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文檔簡介
1、目的:獲得高侵襲性喉癌細胞株,為建立高轉移喉癌動物模型奠定基礎。
方法:改良侵襲實驗篩選出高低兩種侵襲潛能喉癌細胞亞群,通過檢測兩種侵襲潛能喉癌細胞亞群的生長曲線、倍增時間和流式細胞術來測定兩種細胞的生長和周期差異;采用侵襲實驗、遷移實驗檢測兩種侵襲潛能喉癌細胞亞群的侵襲和遷移能力的差異;各取5只裸鼠進行移植瘤接種動物實驗來檢測兩種侵襲潛能喉癌細胞亞群在體內腫瘤生長和轉移能力的差異。RT-PCR及免疫組化檢測兩種侵襲潛能喉
2、癌細胞亞群VEGF-C的表達差異。
結果:經過改良侵襲實驗篩選出了高低兩種侵襲潛能細胞亞群,高侵襲潛能細胞亞群倍增時間為31.64±1.08 h,低侵襲潛能細胞亞群倍增時間為60.24±11.09 h(P<0.05);高侵襲潛能細胞亞群增殖指數(shù)為(27.56±0.51)%,低侵襲潛能細胞亞群增殖指數(shù)為(16.25±0.81)%(P<0.01);高侵襲潛能細胞亞群侵襲細胞數(shù)為210.20±12.93,低侵襲潛能細胞亞群侵襲細
3、胞數(shù)為11.60±4.98(P<0.01);高侵襲潛能細胞亞群遷移細胞數(shù)為229.80±12.07,低侵襲潛能細胞亞群遷移細胞數(shù)為6.00±4.53(P<0.01)。動物實驗中,高低侵襲組在裸鼠體內的成瘤時間分別為2周和4周,第5周處死后解剖及病理檢查結果,高侵襲組3只同側胭窩淋巴結轉移、4只同側腹股溝淋巴結轉移、1只對側腹股溝淋巴結轉移;低侵襲組1只同側腹股溝淋巴結反應性增生,2只同側腹股溝淋巴結轉移;高侵襲潛能組瘤重為(17.0±3
4、.0)mg,低侵襲潛能組瘤重為(9.7+3.8)mg(P<0.05);高侵襲潛能組瘤內血管數(shù)為21.2±4.0,低侵襲潛能組瘤內血管數(shù)為1.4士0.9(P<0.01)。高侵襲潛能組VEGF-C的mRNA及蛋白質的表達均較低侵襲潛能組更多(P<0.05)。
結論:成功從喉癌同一親本細胞系中分離得到了高低兩種侵襲潛能細胞亞群,高侵襲性亞群的增值能力、侵襲性和轉移能力均高于低侵襲性亞群,其惡性程度高于低侵襲性亞群。因為可能是高侵
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