tài)特征與小鼠胚胎干細胞類似。第二部分APODEMUSSYLVATICUS胚胎干細胞系的生物學(xué)特性分析材料和方法21生長曲線生長曲線是評估細胞生長特性的有效工具，從生長曲線可以確定群體倍增時間。以06105ML的密度接種于六孔板，每12小時消化細胞進行計數(shù)。以E14細胞株作為對照。22干細胞標記的表達為了檢測該細胞的堿性磷酸酶活性，將細胞固定于4％的多聚甲醛PBS，用堿性磷酸酶的底物BCIPNBT進行染色。為了進行免疫細胞化學(xué)的檢測，用下列一抗進行孵育，包括SSEA1，SSEA3，SSEA4，TRA160，GCTM2，OCT4，然后用FITC標記二抗與一抗結(jié)合，最后用DARPI對樣品進行染色，在熒光顯微鏡下觀察。用RTPCR檢測各種基因得表達。首先從胚胎干細胞提取RNA，用SENSI逆轉(zhuǎn)錄酶合成互補得CDNA，然后用PCR擴增目的基因。目的基因和其引物序列如下OCT4，NANOG，REX1，陽性對照用GAPDH。23核型分析和性別鑒定染色體的準備如下在胚胎干細胞的培養(yǎng)液中加入01MGML的秋水仙素溫育一個小時，然后胰酶消化，用0075MKCL溶液重懸室溫下放置20分鐘，再在甲醇乙酸混合液3∶1中固定一個小時，然后置于玻片上。分散的染色體用1％的姬姆薩染料染色然后拍片，至少要數(shù)20個出于分裂中期的分散染色體和分析5條G帶的核型。該細胞株的性別通過PCR的方法鑒定，目的基因是基因組DNA的Y染色體相關(guān)基因TSPY，陽性對照用X染色體相關(guān)基因POLA1以及GAPDH。24體內(nèi)外分化能力的檢測體外分化胚胎干細胞消化成單個細胞后接種于不貼壁的培養(yǎng)皿，使用不含白血病抑制因子的培養(yǎng)液，培養(yǎng)兩周后可見大量胚體形成。然后將胚體接種于貼壁的組織培養(yǎng)皿進行誘導(dǎo)分化。所得到的分化細胞用如下幾種抗體進行檢測內(nèi)胚層ALBUMIN，中胚層DESMIN，外胚層NESTIN，GFAP和TUJ1，然后用CY3羊抗鼠的二抗進行標記。體內(nèi)分化為了檢測其畸胎瘤的形成能力，取12X106未分化的胚胎干細胞注射于48周大小的裸鼠皮下，注射后8周取出畸胎瘤用4％的多聚甲醛進行固定，常規(guī)石蠟切片和HE染色。25質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染用于轉(zhuǎn)染的兩種質(zhì)粒為PTP6HRGFP和PTP6DSRED2，分別表達綠色和紅色熒光蛋白。兩種質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶SCA1進行線性化。轉(zhuǎn)染后的細胞先用無抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時，再加入PUROMYCIN終濃度為2UGML進行篩選。篩選7天后挑取抗PUROMYCIN的克隆進行胰酶消化，然后接種與新的飼養(yǎng)層細胞上進行培養(yǎng)。26RNA干擾在進行RNA干擾時，先將轉(zhuǎn)染HRGFP的細胞以較低的密度接種于6孔板中，然后用LIPOFECTAMINE2000將雙鏈的SIRNA轉(zhuǎn)染至細胞內(nèi)，進行GFP基因的干擾，設(shè)立陰性對照。24小時后再用LIPOFECTAMINE2000進行第二次轉(zhuǎn)染。結(jié)果21生長曲線所測得的ASES1的群體倍增時間為12小時，而E14為17小時，說明該細胞的增殖速度更快。該細胞已經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)傳代半年P(guān)80，其細胞形態(tài)和增殖速度都沒有明顯的改變。22染色體分析和性別鑒定取P24，P63和P80代數(shù)的ASES1細胞進行核型分析，結(jié)果為48條染色體為正常核型，表明該細胞可在體外長期培養(yǎng)同時保持核型的穩(wěn)定。核型分析觀察到類似Y染色體的存在。設(shè)計PCR實驗擴增Y染色體相關(guān)基因TSPY，證實該細胞含有Y染色體，其核型為48X，Y。23干細胞分子標記的表達絕大多數(shù)細胞表達堿性磷酸酶。檢測OCT4，SSEA1，SSEA3，SSEA4，TRA160和GCTM2的表達，只有OCT4為陽性。最后，用RTPCR方法檢測OCT4，NANOG和REX1，發(fā)現(xiàn)三種標記均為陽性。24分化能力體外分化APODEMUSSYLVATICUS胚胎干細胞在沒有飼養(yǎng)層細胞和白血病抑制因子的條件下，在不貼壁的培養(yǎng)皿培養(yǎng)時可見有胚胎體形成。將胚體接種于貼壁的組織培養(yǎng)皿，從胚體生長出來的細胞在形態(tài)上有明顯的異質(zhì)性。用免疫細胞化學(xué)的方法可以檢測到三個胚層來源的細胞類型。體外分化取出畸胎瘤進行石蠟切片和HE染色。結(jié)果可見三個胚層的細胞類型，如內(nèi)胚層的呼吸道上皮，腺上皮和腸上皮，中胚層的脂肪和肌肉，外胚層的皮膚細胞和神經(jīng)元。25質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染PTP6HRGFP和PTP6DSRED2這兩種質(zhì)粒都帶有PUROMYCIN的抗性基因，轉(zhuǎn)染后用PUROMYCIN篩選一段時間，挑取若干能夠穩(wěn)定表達熒光蛋白的克隆繼續(xù)擴增，選取其中的兩個克隆作進一步的分析ASES1GFP1和ASES1DSRED1。這兩株細胞在體外培養(yǎng)傳代超過15代仍然保持典型的未分化狀態(tài)，生長正常而且熒光表達也沒有減弱，還能產(chǎn)生帶有熒光的胚胎體和畸胎瘤，通過胚層特異分子標記檢測可見存在有三個胚層的細胞。26RNA干擾選取能穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的ASES1GFP1細胞株，將特異干擾GFP編碼RNA的SIRNA轉(zhuǎn)染進細胞內(nèi)，48小時后即可見到綠色熒光蛋白表達明顯減弱。這說明該細胞能用于SIRNA介導(dǎo)的基因滅活，將有助于基因功能的研究。結(jié)論1該細胞系增殖速度比小鼠ES更快。2它表達多種干細胞分子標記，如ALP，OCT4，NANOGREX1，但是不表達SSEA1，SSEA3，SSEA4，TRA160和GCMT2。3體外長期培養(yǎng)過程中保持核型穩(wěn)定和在體內(nèi)外向三個胚層分化的能力。

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文ΒCATENIN對K562細胞體內(nèi)成瘤能力及對原代CML干祖細胞體內(nèi)外生物學(xué)功能影響的初步研究姓名王國蓉申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液）指導(dǎo)教師邱錄貴翟瓊莉20080501中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院博上研究生學(xué)位論文MMMILLIMOLEMONONUCLEARCEL1ODOPTICALDENSITYPCRRPMRTPCRRQPCRAMPHEMPO單抗CGYDMSOFBS毫摩爾每升單個核細胞光密度值POLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈反應(yīng)ROTATEPERMINUTE每分鐘轉(zhuǎn)速REVERSETRANSCRIPTIONPCR逆轉(zhuǎn)錄PCRREALTIMEQUANTITATIVERTPCR實時定量PCRAMPICILLINHEMATOXYLINEOSINE氨芐青霉素蘇木素一伊紅MYELOPEROXIDASE髓過氧化物酶MONOCLONALANTIBODYCENTIGRAYDIMETHYLSULFOXIDEFETALBOVINESERUM第73頁單克隆抗體厘戈瑞放射劑量單位二甲基亞砜胎牛血清

簡介：分類號密級單位代碼學(xué)號10114201030958兔角膜緣干細胞體外無血清培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究研究生指導(dǎo)老師申請學(xué)位門類級別專業(yè)名稱研究方向所在學(xué)校黃曉梅馬蕾副教授醫(yī)學(xué)碩士眼科學(xué)眼屈光及年齡相關(guān)眼第二臨床醫(yī)學(xué)院2012年5月6日山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄摘要IABSTRACTII前言1月U吾材料與方法2結(jié)果4口木‘討侖6結(jié)論9附圖10參考文獻12綜述15參考文獻20個人簡介23致謝一24

簡介：學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌大堂或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。榭黼圳矧分修忱C勿孓／學(xué)位論文『版權(quán)槿用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文儲簽名C手寫幸妒罨／鋤簽名C矧_芋矗藿【∥簽字日期≮D、≥年易月弋日簽字日期年月日I|摘要MRNA水平，免疫組織化學(xué)技術(shù)測定HVTMMP一2蛋白表達，ELISA測定HVT培養(yǎng)上清液MMP2的濃度。5、HVT和HUVSMC的凋亡測定流式細胞術(shù)。結(jié)果1、藥物最佳作用濃度及時問10NG／ML20HETE作用48H后顯著促進HVT、HUVSMC的增殖10RTG／MLHET0016作用48H后顯著抑制HVT、HUVSMC的增殖。2、20HETE抑制HVT的遷移能力HVT單培養(yǎng)時，與對照組相比，20HETE組的TRANSWELL小室中HVT的遷移數(shù)目明顯減少；20HETE與HET0016聯(lián)合干預(yù)組的遷移數(shù)目顯著減少；HET0016組的遷移數(shù)目顯著增加。3、20一HETE抑制HVT的浸潤能力HVT單培養(yǎng)時，與對照組相比，20HETE組，HVTMMP2的轉(zhuǎn)錄水平、蛋白表達及上清液濃度明顯降低；20HETE與HET0016聯(lián)合干預(yù)組，其轉(zhuǎn)錄水平、蛋白表達及上清液濃度顯著降低；HET0016組，其轉(zhuǎn)錄水平、蛋白表達及上清液濃度顯著升高。4、20HETE抑制HVT和HUVSMC的凋亡無論HVT、HUVSMC單培養(yǎng)，還是HVTHUVSMC共培養(yǎng)，與對照組相比，20一HETE組，HVT、HUVSMC的凋亡率明顯降低；20HETE與HET0016聯(lián)合干預(yù)組，HVT、HUVSMC的凋亡率顯著降低；HET0016組，HVT、HUVSMC的凋亡率顯著升高。結(jié)論20一HETE作為參與重塑過程及血管維護的多個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的上游調(diào)控因子，能夠促進絨毛膜滋養(yǎng)細胞、子宮血管平滑肌細胞的增殖，抑制絨毛膜滋養(yǎng)細胞的浸潤能力，抑制絨毛膜滋養(yǎng)細胞、子宮血管平滑肌細胞的凋亡，并強烈抑制絨毛膜滋養(yǎng)細胞介導(dǎo)的子宮平滑肌細胞的凋亡。提示20一HETE及HET0016對子宮螺旋動脈重塑主要參與細胞生物學(xué)行為的影響，可導(dǎo)致螺旋動脈重塑障礙以及血管功能紊亂，引發(fā)子癇前期。關(guān)鍵詞子宮螺旋動脈重塑；20羥二十烷四烯酸；子宮血管平滑肌細胞；絨毛膜滋養(yǎng)細胞；基質(zhì)金屬蛋白酶